新疆維吾爾族、漢族乳腺癌患者分子分型及預(yù)后的研究

王 雯， 師 藝， 馬志萍， 張 巍

(新疆醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院病理科, 烏魯木齊 830054)

乳腺癌是危害女性健康最常見、發(fā)病率最高的惡性腫瘤。新近的研究顯示，近40年來亞洲女性的乳腺癌發(fā)病率在逐年上升[1]。乳腺癌是一組異質(zhì)性很高的腫瘤，其分子生物學(xué)分型。 能較好地反映腫瘤的生物學(xué)行為,具有重要的臨床指導(dǎo)意義[2]。2011年第12屆St. Gallen國際乳腺癌研討會(huì)上，對(duì)如何根據(jù)分子指標(biāo)確定乳腺癌的亞型達(dá)成共識(shí)，將乳腺癌歸為4個(gè)亞型，即Luminal A型、Luminal B型、Erb-B2過表達(dá)型及基底樣型[3]。有關(guān)研究顯示，新疆地區(qū)維吾爾族乳腺癌發(fā)病率在逐年增加[4]。本研究擬探討新疆維吾爾族、漢族乳腺癌患者的分子分型和預(yù)后的關(guān)系，以促進(jìn)對(duì)乳腺癌臨床和病理特征的進(jìn)一步認(rèn)識(shí)。

1 材料與方法

1.1一般資料收集2001年1月-2008年12月新疆醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院收治的、具有完整臨床及病理資料的307例維吾爾族與漢族乳腺癌患者臨床資料，其中維吾爾族患者83例，漢族患者224例，維吾爾族與漢族之比為1∶2.70，均為女性，所有病例均經(jīng)病理學(xué)明確診斷及手術(shù)治療，臨床分期為Ⅰ～Ⅲ期，維吾爾族發(fā)病年齡為23～75歲，平均年齡(44.89±11.36)歲，漢族患者發(fā)病年齡為23～92歲，平均年齡(50.85±13.09)歲。

1.2分子分型利用免疫組織化學(xué)方法(IHC)檢測(cè)乳腺癌組織中雌激素受體(ER)、孕激素受體(PR)、表皮生命因子受體溫表2(HER-2)和Ki-67的表達(dá)情況，實(shí)驗(yàn)所用一抗ER、PR和Ki-67購自丹麥DAKO公司，HER-2購自Roche公司。結(jié)果判讀：ER、PR：觀察和評(píng)估切片中所包含的所有腫瘤細(xì)胞，陽性腫瘤細(xì)胞≥1%為陽性，陽性腫瘤細(xì)胞<1%為陰性；Ki-67：陽性染色定位于細(xì)胞核，按任意5個(gè)高倍鏡視野中陽性細(xì)胞所占比例的平均值定義為陽性細(xì)胞百分比并作為評(píng)定依據(jù)；HER-2：使用ASCO/CAP指南和中國乳腺癌HER-2檢測(cè)指南(2009版)推薦的評(píng)分系統(tǒng)進(jìn)行結(jié)果的判定[5]，陰性(0～1+)：無著色或任何比例的浸潤癌細(xì)胞呈現(xiàn)微弱、不完整的細(xì)胞膜著色；陽性(3+)：>30%的浸潤癌細(xì)胞呈現(xiàn)強(qiáng)、完整而均勻的細(xì)胞膜著色；需行FISH檢測(cè)(2+)：>10%的浸潤癌細(xì)胞呈現(xiàn)弱至中等強(qiáng)度、完整但不均勻的細(xì)胞膜棕黃色著色或<30%的浸潤癌細(xì)胞呈現(xiàn)強(qiáng)且完整均勻的細(xì)胞膜著色。

FISH法檢測(cè)HER-2免疫組化染色2+的病例，HER-2基因檢測(cè)試劑盒購自雅培公司。判讀標(biāo)準(zhǔn)：選擇腫瘤細(xì)胞區(qū)域，觀察并記錄30個(gè)細(xì)胞核中的橘色信號(hào)和綠色信號(hào)。用總橘色信號(hào)數(shù)除以總綠色信號(hào)數(shù)得到比值：如果比值<1.8，則認(rèn)為未觀察到HER-2基因擴(kuò)增；如果比值>2.2，則認(rèn)為觀察到HER-2基因擴(kuò)增；如果比值在臨界值(1.8～2.2)上或其附近，則再計(jì)數(shù)20個(gè)細(xì)胞核并重新計(jì)算該比值，如果仍在臨界值，可以增加計(jì)數(shù)細(xì)胞至100個(gè)或重做FISH檢測(cè)[6]。

根據(jù)文獻(xiàn)[7]將乳腺癌歸為Luminal A型、Luminal B型、Erb-B2過表達(dá)型及基底樣型4個(gè)亞型。 Luminal A型：ER和(或)PR陽性、HER-2陰性、Ki-67低表達(dá)(<14%)；Luminal B型：(1)Luminal B(HER-2陰性)：ER和(或)PR陽性、HER-2陰性、Ki-67高表達(dá)(≥14%)；(2)Luminal B(HER-2陽性)：ER和(或)PR陽性、HER-2過表達(dá)或增殖、Ki-67任何水平；Erb-B2過表達(dá)型：ER和PR缺失、HER-2過表達(dá)或增殖；基底樣型：ER和PR缺失、HER-2陰性。

1.3隨訪生存時(shí)間從手術(shù)日開始計(jì)算，無病生存時(shí)間定義為從手術(shù)日到復(fù)發(fā)或轉(zhuǎn)移的時(shí)間，患者未發(fā)生復(fù)發(fā)或轉(zhuǎn)移的則記錄為從手術(shù)日到最后一次隨訪的時(shí)間。對(duì)有條件的患者通過查閱病歷根據(jù)其住院復(fù)查情況了解其預(yù)后情況，其余患者通過電話隨訪，了解術(shù)后病情是否穩(wěn)定、有無復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移并由此疾病導(dǎo)致患者死亡。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)處理應(yīng)用 SPSS17.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。組間比較采用χ2檢驗(yàn)，檢驗(yàn)水準(zhǔn)α=0.05；生存分析采用Kaplan-Meier法對(duì)生存資料進(jìn)行Log-rank檢驗(yàn)。

2 結(jié)果

2.1維吾爾族、漢族患者乳腺癌組織的分子分型構(gòu)成情況307例患者中Luminal A型118例(38.44%)，Luminal B型106例(34.53%)，Erb-B2過表達(dá)型21例(6.9%),基底樣型62例(20.20%)。維吾爾族、漢族乳腺癌患者分子分型構(gòu)成比差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=7.382，P=0.061)，見表1。

表1 維吾爾族、漢族患者乳腺癌組織的分子分型構(gòu)成情況/例(%)

2.2隨訪307例中有完整隨訪資料者271例(88.27%)，隨訪時(shí)間50～134個(gè)月，中位隨訪時(shí)間92個(gè)月。全組復(fù)發(fā)18例(5.86%)，轉(zhuǎn)移52例(16.94%)。復(fù)發(fā)/轉(zhuǎn)移：維吾爾族患者28例(33.73%),漢族患者42例(18.75%)；中位無病生存時(shí)間：維吾爾族患者64.5個(gè)月，漢族患者70個(gè)月(表2)。

2.3生存分析運(yùn)用Kaplan-Meier法對(duì)307例乳腺癌患者不同民族和不同分子分型進(jìn)行單因素Log-rank檢驗(yàn)，結(jié)果顯示，不同民族和不同分子分型的無病生存時(shí)間差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均<0.05)，見表2。由生存曲線可以看出，漢族患者預(yù)后較好，各分子分型中Luminal A型預(yù)后較好，Erb-B2過表達(dá)型預(yù)后較差，生存曲線見圖1、2。

表2 307例乳腺癌患者各分子分型的無病生存率比較

圖1 不同民族患者的生存曲線

圖2 各分子分型的生存曲線

3 討論

近年來提出的乳腺癌分子生物學(xué)分型能較好地反映腫瘤的生物學(xué)行為, 是對(duì)傳統(tǒng)腫瘤組織學(xué)分類的重要補(bǔ)充。本研究依據(jù)2011年第12屆St.Gallen國際乳腺癌研討會(huì)上對(duì)乳腺癌各分型達(dá)成共識(shí)的定義，將乳腺癌歸為4個(gè)亞型，307例患者中Luminal A型占38.44%，Luminal B型占34.53%，Erb-B2過表達(dá)型占6.84%，基底樣型占20.20%。Adebamowo等[8]研究顯示192例乳腺癌的分子分型，Luminal A型占77.6%，Luminal B型占2.6%，HER-2過表達(dá)型占4.0%，Basal-like型占15.8%；O′Brien等[9]研究顯示，美國白人和黑人的乳腺癌分子分型(Luminal A型，Luminal B型，HER-2過表達(dá)型和Basal-like型)所占比例分別為64%、11%、5%、11%和48%、8%、7%、22%。與本研究結(jié)果略有不同,其原因是使用的分子分型定義不同，目前尚無使用新版乳腺癌分子分型定義研究新疆維吾爾族、漢族乳腺癌患者的報(bào)道，新的分子分型對(duì)維吾爾族、漢族乳腺癌患者的療效評(píng)價(jià)和預(yù)后分析的影響尚不明確，本研究結(jié)果為今后的進(jìn)一步研究提供了一定的理論依據(jù)。

本研究結(jié)果顯示，維吾爾族、漢族乳腺癌患者各分子分型構(gòu)成比差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.061)，提示2個(gè)民族乳腺癌患者分子分型基線水平一致，均衡可比，分子分型可作為獨(dú)立預(yù)后因素進(jìn)行單因素Log-rank檢驗(yàn)。

本研究運(yùn)用Kaplan-Meier法對(duì)307例維吾爾族、漢族乳腺癌患者進(jìn)行的單因素Log-rank檢驗(yàn)結(jié)果顯示，不同民族乳腺癌患者生存率差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.004)，由生存曲線可以看出，漢族患者預(yù)后優(yōu)于維吾爾族患者。有研究顯示，新疆地區(qū)維吾爾族、漢族患者就診時(shí)腫瘤TNM分期構(gòu)成比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，維吾爾族患者就診時(shí)腫瘤TNM分期較晚[10]。維吾爾族乳腺癌患者發(fā)病年齡高峰為30～44歲，漢族患者發(fā)病年齡高峰為40～49歲，維吾爾族患者發(fā)病年齡明顯前移[10-11]。年輕化的乳腺癌患者惡性程度增加，進(jìn)展加快，更易復(fù)發(fā)及轉(zhuǎn)移，預(yù)后也相對(duì)差。成芳等[12]研究報(bào)道，與漢族患者相比,新疆維吾爾族乳腺癌患者從事農(nóng)業(yè)生產(chǎn)和小學(xué)文化程度比例明顯偏高，沒有較好的腫瘤防治意識(shí)和相對(duì)較優(yōu)越的醫(yī)療保護(hù)條件可能是導(dǎo)致維吾爾族患者就診晚、病期偏晚的主要原因。

生存分析結(jié)果顯示各分子分型生存率差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.024)，4種亞型發(fā)生復(fù)發(fā)或轉(zhuǎn)移的例數(shù)分別為：Luminal A型19/118例，Luminal B型25/106例、Erb-B2過表達(dá)型7/21例，基底樣型19/62例，Luminal A型預(yù)后最好?，F(xiàn)已得到共識(shí)[3]，Luminal A型是臨床上乳腺癌最常見的分子亞型，此型通常見于早期乳腺癌，且復(fù)發(fā)風(fēng)險(xiǎn)較低，對(duì)內(nèi)分泌治療敏感，幾乎不需要化療，預(yù)后較好。Luminal B型分為HER2陰性和HER2陽性，HER2陰性使用內(nèi)分泌治療±細(xì)胞毒治療，對(duì)于是否選用化療及具體化療方案選擇可能取決于內(nèi)分泌受體表達(dá)水平、危險(xiǎn)度及患者意愿。HER2陽性使用細(xì)胞毒治療+抗HER2治療+內(nèi)分泌治療。Erb-B2過表達(dá)型對(duì)靶向治療敏感，但預(yù)后較差。基底樣型與“三陰性”患者有近80%的重合，易發(fā)生轉(zhuǎn)移，預(yù)后較差。本研究生存分析結(jié)果與國際共識(shí)一致，臨床上可根據(jù)乳腺癌組織不同的分子分型，為新疆地區(qū)維吾爾族、漢族乳腺癌患者制定個(gè)體化的治療方案，同時(shí)為評(píng)估臨床過程和預(yù)測(cè)臨床結(jié)局提供一定的理論依據(jù)。

綜上所述，針對(duì)新疆地區(qū)維吾爾族、漢族乳腺癌患者的分子分型和預(yù)后關(guān)系的研究，有助于指導(dǎo)臨床治療、評(píng)估臨床過程和預(yù)測(cè)臨床結(jié)局，為患者制定個(gè)體化的治療方案，最終改善患者的臨床預(yù)后。另外，本研究結(jié)果的可靠性、準(zhǔn)確性仍需要更多的病例總結(jié)和完善，更科學(xué)系統(tǒng)的統(tǒng)計(jì)和分析，望后期有大樣本的前瞻性隨機(jī)對(duì)照研究來驗(yàn)證。

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