羊傳染性膿皰病的研究現(xiàn)狀

黎攝兒，趙苗苗，崔 成，黎滿香，※

（1.湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)動物醫(yī)學(xué)院，湖南長沙410128；2.甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué)動物醫(yī)學(xué)院，甘肅蘭州730070）

羊傳染性膿皰病俗稱羊口瘡(Soremouth)，是由羊傳染性膿皰病毒（ORFV）引起的以綿羊、山羊?yàn)橹鞯榷喾N動物的一種急性、高度接觸性皮膚傳染??；也能通過直接接觸使人發(fā)生感染該病毒。ORFV是痘病毒科副痘病毒屬的代表性成員之一，具有高度的嗜上皮性，感染途徑主要是通過損傷的皮膚和黏膜。臨床以在表在的皮膚形成丘疹、水皰、膿皰和痂皮為特征如口唇、舌、鼻、乳房以及尾根等部位[1]。該病傳染性較強(qiáng)，發(fā)病率高，但死亡率低，其中以羔羊等幼畜最為易感[2]。目前，羊口瘡病呈世界性分布，給養(yǎng)羊業(yè)帶來的經(jīng)濟(jì)損失也是不容小覷的。

1 病原學(xué)和流行病學(xué)

羊口瘡病毒屬于痘病毒科脊索動物痘病毒亞科副痘病毒屬，該屬的其他成員包括牛丘疹性口炎病毒(BPSV)、假牛痘病毒(PCPV)、新西蘭紅鹿副痘病毒(PVNZ）和灰海豹副痘病毒(SPV)以及暫定的麂傳染性病毒和密封臁瘡疹病毒等三種[3]。這些病毒成員擁有相似的形態(tài)、基因組和毒力機(jī)制[4]。用電鏡觀察該病毒的負(fù)染標(biāo)本，病毒粒子長250～280nm，寬170～200nm，呈橢圓形的線團(tuán)樣，還有錐形、磚形以及特殊的線團(tuán)樣球形等不同形狀的顆粒。病毒粒子表面有特征性的螺旋結(jié)構(gòu)和繩索樣結(jié)構(gòu)交叉排列，這些結(jié)構(gòu)圍繞病毒粒子的長軸作8字形纏繞，除此以外，也有其他形式的纏繞方式。病毒粒子外常有囊膜包裹[5]。ORFV基因組為一個(gè)共價(jià)閉合線狀雙股DNA分子，G+C含量大約為64%，DNA的分子量為88.8×106D。病毒基因組有一個(gè)長的中心編碼區(qū)和兩頭相同的反向末端重復(fù)序列組成[6]。

羊傳染性膿皰病最早發(fā)現(xiàn)于歐洲，現(xiàn)在世界上幾乎所有養(yǎng)羊的地區(qū)和國家都存在本病。但以澳大利亞、新西蘭等養(yǎng)羊業(yè)發(fā)達(dá)的國家最為嚴(yán)重[7]，在我國，西北以及東北的主要養(yǎng)羊地區(qū)均有本病發(fā)生和流行的報(bào)道。在飼養(yǎng)場或牧場養(yǎng)殖過程中，多爆發(fā)于夏末，秋天和冬天。羔羊比成年羊易感。在干燥的環(huán)境中羊口瘡病毒一般可以存活幾個(gè)月或幾年甚至可以長期存活。在動物的皮毛上，在一定時(shí)期內(nèi)病毒具有感染能力。羊口瘡病毒通過破損的皮膚進(jìn)入機(jī)體，繼而在上皮細(xì)胞中復(fù)制，通常通過直接接觸傳播給易感動物。另外，垂直傳播的病例在臨床上也有發(fā)現(xiàn)[8]。盡管實(shí)驗(yàn)性的羊口瘡在山羊和綿羊之間的交叉感染未出現(xiàn)成功案例，但是自然性的交叉感染是存在的[9]。不同品種的羊?qū)υ摬〉囊赘行圆煌Ｐ碌奈锓N感染該病毒近些年不斷被報(bào)道，這暗示ORFV的宿主范圍存在擴(kuò)大化的趨勢[10]。與其他病毒性傳染病不同的是ORFV在感染宿主是具有免疫逃避能力，也就是可重復(fù)感染同一宿主。繼發(fā)感染可在首次感染之后的1～3個(gè)月內(nèi)發(fā)生，但是發(fā)病較首次感染輕并且痊愈較快[11]。

2 臨床表現(xiàn)

該病的潛伏期為4～8天，主要臨床表現(xiàn)為溫度升高，嘴唇和鼻子出現(xiàn)丘疹、膿包，隨著病程的延長慢慢變成厚的痂皮并形成凸起，有的地方也會有潰瘍和炎癥出現(xiàn)。羔羊感染該病時(shí)，病灶多出現(xiàn)在與齒齦相鄰的舌頭和上顎門齒,病理特點(diǎn)為首先形成單個(gè)或多個(gè)接合丘疹，其次慢慢轉(zhuǎn)化為覆蓋著黃色滲出物的潰瘍[12]。波爾山羊感染了ORFV后表現(xiàn)為多灶性、嚴(yán)重增生性皮炎伴慢性肺炎、關(guān)節(jié)炎和中度到重度的淋巴結(jié)病。羔羊和小羊感染了該病毒后，要限制哺乳和放牧。這會帶來嚴(yán)重的結(jié)果[13]。羊口瘡的病變結(jié)痂易碎并伴有出血，可帶來疼痛，甚至可以導(dǎo)致厭食癥和餓死。當(dāng)在炎熱的夏季感染該病時(shí)，常常并發(fā)蠅蛆病，后果會更加嚴(yán)重[14]。其引發(fā)的繼發(fā)性感染很多種多樣。繼發(fā)感染的細(xì)菌很多，主要包括葡萄球菌、α 鏈球菌、壞死梭桿菌和棒狀桿菌等。在臨床上也要注意與其他微生物感染相區(qū)別，避免發(fā)生誤診，例如剛果嗜皮菌(D.congolensis)感染。ORFV感染泌乳期母羊，乳房炎的發(fā)生率極高。

3 病毒的致病機(jī)理

3.1 致病機(jī)理的研究進(jìn)展

目前，羊傳染性膿疤病毒的致病機(jī)理的研究取得了較大進(jìn)展[15]，羊口瘡病毒的主要表面抗原是B2L和F1L。B2L基因編碼42kDa蛋白質(zhì)。該蛋白是病毒囊膜的成分之一，可刺激機(jī)體產(chǎn)生強(qiáng)烈的抗體反應(yīng)，是ORFV的保護(hù)性抗原之一[16]。在ORFV感染細(xì)胞早期，F(xiàn)1L蛋白上有黏多糖結(jié)合位點(diǎn)，該蛋白與黏多糖結(jié)合，可以吸附到細(xì)胞表面，進(jìn)而感染細(xì)胞；并且F1L蛋白具有肝素結(jié)合位點(diǎn)，這也與ORFV感染細(xì)胞有關(guān)[17]。除此之外，羊傳染性膿疤病毒編碼產(chǎn)生許多毒力因子和細(xì)胞因子在病毒的致病機(jī)制中發(fā)揮重要作用。例如IL-10、IFNR、VEGF、GIF和CBP等它們的治病機(jī)制是干擾宿主的免疫反應(yīng)；研究表明在病毒感染早期，VEGF可引起表皮的強(qiáng)烈增生和血管高度擴(kuò)張[18],有學(xué)者認(rèn)為IFNR和IL-10共同具有抑制干擾素的作用；Bruee等[19]認(rèn)為CBP與CC-和C-趨化因子有高度親和性，它能與趨化因子表面的受體上的氨基酸殘基結(jié)合。

3.2 病毒和宿主的相互作用

機(jī)體感染羊口瘡病毒，首先自身啟動免疫系統(tǒng)抵抗病毒的侵襲[20]，這主要是指各種先天免疫細(xì)胞誘導(dǎo)趨化因子和細(xì)胞因子的分泌。在病毒侵襲的地方出現(xiàn)大量的NK細(xì)胞，中性粒細(xì)胞，和樹狀突細(xì)胞[21,22]。另外，羊口瘡病誘導(dǎo)機(jī)體釋放干擾素-α(IFN-α),白細(xì)胞介素-1β(IL-1b),IL-8,粒細(xì)胞巨噬細(xì)胞集落刺激因子(GM-CSF)和IFN-γ[23～27]，事實(shí)上從定性的角度看，致弱的羊口瘡病毒也同樣能引起以Th1-型為主的免疫應(yīng)答方式，這說明免疫應(yīng)答反應(yīng)主要是病毒粒子自身引起的[28～31]。表1為羊口瘡病毒編碼的部分蛋白質(zhì)及其免疫調(diào)節(jié)功能的總結(jié)。

羊口瘡病毒在與宿主相互作用時(shí)，另外一個(gè)重要方面是免疫逃避機(jī)制。該病毒可重復(fù)感染同一個(gè)宿主。盡管，在野毒感染時(shí)炎癥反應(yīng)已被詳細(xì)闡述，然而，羊口瘡病毒的免疫逃避機(jī)制目前尚未完全清楚。在免疫逃避機(jī)制中，中和抗體的因子尚未發(fā)現(xiàn)，羊口瘡病毒可能直接影響抗原表位和抗原呈遞細(xì)胞[47～49]。病毒編碼的蛋白VIL-10通過阻礙宿主獲得免疫反應(yīng)可能在免疫逃避機(jī)制中發(fā)揮作用[50]。另外一個(gè)方面支持免疫逃避機(jī)制的可能是病毒編碼的蛋白都會減少APCs。VEGF在致病過程中發(fā)揮作用重大，病毒可通過VEGF刺激宿主表皮及血管內(nèi)皮等細(xì)胞的增殖，為ORFV的復(fù)制提供場所，這可能是病毒對抗宿主免疫引起病毒感染細(xì)胞凋亡的一種策略，從而逃避宿主的抗病毒作用；此外，還可刺激表皮細(xì)胞增生，并且使毛細(xì)血管通透性增加，使得感染部位易形成痂皮，有利于病毒在外界環(huán)境中長期存活。

4 防制現(xiàn)狀

對于該病毒感染的動物，目前尚無特效的藥物用于治療羊傳染性膿皰病。當(dāng)疾病處于自限性時(shí)，主要阻止細(xì)菌的繼發(fā)感染，一般使用抗生素藥物；當(dāng)處于較嚴(yán)重的并發(fā)癥時(shí)，常使用局部冷敷療法或切除法[51]。國外，化療藥物也被用于治療感染ORFV的人及動物。其中，應(yīng)用最常見的為西多福韋，它能減輕皮膚的損傷程度和損傷持續(xù)時(shí)間，減少存在于患處部位的病毒，進(jìn)而減輕痘病毒的感染。近些年，有報(bào)道使用西多福韋／硫糖鋁混合膠體噴灑藥劑治療感染ORFV的羊羔，取得了不錯效果[52，53]。

為了預(yù)防和控制該病的發(fā)生，疫苗接種被認(rèn)為是最可靠而有效的手段。目前使用較多的疫苗為弱毒疫苗和滅活疫苗。這些疫苗能在一定程度上降低感染率，然而這些疫苗存在許多不安全因素，例如變異株的出現(xiàn)、毒力返強(qiáng)以及活病毒逃逸等這些因素均能導(dǎo)致羊口瘡的再流行。此外，ORFV在免疫學(xué)上的擁有自身的特殊性，例如免疫逃避機(jī)制，這也使得疫苗的免疫效果受到一定的限制。因此，尋求一種能保護(hù)不同地方毒株的統(tǒng)一安全有效的預(yù)防途徑成為獸醫(yī)界普遍關(guān)注的問題。在國內(nèi)，主要通過研究羊口瘡病毒的表面抗原和毒力基因獲得表位疫苗的途徑較多，例如B2L、F1L、ORFV086及其他毒力因子，也有個(gè)別實(shí)驗(yàn)室通過不同細(xì)胞系傳代致弱病毒研制弱毒疫苗。在國外，現(xiàn)在有研用組織培養(yǎng)的方法培育和試驗(yàn)羊口瘡病毒疫苗，例如，病毒顆粒轉(zhuǎn)變IA-82在BHK-21細(xì)胞中傳代培養(yǎng)21代，然后對羊的后肢內(nèi)側(cè)進(jìn)行劃痕接種。這種接種的弱毒疫苗較其它疫苗的效果有改善[54]。

5 結(jié)語

羊口瘡能引起包括家畜和野生動物在內(nèi)的許多動物的感染。但以羊較普遍并且嚴(yán)重，因此羊口瘡對依賴家畜養(yǎng)殖為主的牧區(qū)的經(jīng)濟(jì)有著重要的影響，有效的防治該病對牧羊業(yè)的發(fā)展現(xiàn)狀將有較大改善。目前的統(tǒng)計(jì)分析還指出，羊口瘡的感染宿主存在擴(kuò)大的趨勢，因此，為了避免重大經(jīng)濟(jì)損失的發(fā)生，建立一種安全有效的防御機(jī)制勢在必行。

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