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      大型海藻對氮磷吸收能力的初步研究

      2014-07-08 21:27:43李趙嘉曾昭春賈佩嶠郭冉夏輝曹英
      河北漁業(yè) 2014年1期
      關鍵詞:龍須菜海帶

      李趙嘉+曾昭春+賈佩嶠+郭冉+夏輝+曹英昆+高炬

      摘要:實驗選取了經濟價值較高、生態(tài)特征較為明顯且研究較為深入的三種大型海藻:海帶(Laminaria japonica Aresch)、鼠尾藻(Sargassum thunbergii)和龍須菜(Gracilaria lemaneiformis)作為實驗材料,在模擬自然環(huán)境條件(14 ℃、1500 lx)和適宜的氮、磷濃度 (50 μmol/L、5 μmol/L)下,研究其在72 h內對氮、磷的吸收能力。實驗數(shù)據測得,海帶、鼠尾藻和龍須菜對氨氮吸收速率分別為0.397 μmol/g?h、0.317 μmol/g?h和0.300 μmol/g?h,吸收效率為66.3%、53.6%和51.2%;對磷的吸收速率分別為0.036 μmol/g?h、0.030 μmol/g?h和0.033 μmol/g?h,吸收效率為65.2%、55.7%和58.8%。結果表明,三種海藻對氮、磷均有明顯的吸收效果,吸收能力順序為:海帶>龍須菜>鼠尾藻。

      關鍵詞:大型海藻;氮;磷;吸收速率;海帶;鼠尾藻;龍須菜

      近數(shù)十年來我國的海水養(yǎng)殖產業(yè)得到了快速發(fā)展,從70年代至今我國海水養(yǎng)殖產量年平均增長率為14%,從1980年的7.8×105t增加到1999年的9.74×106t,海水養(yǎng)殖業(yè)規(guī)模已連續(xù)多年居世界首位[1]。然而在養(yǎng)殖過程中過量投餌現(xiàn)象普遍存在,大量未被吸收的餌料以及養(yǎng)殖生物排泄物沉積在水底,使養(yǎng)殖水體中氮、磷等元素含量增加,水體呈現(xiàn)富營養(yǎng)化[2]。同時伴隨大量養(yǎng)殖廢水的排出,加之生活和工業(yè)污水的肆意排放,近海海域氮、磷等營養(yǎng)鹽元素不斷積累,使得近海海域富營養(yǎng)化現(xiàn)象不斷的加重,對海洋環(huán)境造成了嚴重的危害[3]。

      目前處理養(yǎng)殖廢水和富營養(yǎng)化海水的方法多集中在物理、化學處理法、人工濕地處理方法、耐鹽植物處理法、懸浮顆粒物的處理法和沉淀-貝類過濾-藻類吸附的綜合處理方法等[4],其中利用大型海藻進行富營養(yǎng)化海水修復作為新興的方法得到了廣大科學工作者的高度重視,最具發(fā)展前景。

      大型海藻為一類多細胞海洋孢子植物,處于營養(yǎng)級第一層,有著很強的生產能力,在其生長過程中可大量吸收氮、磷等營養(yǎng)元素,因此可以用于解決養(yǎng)殖廢水和富營養(yǎng)化海水的問題[5]。同時藻類吸附是一個自然發(fā)生過程,在適宜條件下自行生長,不需要外來施加能量,最重要的是不易帶來二次污染,這是其它方法不可比擬的,也是該方法越來越成為研究熱點最主要的原因[1]。除此之外,大型海藻生物修復法還有其它方法不可比擬的特點和優(yōu)勢。

      首先,大型海藻本身是一種重要的水產品,可食用也可藥用,同時也是飼料和工業(yè)生產的重要原料,國內外市場需求量很大。其中,海帶系褐藻門、海帶科,是我國食用最多的海藻種類[6]富含碘具有防治甲狀腺腫、降壓降脂等作用;龍須菜系紅藻門、江蘺科的一種重要的產瓊紅藻,具有生長快、耐溫廣等特點,同時有著很高的經濟價值和生態(tài)作用[7];鼠尾藻隸屬褐藻門、馬尾藻科,富含褐藻多酚、多糖類等活性物質,其應用潛力極好的在醫(yī)藥、保健、化工等行業(yè)中極好的體現(xiàn)出來[8]。廢水及富營養(yǎng)化的水體中,未被利用的氮和磷是一種飼料的浪費,增加成本的同時降低了投入產出比,大型海藻吸收這些多余營養(yǎng)物質然后以海藻食品和生化產品的形式采收,由此可以挽回一定損失,同時還可以得到另一種經濟效益[1]。

      此外,大型海藻可以直接吸收并利用海水中游離的二氧化碳,使二氧化碳的溶解平衡向海水方向移動[1],減少大氣二氧化碳的同時增加海洋初級生產力,有助于解決人類日益關切的溫室效應問題;同時藻體還可以吸附水體中的重金屬離子以及一些毒素因子,最新研究表明大型海藻具有抑制赤潮生物生長和降低其毒素的作用[9],因此利用大型海藻修復凈化水質具有多重生態(tài)效應。

      目前所知能夠用于處理養(yǎng)殖廢水和富營養(yǎng)化海水的大型海藻種類還較少,對各種海藻去除氮、磷營養(yǎng)鹽的能力了解也不夠全面,沒有介于實驗室控制條件和自然海域條件之間的研究,使得利用大型海藻改善水質受到諸多限制。因此,本實驗采集了海帶、鼠尾藻、龍須菜三種比較常見的大型海藻,在自然狀態(tài)(介于實驗室控制條件和實際條件)和更高氮磷濃度下,分別考察它們的氨氮和無機磷的吸收速率及去除比例,對比三者對氮、磷營養(yǎng)鹽的吸收效果,以更全面地了解大型海藻修復法去除氮磷的過程與效果,為進一步修復富營養(yǎng)化海域水體提供理論依據。

      1材料與方法

      1.1材料

      1.1.1實驗藻體實驗用龍須菜采于昌黎七里海(北緯38.60°~39.00°,東經118.15°~118.17°),海帶和鼠尾藻采于秦皇島海港區(qū)東山浴場(北緯39.92°,東經119.72°),選擇生長狀態(tài)良好,長勢相近的海藻,冷藏處理后,將其放入收納箱中帶回實驗室。藻體表面用干凈的紗布和細毛刷輕輕刷洗,以去掉泥沙、雜藻及其他附生物,并用消毒海水徹底沖洗數(shù)次,然后放入實驗室水族箱內用過濾后海水中暫養(yǎng)7 d,使其適應實驗室條件,以保證海藻能在正常生長情況下進行實驗。暫養(yǎng)期間水溫14 ℃,鹽度30 ‰,光照強度500 lx,光周期12L:12D。

      1.1.2培養(yǎng)水體稱取0.7 mg的NH4Cl(50 μmol)和0.15 mg的KH2PO4(5μmol)加入到1 L的過濾海水中,配制成氮濃度為50 μmol/L磷濃度為5 μmol/L的培養(yǎng)水體。

      1.1.3實驗儀器UV-1700型紫外可見光分光光度計?島津公司;VICTOR 1010A型自動量程數(shù)字照度計?深圳市勝利高電子科技有限公司;丹佛 TP系列 TP-1102型電子分析天平?美國(DENVER INSTRUMENT)。

      1.2方法

      1.2.1設計方案實驗分為兩組,一組為大型海藻對水體中磷的吸收實驗,另一組為對氨氮的吸收實驗;每組實驗均選用三種藻類,每種藻類設三組重復及一組對照;分別稱取1.5 g海帶、龍須菜和鼠尾藻于裝有1 000 mL上述培養(yǎng)水體的燒杯中,在室內環(huán)境下(14 ℃、1 500 lx)進行培養(yǎng),每12 h取樣50 ml測定氨氮及活性磷的含量,培養(yǎng)周期為72 h。

      1.2.2測定方法水質分析方法參照GB12763.4-2007,氨氮的測定采用次溴酸鹽氧化法,磷酸鹽采用磷鉬藍分光光度法。根據上述方法測出每個水樣的吸光度,依據標準曲線分別計算出氮磷濃度,然后按下述公式計算各時間段和最終各藻的吸收速率:

      U=(Ct1-Ct2-△C0)?V/(t?G)

      式中U為吸收速率,Ct1為實驗開始時測得的三個培養(yǎng)組的平均氮、磷含量,Ct2為實驗結束時測得的三個實驗組的平均氮、磷含量,△C0為對照組的氨、氮含量的變化,V為所用培養(yǎng)液體積,t為培養(yǎng)時間,G為添加海藻的生物量。

      1.3數(shù)據處理

      實驗數(shù)據用統(tǒng)計軟件spss17.0進行分析,以P<0.05作為差異顯著水平。

      2結果與分析

      2.1對氨氮的吸收

      數(shù)據分析結果顯示,培養(yǎng)水體中氨氮的濃度隨著時間的推移呈現(xiàn)下降趨勢,72 h的濃度與初始濃度有顯著差異(F=10.178 65,P<0.05)。如圖1所示,海帶對水體中氨氮的吸收能力最強,72 h內水體中氨氮的濃度從65 μmol/L下降到20 μmol/L,吸收效率為66.3 %;鼠尾藻,龍須菜培養(yǎng)水體中的初始氨氮濃度分別為64 μmol/L和63 μmol/L,經過72 h的藻類吸收后,培養(yǎng)水體中氨氮濃度分別降至28 μmol/L和29 μmol/L,吸收效率分別為53.6 %和51.2 %,因此三種海藻的去除能力順序為:海帶>龍須菜>鼠尾藻。

      圖1三種大型海藻培養(yǎng)水體中氨氮的濃度變化

      數(shù)據分析結果顯示,海帶、鼠尾藻和龍須菜在0~12 h的時間段內吸收速率較低,12~14 h內吸收速率迅速升高達到最大值,隨后緩慢降低,48~72 h吸收速率的變化趨于平緩。在72 h的培養(yǎng)周期中海帶、鼠尾藻和龍須菜三者的平均吸收速率分別為0.397、0.317和0.300 μmol/g?h。從圖2可以看出,海帶的吸收速率始終高于鼠尾藻和龍須菜,但在隨培養(yǎng)時間的增加這種差距逐漸減??;鼠尾藻和龍須菜的吸收速率差異不顯著,在36 h前鼠尾藻略高于龍須菜,36 h后兩者吸收速率幾乎相同,在60~72 h間龍須菜的吸收速率(0.268 μmol/g?h)略高于鼠尾藻(0.260 μmol/g?h)。

      圖2三種大型海藻對氨氮的吸收速率

      2.2對磷的吸收

      數(shù)據分析結果顯示,培養(yǎng)水體中活性磷的濃度隨著時間的推移呈現(xiàn)下降趨勢,72 h的濃度與初始濃度有顯著差異(F=7.192 0,P<0.05)。如圖3所示,海帶對水體中活性磷的吸收能力最強,72 h內水體中活性磷的濃度從5.96 μmol/L下降到1.93 μmol/L,吸收效率為65.2 %;鼠尾藻,龍須菜培養(yǎng)水體中的初始活性磷濃度分別為5.90 μmol/L和5.98 μmol/L,經過72 h的藻類吸收后,培養(yǎng)水體中活性磷濃度分別降至2.48 μmol/L和2.32 μmol/L,吸收效率分別為55.7 %和58.8 %,三種海藻對磷的去除能力順序為:海帶>龍須菜>鼠尾藻。

      圖3三種大型海藻培養(yǎng)水體中活性磷的濃度變化

      由圖4可見,海帶對磷的吸收速率變化平緩,在0~24 h內稍有增大,36 h后略有降低,在24~36 h內達到最大值(0.038 μmol/g?h);鼠尾藻在36~60 h內吸收速率降低,60~72 h內吸收速率趨于平緩;與之相反,龍須菜的吸收速率在36~48h有明顯增大,吸收速率最大值出現(xiàn)在36~60 h(0.035 μmol/g?h),12~24h內的吸收速率也接近最大值(0.034 μmol/g?h),在72 h的培養(yǎng)周期中三種大型海藻的平均吸收速率分別為0.036、0.030和0.033 μmol/g?h。

      圖4三種大型海藻對磷的吸收速率

      3討論

      本實驗結合相關文獻中關于三種大型海藻適宜的氮磷濃度和富營養(yǎng)化水體的氮磷濃度的結果,為了更加適宜海藻生長,將培養(yǎng)水體中氮磷濃度分別設定為50 μmol/L(0.7 mg/L)和5 μmol/L(0.15 mg/L),略高于同類實驗。其中,錢魯閩等研究認為當培養(yǎng)水體中氮磷比為10∶1時大型海藻對磷吸收速率最高[10];徐永健等在研究不同氮磷濃度及氮磷比對龍須菜生長的影響中,發(fā)現(xiàn)龍須菜在氨氮濃度為0~50 μmol范圍內,隨著濃度升高,其生長速率增加,氮磷比為10∶1條件下,龍須菜的生長速率達到最大[11];李楓[12]、湯坤賢[13]、彭長連[14]等對龍須菜的研究結果表明在溶解無機氮濃度在20~100 μmol/L和溶解無機磷濃度5~20 μmol/L范圍內,龍須菜會出現(xiàn)最適生長;當溶解無機氮濃度超過150 μmol/L或溶解無機磷濃度超過30 μmol/L時,龍須菜的生長受到抑制,甚至出現(xiàn)負增長[12]。目前,對鼠尾藻和海帶的最適生長營養(yǎng)鹽濃度的研究較少,其中姜宏波等認為在氮濃度200 μmol/L時鼠尾藻對氮的吸收速率最大,磷濃度為14 μmol/L時吸收速率最大,最佳的氮磷比為5∶1[15]。曲克明等在氮濃度0.6 mg/L的養(yǎng)殖水體下進行的海帶對氮磷的吸收實驗,取得了顯著的效果[4];李錦秀等研究認為水體中溶解氮達到0.5 mg/L,活性磷達到0.1 mg/L時已達到富營養(yǎng)化[3]。

      本實驗三種海藻對氮磷的吸收效率均在60 %左右,低于一般文獻得研究結果,例如,王翔宇等研究得到的鼠尾藻、龍須菜吸收效率在70 %左右[16],可能由于本實驗為模擬北方特別是河北海域的自然狀態(tài),溫度與光照強度均低于其最適條件,而這兩者是大型海藻生長的關鍵環(huán)境因子,是造成藻體生化組成變化的主要因素,所以最終測得的吸收速率也略低于一般實驗室條件下的速率,可推測在實驗室條件下吸收速率會有所提高。此外,也可能與培養(yǎng)時間和初始濃度有關,本文培養(yǎng)的氮初始濃度為50 μmol/L(0.7 mg/L),磷為5 μmol/L(0.15 mg/L),高于王翔宇等人的研究初始濃度,根據圖1和圖3的吸收速率曲線變化趨勢,若繼續(xù)培養(yǎng)一段時間,吸收效率可能會提高。

      為方便對比,本實驗各組設置相同的藻體密度為1.5 g/L,是由于鼠尾藻和龍須菜更適合在較低濃度下生長,而曲克明等的研究中發(fā)現(xiàn),海帶在高密度(7.5 g/L)時吸收氮磷效果更好[4]。

      圖2中三種大型海藻在0~12 h對氨氮吸收速率較低,12~24 h內吸收速率迅速升高達到最大值,可能與某些海藻遇高氮環(huán)境時氮的機會主義儲備有關,由于海藻從低氮或氮匱乏的環(huán)境轉移到高氮環(huán)境時,經過短暫的適應和準備,對氮進行迅速大量吸收,儲備在藻體內。24 h后吸收速率逐漸降低,推測是由于培養(yǎng)水體中的氨氮濃度的降低導致的(如圖1),這與徐永健、彭長連和錢魯閩等人的研究結果一致。圖4中的三種大型海藻對磷的吸收速率隨時間變化規(guī)律不統(tǒng)一,特別是龍須菜在磷濃度降低時,吸收速率反而有所增大,異于其他文獻的研究,是否由于龍須菜更適宜低磷環(huán)境,還需進一步的研究。本實驗研究發(fā)現(xiàn)海帶對氨氮的吸收效果優(yōu)于鼠尾藻和龍須菜,可能與其更能適應北方春季的較低水溫與較弱光照強度有關聯(lián)[17-18]。

      綜上所述,本實驗選取的三種常見的代表海帶、鼠尾藻和龍須菜,在實驗室模擬適宜自然環(huán)境下的研究結果表明,大型海藻(海帶、鼠尾藻和龍須菜),具有較強的吸收營養(yǎng)鹽能力,海帶吸收效果明顯優(yōu)于龍須菜和鼠尾藻,為海水環(huán)境改善和尋找工具藻提供了參考。但限于實驗時間和條件,研究的海藻種類較少,如果要篩選出更加適宜不同水質條件的工具藻,還需在更多樣的環(huán)境下研究和比較。

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      Preliminary studies on the nitrogen and

      phosphorus absorption capability of seaweeds

      LI ZhaoJia, ZENG ZhaoChun, JIA PeiQiao, Guo Ran, XIA Hui, CAO YingKun, Gao Ju

      ( Ocean college of Hebei Agricultural University, qinghuangdao hebei066003 )

      Abstract:This article has selected three more in-depth study on the ecological characteristics seaweed of high economic value:Laminaria japonica Aresch , thunbergii , Gracilaria lemaneiformis, Study on their absorptive capacity of nitrogen and phosphorus in 72h under the natural environment (14℃, 1500 lx ) and appropriate concentrations of nitrogen and phosphorusin (50μmol/L, 5μmol/L). The experiment measured, Laminaria japonica Aresch, Sargassum thunbergii ,Gracilaria lemaneiformiss absorption rate of ammonia nitrogen is 0.397 μmol/g?h 0.317 μmol/g?h and 0.300 μmol/g?h .Their removal ratio of ammonia nitrogen in the cultivation water is 66.3% 53.6% and 51.2%; The absorption rate of phosphorus is 0.036 μmol/g?h, 0.030 μmol/g?h and 0.033 μmol/g?h, the removal ratio of phosphorusin is 65.2%, 55.7% and 58.8%. Experimental results show that the three kinds of seaweed have typically absorbtion of nitrogen and phosphorus. Absorptive capacity order is Laminaria japonica Aresch >Gracilaria lemaneiformis>Sargassum thunbergii.

      Key words:Seaweed;Nitrogen;Phosphorus;Absorption rates;Laminaria japonica Aresch;Sargassum thunbergii;Gracilaria lemaneiformis.

      (收稿日期:2013-10-12;修回日期:2013-10-24)

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      LI ZhaoJia, ZENG ZhaoChun, JIA PeiQiao, Guo Ran, XIA Hui, CAO YingKun, Gao Ju

      ( Ocean college of Hebei Agricultural University, qinghuangdao hebei066003 )

      Abstract:This article has selected three more in-depth study on the ecological characteristics seaweed of high economic value:Laminaria japonica Aresch , thunbergii , Gracilaria lemaneiformis, Study on their absorptive capacity of nitrogen and phosphorus in 72h under the natural environment (14℃, 1500 lx ) and appropriate concentrations of nitrogen and phosphorusin (50μmol/L, 5μmol/L). The experiment measured, Laminaria japonica Aresch, Sargassum thunbergii ,Gracilaria lemaneiformiss absorption rate of ammonia nitrogen is 0.397 μmol/g?h 0.317 μmol/g?h and 0.300 μmol/g?h .Their removal ratio of ammonia nitrogen in the cultivation water is 66.3% 53.6% and 51.2%; The absorption rate of phosphorus is 0.036 μmol/g?h, 0.030 μmol/g?h and 0.033 μmol/g?h, the removal ratio of phosphorusin is 65.2%, 55.7% and 58.8%. Experimental results show that the three kinds of seaweed have typically absorbtion of nitrogen and phosphorus. Absorptive capacity order is Laminaria japonica Aresch >Gracilaria lemaneiformis>Sargassum thunbergii.

      Key words:Seaweed;Nitrogen;Phosphorus;Absorption rates;Laminaria japonica Aresch;Sargassum thunbergii;Gracilaria lemaneiformis.

      (收稿日期:2013-10-12;修回日期:2013-10-24)

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      Preliminary studies on the nitrogen and

      phosphorus absorption capability of seaweeds

      LI ZhaoJia, ZENG ZhaoChun, JIA PeiQiao, Guo Ran, XIA Hui, CAO YingKun, Gao Ju

      ( Ocean college of Hebei Agricultural University, qinghuangdao hebei066003 )

      Abstract:This article has selected three more in-depth study on the ecological characteristics seaweed of high economic value:Laminaria japonica Aresch , thunbergii , Gracilaria lemaneiformis, Study on their absorptive capacity of nitrogen and phosphorus in 72h under the natural environment (14℃, 1500 lx ) and appropriate concentrations of nitrogen and phosphorusin (50μmol/L, 5μmol/L). The experiment measured, Laminaria japonica Aresch, Sargassum thunbergii ,Gracilaria lemaneiformiss absorption rate of ammonia nitrogen is 0.397 μmol/g?h 0.317 μmol/g?h and 0.300 μmol/g?h .Their removal ratio of ammonia nitrogen in the cultivation water is 66.3% 53.6% and 51.2%; The absorption rate of phosphorus is 0.036 μmol/g?h, 0.030 μmol/g?h and 0.033 μmol/g?h, the removal ratio of phosphorusin is 65.2%, 55.7% and 58.8%. Experimental results show that the three kinds of seaweed have typically absorbtion of nitrogen and phosphorus. Absorptive capacity order is Laminaria japonica Aresch >Gracilaria lemaneiformis>Sargassum thunbergii.

      Key words:Seaweed;Nitrogen;Phosphorus;Absorption rates;Laminaria japonica Aresch;Sargassum thunbergii;Gracilaria lemaneiformis.

      (收稿日期:2013-10-12;修回日期:2013-10-24)

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