• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    半纖維素側(cè)鏈降解酶
    ——α-葡萄糖醛酸酶的研究進(jìn)展*

    2014-07-01 23:52:17吳金連黎海龍甘禮惠龍敏南
    新能源進(jìn)展 2014年5期
    關(guān)鍵詞:側(cè)鏈醛酸聚糖

    吳金連,薛 勇,黎海龍,甘禮惠,劉 健,龍敏南

    (廈門大學(xué)能源學(xué)院,廈門 361102)

    半纖維素側(cè)鏈降解酶
    ——α-葡萄糖醛酸酶的研究進(jìn)展*

    吳金連,薛 勇,黎海龍,甘禮惠,劉 健,龍敏南?

    (廈門大學(xué)能源學(xué)院,廈門 361102)

    半纖維素是自然界中最豐富的可再生資源之一,將半纖維素降解為單糖并轉(zhuǎn)化為燃料或化學(xué)品一直是科學(xué)界研究的熱點。半纖維素是由木糖基主鏈以及α-葡萄糖醛酸等側(cè)鏈共同組成的異質(zhì)多聚體。α-葡萄糖醛酸酶是半纖維素完全降解過程中的關(guān)鍵酶之一,能夠水解4-O-甲基葡萄糖醛酸與木糖之間的α-1,2-糖苷鍵。本文綜述了α-葡萄糖醛酸酶的分類、催化機(jī)制及晶體結(jié)構(gòu)、酶學(xué)性質(zhì)和基因克隆表達(dá)等方面的研究進(jìn)展,同時對該研究進(jìn)行了展望。

    半纖維素;α-葡萄糖醛酸酶;結(jié)構(gòu);催化機(jī)理;酶學(xué)特性

    0 前 言

    半纖維素是自然界中最豐富的可再生資源之一,廣泛存在于植物細(xì)胞壁中,其含量約占植物細(xì)胞總干重的25%~40%,儲量僅次于纖維素[1]。半纖維素的利用與轉(zhuǎn)化對于解決目前世界石油危機(jī)、能源與人爭糧、溫室效應(yīng)等全球問題具有非常重要的作用,因此其有效利用日益受到世界各國的廣泛關(guān)注。但是,與纖維素相比,半纖維素結(jié)構(gòu)成分復(fù)雜,除了由 β-D-吡喃木糖殘基經(jīng) β-1,4-糖苷鍵連接而成的主鏈外,還含有不同側(cè)鏈取代基,如4-O-甲基葡萄糖醛酸側(cè)鏈、α-L-呋喃型阿拉伯糖側(cè)鏈以及少量通過L-阿拉伯糖殘基連接的阿魏酸或香豆酸側(cè)鏈等[2]。半纖維素的復(fù)雜結(jié)構(gòu)決定了其徹底的降解需要半纖維素酶水解酶系中各種酶的協(xié)同作用,主要包括降解木聚糖主鏈的內(nèi)切木聚糖酶和β-木糖苷酶,還有降解側(cè)鏈的 α-阿拉伯呋喃糖苷酶、α-葡萄糖醛酸酶、乙酰木聚糖酯酶和酚酸酯酶等[3]。其中,α-葡萄糖醛酸酶對于半纖維素的生物轉(zhuǎn)化起著非常重要的作用。

    α-葡萄糖醛酸酶(EC 3.2.1.131,EC 3.2.1.-)是一種半纖維素側(cè)鏈水解酶,主要作用于4-O-甲基葡萄糖醛酸與木糖之間的α-1,2-糖苷鍵,在半纖維素降解過程中與半纖維素降解酶系的其他酶相互促進(jìn),實現(xiàn)木聚糖的高效水解[2]。由于該酶的總活性較低,對應(yīng)的酶促反應(yīng)往往是半纖維素系列水解反應(yīng)的控制性步驟。因此,對該酶的研究對于半纖維素的高效利用具有重大意義。相對于半纖維素降解酶系的其他酶,α-葡萄糖醛酸酶被發(fā)現(xiàn)較晚,直到1981年才被人們發(fā)現(xiàn)[4]。隨著對半纖維素及半纖維素酶的深入研究,α-葡萄糖醛酸酶的生物技術(shù)潛力越來越受到人們的重視。

    1 α-葡萄糖醛酸酶的分類

    1991年,Henrissat等[5]根據(jù)氨基酸序列的相似性把糖基水解酶分成不同的家族。2009年 Cantarel等[6]將來自不同微生物的 α-葡萄糖醛酸酶分為兩大類,即糖苷水解酶(Glycoside hydrolases)第67(GH 67)和第115(GH 115)家族,見表1。其中第67家族α-葡萄糖醛酸酶大多都來自細(xì)菌,而第115家族大多來自真菌。

    不同家族的α-葡萄糖醛酸酶在作用于葡萄糖醛酸木聚糖時顯示出不同的底物特異性。第67家族的α-葡萄糖醛酸酶只能作用于殘基數(shù)在2~5之間的小分子 4-O-甲基葡糖醛酸低聚木糖,且只能水解非還原末端的4-O-甲基葡萄糖醛酸側(cè)鏈[7,8]。而GH 115家族的α-葡萄糖醛酸酶具有更廣泛的底物特異性,不僅能夠從4-O-甲基葡糖醛酸低聚糖的非還原端水解下4-O-甲基葡萄糖醛酸,還能夠作用于長鏈4-O-甲基葡糖醛酸木聚糖內(nèi)部的4-O-甲基葡萄糖醛酸側(cè)鏈將 4-O-甲基葡萄糖醛酸從木聚糖主鏈的 α-1,2-糖苷鍵中釋放[9,10],見圖1。

    表1 α-葡萄糖醛酸酶的分類Table 1 Classification of α-glucuronidase

    圖1 α-葡萄糖醛酸酶GH 67和GH 115底物特異性差異Fig. 1 The substrate specificity between α-glucuronidase GH 67 and GH 115 (A) α-Glucuronidase GH 67 (n=0, 1, 2, 3) and GH 115 (n ≥ 0) release 4-O-methyl glucuronic acid from the terminal non-reducing end xylopyranosyl unit of xylo-oligosaccharides; (B) Family 115 α-glucuronidase also release 4-O-methyl glucuronic acid which is linked to the internal xylosyl residues

    2 α-葡萄糖醛酸酶的催化機(jī)理及晶體結(jié)構(gòu)

    2.1 α-葡萄糖醛酸酶降解葡萄糖醛酸木聚糖的催化機(jī)理

    在半纖維素的水解過程中,α-葡萄糖醛酸酶(EC 3.2.1.131,EC 3.2.1.-)主要作用于α-葡萄糖醛酸或 4-O-甲基葡萄糖醛酸與主鏈木糖殘基之間的α-1,2-糖苷鍵,圖2簡要地顯示了半纖維素的結(jié)構(gòu)及半纖維素降解酶系中各酶的作用位點[9]。

    目前關(guān)于 α-葡萄糖醛酸酶在木聚糖水解過程中具體的催化機(jī)制研究較少。迄今為止,研究認(rèn)為α-葡萄糖醛酸酶在酶水解過程中的催化機(jī)制有單一置換機(jī)制(Single displacement mechanism)和底物輔助催化機(jī)制(Substrate-assisted catalysis mechanism)。不管是屬于GH 67家族還是GH 115家族,單一置換機(jī)制是目前被廣泛認(rèn)同的 α-葡萄糖醛酸酶催化機(jī)制。這種催化機(jī)制認(rèn)為:α-葡萄糖醛酸酶在水解4-O-甲基葡萄糖醛酸低聚糖底物時,酶與底物結(jié)合后,底物上的4-O-甲基葡萄糖醛酸(MeGlcA)異頭碳構(gòu)型發(fā)生反轉(zhuǎn)(α-端基異構(gòu)反轉(zhuǎn)成 β-端基異構(gòu))從而水解α-1,2-糖苷鍵;一般在水解過程中,酶分子中的一個羧酸殘基作為酸而其他(如底物)作為一般的堿。2000年,Biely等[10]首次提出Aspergillus tubingensis的GH 67家族α-葡萄糖醛酸酶屬于這一催化機(jī)制。此后,Kolenová等[11]用類似的方法研究,發(fā)現(xiàn)GH 115家族的α-葡萄糖醛酸酶也屬于這一催化機(jī)制。此外,Golan等[12]通過 α-葡萄糖醛酸酶在催化水解底物時“open”和“closed”(催化)構(gòu)象的改變推測:Asp-364和Glu-392共同激活親核水分子,親核水分子將 Glu-285質(zhì)子化,而質(zhì)子化了的Glu-285更容易接近帶負(fù)離子的底物,進(jìn)而推測α-葡萄糖醛酸酶在水解木聚糖時的催化機(jī)制是底物輔助催化機(jī)制。

    圖2 半纖維素結(jié)構(gòu)及半纖維素酶系對其降解作用Fig. 2 Schematic of hemicellulose and hemicellulose-hydrolases

    通過對功能性氨基酸殘基的深入研究,進(jìn)一步揭示了α-葡萄糖醛酸酶的催化機(jī)制。2002年,Didier等[13]在研究Pseudomonas cellulosaα-葡萄糖醛酸酶GlcA67A的晶體結(jié)構(gòu)時發(fā)現(xiàn) Arg325、Lys288和Lys360有助于酶與底物的識別,Trp543能夠促進(jìn)酶與底物的結(jié)合,而Glu292是酶催化活性中心的關(guān)鍵殘基。2003年,Nagy等[14]也在Cellvibrio japonicusα-葡萄糖醛酸酶發(fā)現(xiàn)了功能性氨基酸 Glu-393和Asp-365具有催化功能;Lys-288、Arg-325和Lys-360在酶與底物的4-O-甲基葡萄糖醛酸羧基結(jié)合中起著重要作用,因此這三個氨基酸為酶的底物結(jié)合位點功能性氨基酸。同樣,Golan等[15]也通過晶體結(jié)構(gòu)和定點突變的研究確定了Geobacillus stearothermophilusα-葡萄糖醛酸酶中Glu386對于酶的催化活性起重要作用,而三個保守氨基酸殘基(Glu285、Asp364和 Glu392)是該酶的催化殘基;最近,Rogowski等[9]詳細(xì)研究了Bacteroides ovatusα-葡萄糖醛酸酶的結(jié)構(gòu)后確定了一些功能性氨基酸的催化功能:His422和Tyr420決定酶的底物特異性,Trp249參與酶的催化活力,Tyr792對于酶與木聚糖底物的結(jié)合有重大貢獻(xiàn),His422是酶催化裝置的重要組成部分,Asp-332或Glu-375在酶水解催化過程中也具有重要作用,但是它們的具體作用還不太清楚,有待進(jìn)一步深入研究。一般酸性氨基酸諸如谷氨酸、天冬氨酸參與酶的催化活性,一些堿性氨基酸如精氨酸、組氨酸、賴氨酸等是酶底物結(jié)合域的關(guān)鍵殘基。

    2.2 晶體結(jié)構(gòu)

    隨著對α-葡萄糖醛酸酶研究的不斷深入,其分子結(jié)構(gòu)也不斷得到確認(rèn)。通過對酶晶體結(jié)構(gòu)的研究表明,來源于細(xì)菌的 α-葡萄糖醛酸酶一般以二聚體的形式實現(xiàn)其催化功能,而大部分來源于真菌的α-葡萄糖醛酸酶在催化水解時沒有三維二聚體結(jié)構(gòu),只以單體蛋白的形式實現(xiàn)酶催化水解[12]。2004年,Golan等[15]通過X射線單晶衍射首次確定了來自G. stearothermophilusα-D-葡萄糖醛酸酶的結(jié)構(gòu),該酶以二聚體形式存在,每個單體由三個獨立的結(jié)構(gòu)域通過環(huán)(loops)相互聯(lián)系:N-末端結(jié)構(gòu)域(1~142)、一個(β/α)8TIM桶狀結(jié)構(gòu)域(143~471)和C-末端結(jié)構(gòu)域(472~780)。其中每個結(jié)構(gòu)域之間通過如下位點連接:(β/α)8結(jié)構(gòu)域的Trp-328和Arg-329,C-末端的Glu-536、Arg-548、Glu-654、Asp-657、Arg-665和Lys-666,該酶的結(jié)構(gòu)可見圖3。2010年,F(xiàn)ujimoto等[17]對Streptomyces pristinaespiralisα-葡萄糖醛酸酶進(jìn)行了結(jié)晶,并初步分析了該酶的晶體結(jié)構(gòu)。2014,Rogowski等[9]更精確地確定了GH 115家族α-葡萄糖醛酸酶的結(jié)構(gòu),這是GH 115家族最具代表性的蛋白結(jié)構(gòu),該酶含有四個結(jié)構(gòu)域:N-末端結(jié)構(gòu)域(33~196)、(β/α)8TIM桶狀結(jié)構(gòu)域(197~482)、由5個螺旋束組成的結(jié)構(gòu)域(488~641)和一個典型的β-三明治折疊的C端結(jié)構(gòu)域(1~32,673~844和483~487),通過結(jié)構(gòu)的研究以及結(jié)合突變研究技術(shù),該酶的功能性氨基酸也得到了確認(rèn)。

    圖3 G. stearothermophilusα-D-葡萄糖醛酸酶的結(jié)構(gòu)[16]Fig 3. Structure ofG. stearothermophilusα-D-glucuronidase [The polypeptide chain is coloured from N terminus (blue) to C terminus (red)]

    3 α-葡萄糖醛酸酶的酶學(xué)特性

    不同微生物所產(chǎn)的α-葡萄糖醛酸酶的分子量、等電點、pH值作用范圍、溫度作用范圍等都有一定的差異,而酶學(xué)性質(zhì)的差異直接影響其使用條件和應(yīng)用領(lǐng)域,尤其是最適pH和熱穩(wěn)定性。

    一般來說,大多數(shù)來自細(xì)菌的α-葡萄糖醛酸酶的預(yù)測分子量約為70 kDa,而來自真菌的葡萄糖醛酸酶單體蛋白分子量較大,約為90 kDa[18]。至今已報道的α-葡萄糖醛酸酶的等電點多數(shù)為弱酸性。各種不同來源α-葡萄糖醛酸酶的酶學(xué)性質(zhì)見表2。

    表2 幾種不同來源α-葡萄糖醛酸酶的酶學(xué)特性Table 2 Enzymatic charaterization of α-glucuronidase from different microorganisms

    3.1 溫度對α-葡萄糖醛酸酶活性的影響

    溫度對酶活性有很大的影響,在較低的溫度范圍內(nèi),酶反應(yīng)速率隨溫度升高而增大,但隨著溫度的升高,酶蛋白逐漸變性而失活,引起酶反應(yīng)速率下降。因此,在工業(yè)應(yīng)用中,酶的熱穩(wěn)定性成為重要的考慮因素。

    α-葡萄糖醛酸酶的最適反應(yīng)溫度隨來源于不同的菌株有較大的差異,一般在40℃~65℃(見表2),但是從海棲熱袍菌(Thermotoga maritimeMSB8)中分離純化得到的α-葡萄糖醛酸酶最適反應(yīng)溫度達(dá)到85℃,其活性可在75℃維持140 h以上,在95℃保持5 h以上還有20%的酶活力[20]。耐熱菌株的出現(xiàn)有利于酶的貯存和工業(yè)化處理,具有很高的工業(yè)應(yīng)用價值。

    3.2 pH值對α-葡萄糖醛酸酶活性的影響

    多數(shù)α-葡萄糖醛酸酶的最適pH值在3.5~6.0之間,但也有部分菌株所產(chǎn)α-葡萄糖醛酸酶的最適pH值為接近中性或弱堿性。如2008年,Iihashi等[28]從細(xì)菌Paenibacillus sp.TH501b中純化的α-葡萄糖醛酸酶在pH值6.0~7.0表現(xiàn)出最大的酶活力,且在pH值為7.0時該酶最穩(wěn)定。2012年,Lee等[29]從堆肥中的微生物中分離并克隆得到α-葡萄糖醛酸酶基因,該基因表達(dá)的酶最適pH值為7~8;還有,從Thermotoga maritima菌中獲得的α-葡萄糖醛酸酶最適pH值為7.8[31]。

    3.3 金屬離子對 α-葡萄糖醛酸酶酶活性的影響

    除溫度和pH值外,α-葡萄糖醛酸酶的結(jié)構(gòu)及活性也會受到金屬離子的影響,在工業(yè)應(yīng)用中某些金屬離子對酶的激活或抑制作用也是衡量該酶工業(yè)用途的重要參數(shù)。研究表明,金屬離子的種類以及濃度均會對 α-葡萄糖醛酸酶的活性產(chǎn)生顯著影響。例如,一般重金屬(Hg2+、Cu2+、Co2+、Zn2+等)和一些有機(jī)物(尿素、EDTA、DMSO等)會抑制α-葡萄糖醛酸酶的活力,而Ca2+和Mg2+能夠穩(wěn)定“酶-底物”復(fù)合物從而提高酶活力[16]。Ruile等[22]曾報道了Ag+、Cd2+、Hg2+、Pb2+、Cu2+和Zn2+對α-葡萄糖醛酸酶有強烈的抑制作用,而低濃度的Fe2+、Ca2+及K+均可以提高酶的活力。

    4 α-葡萄糖醛酸酶基因的克隆及表達(dá)

    近年來,越來越多的α-葡萄糖醛酸酶從細(xì)菌和真菌等微生物中被純化、克隆和表達(dá)(見表2)。細(xì)菌來源的酶有Thermoanaerobacteriumpolysaccharolyticum、Cellvibrio japonicus、Ruminococcus albus、Thermotoga maritima、Bacteroides ovatus和Paenibacillus polymyxa等。例如,Ruile等[22]從Thermotoga maritimeMSB8基因文庫中篩選得到6.5 kb DNA片段,并對其進(jìn)行核酸序列分析、缺失實驗及在大腸桿菌中表達(dá),最后分離到一個編碼674個氨基酸的α-葡萄糖醛酸酶基因。在國內(nèi),薛業(yè)敏等[32]也從極端嗜熱厭氧細(xì)菌海棲熱袍菌(Thermotoga maritime)中克隆了α-葡萄糖醛酸酶基因并實現(xiàn)了其在大腸桿菌中的高效表達(dá)。真菌來源被研究的酶有Aspergillus niger、Talaromyces emersonii、Botryotinia fuckeliana、Pichia stipitis、Schizophyllum commune、Sporisorium reilianum、Thielavia terrestris、Paenibacillussp、Phanerochaete chrysosporium、Aureobasidium pullulans等。被克隆和表達(dá)的 α-葡萄糖醛酸酶基因也都大部分來自真菌,如1997年首次從T. reeseiRut-30克隆的α-葡萄醛酸基因grlI,其核酸序列含有2541 bp的開放閱讀框,編碼847個氨基酸[33];2007年,Heneghan等[19]從嗜熱真菌Talaromyces emersonii克隆了 α-葡萄糖醛酸酶aguA基因,該基因沒有內(nèi)含子,由一個2511 bp的開放閱讀框組成,能夠編碼837個氨基酸。2008年,Lee等[29]利用燕麥木聚糖、樺木木聚糖和山毛櫸木聚糖作為碳源從堆肥中的混合種群微生物中分離到 3.9 kb的基因組 DNA,進(jìn)而將克隆到的α-葡萄糖醛酸酶基因deg75-AG轉(zhuǎn)化進(jìn)大腸桿菌BL21(DE3)pLysE中進(jìn)行IPTG誘導(dǎo)表達(dá)。Rogowski等[9]又從Bacteroides ovatus基因組DNA中克隆得到GH 115家族α-葡萄糖醛酸酶基因BoAgu115A,該基因編碼一個824個氨基酸的蛋白質(zhì)。將來,隨著對木聚糖酶系的深入研究,具有各種不同酶學(xué)特性的α-葡萄糖醛酸酶將會被一一克隆與表達(dá)。

    5 α-葡萄糖醛酸酶的應(yīng)用前景及展望

    α-葡萄糖醛酸酶具有良好的應(yīng)用前景。能源工業(yè)方面,α-葡萄糖醛酸酶能夠協(xié)同內(nèi)切木聚糖酶和β-木糖苷酶將半纖維素徹底降解為木糖,而木糖可被細(xì)菌或真菌轉(zhuǎn)化為液體燃料如酒精等。食品領(lǐng)域方面,α-葡萄糖醛酸酶能夠與其他半纖維素酶共同降解果汁、啤酒中的一些多糖,有利于果汁、啤酒的澄清,α-葡萄糖醛酸酶對于提高低聚木糖的產(chǎn)率也具有重要應(yīng)用價值。在工程菌株的構(gòu)建方面,α-葡萄糖醛酸酶的研究對于構(gòu)建能夠合理地高產(chǎn)所有半纖維素酶系的工程菌株具有重要作用。

    雖然近幾年對于α-葡萄糖醛酸酶的研究進(jìn)展很快,但還存在一些問題需要更加深入的研究。首先,詳細(xì)闡明 α-葡萄糖醛酸酶催化反應(yīng)機(jī)制對于更好地利用該酶具有重大的意義,然而,現(xiàn)在的研究還不夠深入,比如酶與底物相互作用的精確模式等還有待進(jìn)一步深入研究。其次,目前雖然有文獻(xiàn)報道α-葡萄糖醛酸酶能與內(nèi)切木聚糖酶或 β-木糖苷酶協(xié)同并促進(jìn)降解木聚糖,但還無法完全解釋α-葡萄糖醛酸酶與內(nèi)切木聚糖酶或 β-木糖苷酶協(xié)同降解機(jī)理;同時,不同家族的α-葡萄糖醛酸酶有不同的水解催化特性,研究也報道了這些差異的存在可能與酶的拓?fù)鋵W(xué)結(jié)構(gòu)有關(guān),但明確的機(jī)理還有待更深入的證實。目前,α-葡萄糖醛酸酶已經(jīng)從不同的微生物中被純化或克隆表達(dá)獲得,但所獲得的酶活力均不高,因此探索合適的培養(yǎng)基來實現(xiàn)該酶的高效表達(dá),對于工業(yè)應(yīng)用具有很高的價值,這也是今后研究的一個重要方向。此外,如何利用葡萄糖醛酸酶與阿拉伯糖糖苷酶或β-木糖苷酶等半纖維素酶協(xié)同作用可控地降解半纖維素,以獲得高價值產(chǎn)品,也將是科研工作者的研究方向。

    [1] Peng F, Peng P, Xu F, et al. Fractional purification and bioconversion of hemicelluloses[J]. Biotechnol Adv, 2012, 30(4): 879-903.

    [2] 阮同琦, 趙祥穎, 劉建軍. 木聚糖酶及其應(yīng)用研究進(jìn)展[J]. 山東食品發(fā)酵, 2008, 1: 42-45.

    [3] Han Y, Agarwal V, Dodd D, et al. Biochemical and structural insights into xylan utilization by the thermophilic bacterium Caldanaerobius polysaccharolyticus[J]. J. Biol. Chem, 2012, 287(42): 34946-34960.

    [4] Johnson K G, Silva M C, Mackenzie C R, et al. Microbial Degradation of Hemicellulosic Materials[J]. Appl Biochem Biotechnol, 1989, 20(21): 245-259.

    [5] Henrissat B. A classification of glycosyl hydrolases based on amino acid sequence similarities[J]. Biochem. J., 1991, 280: 309-316.

    [6] Cantarel B L, Coutinho P M, Rancurel C, et al. The Carbohydrate-Active EnZymes database (CAZy): an expert resource for Glycogenomics[J]. Nucleic Acids Res, 2009, 37: D233-D238.

    [7] De Wet B J M, Van Zyl W H, Prior B A. Characterization of theAureobasidium pullulansα-glucuronidase expressed inSaccharomyces cerevisiae[J]. Enzyme Microb. Technol, 2006, 38(5): 649-656.

    [8] De Wet B J M, Van Zyl W H, Prior B A. Microbial α-glucuronidases: In Lignocellulose Biodegradation[M]. Washington, DC: American Chemical Society, 2004, 241-254.

    [9] Rogowski A, Baslé A, Farinas C S, et al. Evidence that GH115 α-glucuronidase activity, which is required to degrade plant biomass, is dependent on conformational flexibility[J]. J. Biol. Chem, 2014, 289(1): 53-64.

    [10] Biely P, de Vries R P, Vrsanska M, et al. Inverting character of α-glucuronidase A fromAspergillus tubingensis[J]. Biochim. Biophys. Acta, 2000, 1474: 360-364.

    [11] Kolenová K, Ryabova O, Vrsanská M, et al. Inverting character of family GH115 α-glucuronidases[J]. FEBS Lett, 2010, 584(18): 4063-4068.

    [12] Shallom D, Golan G, Shoham G, et al. Effect of dimer dissociation on activity and thermostability of the α-glucuronidase fromGeobacillus stearothermophilus: dissecting the different oligomeric forms of family 67 glycoside hydrolases[J]. J. Bacteriol, 2004, 186(20): 6928-6937.

    [13] Didier N, Tibor N, Harry J Gilbert, et al. The Structural Basis for Catalysis and Specificity of thePseudomonas cellulosaα-Glucuronidase, GlcA67A[J]. Structure, 2002, 10: 547-556.

    [14] Nagy T, Nurizzo D, Davies G J, et al. The α-glucuronidase, GlcA67A, ofCellvibrio japonicusutilizes the carboxylate and methyl groups of aldobiouronic acid as important substrate recognition determinants[J]. J. Biol. Chem, 2003, 278(22): 20286-20292.

    [15] Golan G, Shallom D, Teplitsky A, et al. Crystal structures ofGeobacillus stearothermophilusα-glucuronidase complexed with its substrate and products: mechanistic implications[J]. J. Biol. Chem, 2004, 279(4): 3014-3024.

    [16] Juturu V, Wu J C. Insight into microbial hemicellulases other than xylanases: a review[J]. J. Chem. Technol. Biotechnol, 2013, 88(3): 353-363.

    [17] Fujimoto Z, Ichinose H, Biely P, et al. Crystallization and preliminary crystallographic analysis of the glycoside hydrolase family 115 α-glucuronidase fromStreptomyces pristinaespiralis[J]. Acta Crystallogr Sect F Struct Biol Cryst Commun, 2011, 67: 68-71.

    [18] Tenkanen M, Siika-aho M. An α-glucuronidase ofSchizophyllum communeacting on polymeric xylan[J]. J. Biotechnol, 2000, 78: 149-161.

    [19] Heneghan M N, McLoughlin L, Murray P G, et al. Cloning, characterisation and expression analysis of α-glucuronidase from the thermophilic fungusTalaromyces emersonii[J]. Enzyme Microb. Technol, 2007, 41: 677-682.

    [20] Lee C C, Kibblewhite R E, Wagschal K, et al. Isolation of α-glucuronidase enzyme from a rumen metagenomic library[J]. Protein J, 2012, 31(3): 206-211.

    [21] Bronnenmeier K, Meissner H, Stocker S, et al. α-D-Glucoronidases from the xylanolytic thermophilesClostridium stecorariumandThermoanaerobacterium saccharolyticum[J]. Microbiology, 1995, 141: 2033-2040.

    [22] Ruile P, Winterhalter C, Liebl W. Isolation and analysis of a gene encoding α-glucuronidase, an enzyme with a novel primary structure involved in the breakdown of xylan[J]. Mol. Microbiol, 1997, 23(2): 267-279.

    [23] Chow V, Nong G, Preston J F. Structure, function, and regulation of the aldouronate utilization gene cluster fromPaenibacillussp. strain JDR-2[J]. J Bacteriol, 2007, 189(24): 8863-8870.

    [24] Shao W, Obi S, Puls J, et al. Purification and characterization of the α-glucuronidase fromThermoanaerobacteriumsp. strain JW/SL-YS485, an important enzyme for the utilization of substituted xylans[J]. Appl. Environ. Microbiol, 1995, 61: 1077-1081.

    [25] Castanares A, Hay A J, Gordon A H, et al. D-Xylan-degrading enzyme system from the fungusPhanerochaete chrysosporium: isolation and partial characterisation of α-(4-O-methyl)-D-glucuronidase[J]. J. Biotechnol, 1995, 43: 183-194.

    [26] Ryabova O, Vrsanska M, Kaneko S, et al. A novel family of hemicellulolytic α-glucuronidase[J]. FEBS Lett, 2009, 583(9): 1457-1462.

    [27] De Vries R, Poulsen C H, Madrid S, et al. aguA, the gene encoding an extracellular α-glucoronidase fromAspergillus tubingensis, is specifically induced on xylose and not on glucoronic acid[J]. J. Bacteriol, 1998, 180(2): 243-249.

    [28] Iihashi N, Nagayama J, Habu N, et al. Enzymatic degradation of amylouronate (α-(1→4)-linked glucuronan) by α-glucuronidase fromPaenibacillussp. TH501b[J]. Carbohydr. Polym, 2009, 77(1): 59-64.

    [29] Lee C C, Kibblewhite R E, Wagschal K, et al. Isolation and characterization of a novel GH67 α-glucuronidase from a mixed culture[J]. J. Ind. Microbiol. Biotechnol., 2012, 39 (8): 1245-1251.

    [30] Siika-aho M, Tenkanen M, Buchert J, et al. An α-glucuronidase fromTrichoderma reeseiRUT C-30 [J]. Enzyme Microb. Technol., 1994, 16: 813-819.

    [31] Suresh C, Kitaoka M, Hayashi K. A thermostable non-xylanolytic α-glucuronidase ofThermotoga maritimaMSB8[J]. Biosci Biotechnol Biochem, 2003, 67(11): 235-236.

    [32] 薛業(yè)敏, 毛忠貴, 邵蔚藍(lán). 極端嗜熱菌海棲熱袍菌α-葡萄糖醛酸酶的高效表達(dá)和重組酶的純化[J]. 生物工程學(xué)報, 2004, 20(4): 554-560.

    [33] Margoll ES-C, Saloheimo M, Penttila M, et al. The α-glucuronidase gene encoding gene ofTrichoderma reesei[J]. Gene, 1997, 172: 171-172.

    Research Progress of α-Glucuronidase, an Enzyme for Degrading Hemicellulose Side-Chain

    WU Jin-lian, XUE Yong, LI Hai-long, GAN Li-hui, LIU Jian, LONG Min-nan
    (College of Energy, Xiamen University, Xiamen 361102, China)

    Hemicellulose is one of the most abundant renewable resources in nature. The bioconversion of hemicellulose into biofuels or chemicals is a research hotspot in the world. Hemicellulose consists of a backbone of xylan residues and some branches like glucuronic acid. α-Glucuronidase, which is capable to hydrolysis the α-1,2-glycosidic bond between xylan and glucuronic acid, is one of the key enzyme to degrade hemicellulose completely. The recent research progresses on catalysis mechanism, structure, charaterization, and gene cloning of α-glucuronidase are summarized in this paper.

    hemicellulose; α-glucuronidase; structure; catalysis mechanism; enzymatic charaterization

    TK6;Q55

    A

    10.3969/j.issn.2095-560X.2014.05.001

    2095-560X(2014)05-0327-07

    吳金連(1989-),女,碩士研究生,主要從事半纖維素酶的表達(dá)與生物質(zhì)能源研究。

    2014-08-29

    2014-09-06

    國家自然科學(xué)基金(31170067,21303142);國家重點基礎(chǔ)研究發(fā)展計劃(973計劃,2010CB732201);福建省自然科學(xué)基金(2012J05029);農(nóng)業(yè)部“引進(jìn)國際先進(jìn)農(nóng)業(yè)科學(xué)技術(shù)”項目(2013-Z70)

    ? 通信作者:龍敏南,E-mail:longmn@xmu.edu.cn

    龍敏南(1965-),男,博士,教授,博士生導(dǎo)師,主要從事生物質(zhì)轉(zhuǎn)化制生物基燃料與生物基化學(xué)品的研究與技術(shù)開發(fā)。

    猜你喜歡
    側(cè)鏈醛酸聚糖
    基于側(cè)鏈技術(shù)及優(yōu)化DPoS機(jī)制的電能交易模型
    無線電工程(2024年8期)2024-09-16 00:00:00
    澳新擬批準(zhǔn)來自轉(zhuǎn)基因米曲霉的多聚半乳糖醛酸酶和果膠酯酶作為加工助劑
    相對分子質(zhì)量對木聚糖結(jié)晶能力的影響
    酞菁鋅的側(cè)鏈修飾及光動力活性研究
    葡萄糖醛酸內(nèi)酯制備和表征研究
    飼料用β-甘露聚糖酶活力的測定
    湖南飼料(2019年5期)2019-10-15 08:59:10
    含聚醚側(cè)鏈?zhǔn)嵝途埕人猁}分散劑的合成及其應(yīng)用
    基于Mn摻雜ZnS量子點磷光內(nèi)濾效應(yīng)檢測β—葡萄糖醛酸酶
    產(chǎn)木聚糖酶菌株的篩選、鑒定及其酶學(xué)性質(zhì)研究
    中國釀造(2016年12期)2016-03-01 03:08:21
    紫杉醇C13側(cè)鏈的硒代合成及其結(jié)構(gòu)性質(zhì)
    99久国产av精品国产电影| 五月伊人婷婷丁香| 高清在线视频一区二区三区| 青青草视频在线视频观看| 蜜臀久久99精品久久宅男| 成人高潮视频无遮挡免费网站| 中文字幕制服av| 久久综合国产亚洲精品| 在线看a的网站| 国产色爽女视频免费观看| av一本久久久久| 在线a可以看的网站| 国产成人aa在线观看| 亚洲精品色激情综合| 国产欧美亚洲国产| 亚洲精品第二区| 少妇的逼好多水| 99精国产麻豆久久婷婷| 国产v大片淫在线免费观看| 欧美少妇被猛烈插入视频| 亚洲电影在线观看av| 男人狂女人下面高潮的视频| 亚洲av男天堂| 91精品一卡2卡3卡4卡| 能在线免费看毛片的网站| 亚洲欧美日韩无卡精品| 免费看不卡的av| av在线播放精品| 麻豆久久精品国产亚洲av| 18禁裸乳无遮挡免费网站照片| 男男h啪啪无遮挡| av播播在线观看一区| 国产乱来视频区| 99re6热这里在线精品视频| 少妇被粗大猛烈的视频| 色婷婷久久久亚洲欧美| 神马国产精品三级电影在线观看| 日韩欧美精品免费久久| 黄色欧美视频在线观看| 天天躁夜夜躁狠狠久久av| 亚洲色图综合在线观看| 成年女人在线观看亚洲视频 | 久久女婷五月综合色啪小说 | 久久久久九九精品影院| 亚洲伊人久久精品综合| 欧美xxⅹ黑人| 黄色欧美视频在线观看| 日韩一区二区三区影片| 在线观看国产h片| 99热国产这里只有精品6| 欧美最新免费一区二区三区| 热re99久久精品国产66热6| 亚洲欧美日韩卡通动漫| 国产成人91sexporn| 特级一级黄色大片| 一级av片app| 午夜福利视频精品| 精品国产三级普通话版| 午夜福利高清视频| 可以在线观看毛片的网站| 日韩 亚洲 欧美在线| 国语对白做爰xxxⅹ性视频网站| 男女下面进入的视频免费午夜| 日韩,欧美,国产一区二区三区| 高清毛片免费看| av在线天堂中文字幕| 在线天堂最新版资源| 超碰97精品在线观看| 一二三四中文在线观看免费高清| 一区二区三区精品91| 日韩,欧美,国产一区二区三区| 久久久久久久大尺度免费视频| 美女xxoo啪啪120秒动态图| 精品久久久久久电影网| av天堂中文字幕网| 日本一本二区三区精品| 好男人在线观看高清免费视频| 久久人人爽人人爽人人片va| 亚洲激情五月婷婷啪啪| 欧美变态另类bdsm刘玥| 中文字幕亚洲精品专区| 色播亚洲综合网| 亚洲真实伦在线观看| 欧美成人午夜免费资源| 一区二区三区四区激情视频| 婷婷色综合www| 草草在线视频免费看| 自拍偷自拍亚洲精品老妇| 亚洲欧美日韩东京热| 亚洲人成网站高清观看| 男人爽女人下面视频在线观看| 男女国产视频网站| 久久99精品国语久久久| 精品少妇黑人巨大在线播放| 新久久久久国产一级毛片| 在现免费观看毛片| 国产精品精品国产色婷婷| 久久精品久久久久久噜噜老黄| 精品国产一区二区三区久久久樱花 | 少妇人妻 视频| 插逼视频在线观看| 日韩电影二区| 51国产日韩欧美| 一级二级三级毛片免费看| 99热国产这里只有精品6| 永久网站在线| 欧美激情久久久久久爽电影| 久久久色成人| 免费大片18禁| 日韩av免费高清视频| 国产白丝娇喘喷水9色精品| 97热精品久久久久久| 国产一区亚洲一区在线观看| 国产免费一级a男人的天堂| 91狼人影院| 99久久人妻综合| av女优亚洲男人天堂| 性插视频无遮挡在线免费观看| 777米奇影视久久| 亚洲成人精品中文字幕电影| 美女脱内裤让男人舔精品视频| 久久亚洲国产成人精品v| 内地一区二区视频在线| 国产淫片久久久久久久久| 激情 狠狠 欧美| 国内揄拍国产精品人妻在线| 人妻夜夜爽99麻豆av| 国产精品一区二区在线观看99| 男女那种视频在线观看| 久久人人爽人人片av| 精品久久久久久久末码| 亚洲内射少妇av| 五月伊人婷婷丁香| 91久久精品电影网| 中文资源天堂在线| 丝袜喷水一区| 国产精品国产三级国产专区5o| 亚洲av免费高清在线观看| 听说在线观看完整版免费高清| 久久99蜜桃精品久久| 亚洲成人av在线免费| 亚洲人成网站在线观看播放| 久热久热在线精品观看| 老司机影院成人| 欧美激情在线99| 国产av不卡久久| 视频区图区小说| 内射极品少妇av片p| 欧美成人午夜免费资源| 国内精品宾馆在线| 我要看日韩黄色一级片| 亚洲怡红院男人天堂| 黄片无遮挡物在线观看| 99精国产麻豆久久婷婷| 美女被艹到高潮喷水动态| 成人欧美大片| 99热这里只有精品一区| 免费黄色在线免费观看| 大片免费播放器 马上看| 久久ye,这里只有精品| 亚洲精品色激情综合| 国产精品秋霞免费鲁丝片| 日本与韩国留学比较| 身体一侧抽搐| 国产成人freesex在线| 中文在线观看免费www的网站| a级毛色黄片| 亚洲精品国产av成人精品| 欧美精品人与动牲交sv欧美| 免费大片黄手机在线观看| 亚洲欧美成人精品一区二区| 亚洲美女搞黄在线观看| 一本久久精品| 亚洲av一区综合| 最近最新中文字幕免费大全7| 国产亚洲5aaaaa淫片| 免费av不卡在线播放| 亚洲性久久影院| 成人一区二区视频在线观看| 女人被狂操c到高潮| 久久国内精品自在自线图片| 一级a做视频免费观看| 国产精品国产三级国产av玫瑰| 中文字幕人妻熟人妻熟丝袜美| 超碰97精品在线观看| 18禁裸乳无遮挡免费网站照片| 有码 亚洲区| 99热网站在线观看| 美女国产视频在线观看| 中文字幕av成人在线电影| 亚洲av日韩在线播放| 国内精品美女久久久久久| 久久精品国产亚洲av涩爱| 午夜免费观看性视频| 丝瓜视频免费看黄片| 欧美日韩亚洲高清精品| 国产69精品久久久久777片| 韩国av在线不卡| 春色校园在线视频观看| 国产综合精华液| 大片电影免费在线观看免费| 18禁裸乳无遮挡动漫免费视频 | 交换朋友夫妻互换小说| 人妻一区二区av| 精品一区二区三卡| 欧美成人精品欧美一级黄| 久久精品国产亚洲网站| 亚洲四区av| av国产精品久久久久影院| 中国国产av一级| 丰满乱子伦码专区| 亚洲精品色激情综合| www.色视频.com| 最新中文字幕久久久久| freevideosex欧美| 两个人的视频大全免费| 国产精品.久久久| 九草在线视频观看| 伦精品一区二区三区| 久久精品熟女亚洲av麻豆精品| 精品人妻一区二区三区麻豆| 免费看av在线观看网站| 久久人人爽人人片av| 毛片女人毛片| 六月丁香七月| 亚洲,一卡二卡三卡| 亚洲最大成人av| 久久人人爽人人爽人人片va| 一级毛片 在线播放| 婷婷色综合大香蕉| 亚洲精品日韩在线中文字幕| 久久女婷五月综合色啪小说 | 大又大粗又爽又黄少妇毛片口| 久久久久久久国产电影| 韩国高清视频一区二区三区| 丝袜脚勾引网站| 亚洲va在线va天堂va国产| 69av精品久久久久久| 欧美性猛交╳xxx乱大交人| 国产av不卡久久| 国国产精品蜜臀av免费| 国产国拍精品亚洲av在线观看| 在线观看三级黄色| 黑人高潮一二区| 精品久久久久久电影网| 各种免费的搞黄视频| 亚洲av免费在线观看| 97超视频在线观看视频| 国产成人免费观看mmmm| 99久久精品热视频| 久久久久久久久大av| 少妇人妻一区二区三区视频| 神马国产精品三级电影在线观看| 亚洲av中文av极速乱| 男女啪啪激烈高潮av片| 边亲边吃奶的免费视频| 中文字幕av成人在线电影| 亚洲真实伦在线观看| 中文欧美无线码| 三级国产精品欧美在线观看| 亚洲无线观看免费| 永久网站在线| av在线蜜桃| 男女啪啪激烈高潮av片| 国产精品偷伦视频观看了| 国产一区二区三区av在线| 国产一区二区三区av在线| 成人黄色视频免费在线看| 亚洲天堂av无毛| 日韩不卡一区二区三区视频在线| 搡女人真爽免费视频火全软件| 欧美bdsm另类| 免费播放大片免费观看视频在线观看| 久久国产乱子免费精品| 汤姆久久久久久久影院中文字幕| 欧美日韩在线观看h| 99热国产这里只有精品6| 18禁裸乳无遮挡动漫免费视频 | 男女边吃奶边做爰视频| 精品午夜福利在线看| 久久久久久国产a免费观看| 97在线视频观看| 国产精品爽爽va在线观看网站| 美女国产视频在线观看| 亚洲精品乱久久久久久| 午夜激情久久久久久久| 女人十人毛片免费观看3o分钟| 亚洲va在线va天堂va国产| 亚洲,一卡二卡三卡| 欧美成人一区二区免费高清观看| 亚洲av一区综合| 视频中文字幕在线观看| 国产精品女同一区二区软件| 色播亚洲综合网| 国产精品人妻久久久影院| 寂寞人妻少妇视频99o| 看免费成人av毛片| tube8黄色片| 成人综合一区亚洲| 日韩一区二区视频免费看| 久久精品熟女亚洲av麻豆精品| 可以在线观看毛片的网站| 80岁老熟妇乱子伦牲交| 久久鲁丝午夜福利片| 成人高潮视频无遮挡免费网站| 人体艺术视频欧美日本| 国产乱人视频| 日本与韩国留学比较| 久久99蜜桃精品久久| 国产精品国产三级专区第一集| 中文欧美无线码| 菩萨蛮人人尽说江南好唐韦庄| 亚洲国产欧美人成| 久久久精品欧美日韩精品| 欧美性猛交╳xxx乱大交人| 91久久精品国产一区二区成人| 好男人视频免费观看在线| 日韩强制内射视频| 亚洲国产欧美在线一区| av一本久久久久| 黄色怎么调成土黄色| 超碰av人人做人人爽久久| 啦啦啦中文免费视频观看日本| 91久久精品国产一区二区成人| 18禁在线无遮挡免费观看视频| 好男人在线观看高清免费视频| 国产中年淑女户外野战色| 最近2019中文字幕mv第一页| 日韩一区二区三区影片| 热re99久久精品国产66热6| 国产久久久一区二区三区| 新久久久久国产一级毛片| 国产精品麻豆人妻色哟哟久久| tube8黄色片| 国产淫语在线视频| 国产欧美亚洲国产| 精品国产露脸久久av麻豆| 你懂的网址亚洲精品在线观看| 亚洲精品aⅴ在线观看| 九九在线视频观看精品| 在线精品无人区一区二区三 | 嫩草影院精品99| 国内揄拍国产精品人妻在线| 18禁动态无遮挡网站| 五月天丁香电影| 乱系列少妇在线播放| 国产淫片久久久久久久久| 日本欧美国产在线视频| 少妇熟女欧美另类| 一级爰片在线观看| 国产69精品久久久久777片| 国产日韩欧美亚洲二区| 尤物成人国产欧美一区二区三区| 秋霞伦理黄片| av天堂中文字幕网| 国产毛片在线视频| 亚洲成色77777| 精品熟女少妇av免费看| 国产精品偷伦视频观看了| 国产精品久久久久久精品电影| 亚洲aⅴ乱码一区二区在线播放| 国产爽快片一区二区三区| av在线亚洲专区| 国产黄频视频在线观看| 成人特级av手机在线观看| 久久久久国产精品人妻一区二区| 国产淫语在线视频| 91午夜精品亚洲一区二区三区| 少妇的逼好多水| 少妇 在线观看| 欧美老熟妇乱子伦牲交| 五月伊人婷婷丁香| 亚洲国产精品成人综合色| 欧美成人午夜免费资源| 亚洲成色77777| 街头女战士在线观看网站| 国产精品久久久久久精品电影| 国产精品精品国产色婷婷| 亚洲婷婷狠狠爱综合网| 亚洲人与动物交配视频| 久久久久久久亚洲中文字幕| 中文资源天堂在线| 黄色日韩在线| 国产高潮美女av| 国产男女内射视频| 2021少妇久久久久久久久久久| 中文字幕制服av| 小蜜桃在线观看免费完整版高清| 成年女人看的毛片在线观看| 最新中文字幕久久久久| 欧美性猛交╳xxx乱大交人| 最近手机中文字幕大全| 亚洲精品中文字幕在线视频 | 青春草国产在线视频| 人妻少妇偷人精品九色| 毛片女人毛片| 亚洲最大成人手机在线| 国产欧美日韩精品一区二区| 91久久精品电影网| 国产国拍精品亚洲av在线观看| 国产老妇伦熟女老妇高清| 亚洲精品456在线播放app| 免费av观看视频| 欧美bdsm另类| 久久国内精品自在自线图片| 联通29元200g的流量卡| 免费看a级黄色片| 青春草亚洲视频在线观看| 晚上一个人看的免费电影| 成人亚洲精品一区在线观看 | 午夜福利视频1000在线观看| 久久久久久久亚洲中文字幕| 亚洲av中文av极速乱| 亚洲精品色激情综合| 国产精品嫩草影院av在线观看| 成人欧美大片| 少妇被粗大猛烈的视频| 美女内射精品一级片tv| 香蕉精品网在线| kizo精华| 亚洲精品日韩av片在线观看| 欧美性感艳星| 99热网站在线观看| 久久久精品94久久精品| 毛片女人毛片| 亚洲精品一二三| 女人久久www免费人成看片| 人妻夜夜爽99麻豆av| 只有这里有精品99| 精品人妻偷拍中文字幕| 午夜精品一区二区三区免费看| 亚洲欧美日韩另类电影网站 | 黄色怎么调成土黄色| 只有这里有精品99| 午夜激情福利司机影院| 国产成人免费无遮挡视频| 美女高潮的动态| 久久久久久久久久久免费av| 亚洲精品一二三| 亚洲成人中文字幕在线播放| 精品少妇久久久久久888优播| 国产69精品久久久久777片| 麻豆精品久久久久久蜜桃| 在线播放无遮挡| 丰满人妻一区二区三区视频av| 国产69精品久久久久777片| 九九在线视频观看精品| 国产高潮美女av| 校园人妻丝袜中文字幕| 在线观看一区二区三区激情| tube8黄色片| 久久久午夜欧美精品| 高清欧美精品videossex| 三级男女做爰猛烈吃奶摸视频| 国产成人a∨麻豆精品| 亚洲,欧美,日韩| 欧美一区二区亚洲| 国产日韩欧美在线精品| 日本黄色片子视频| 成年人午夜在线观看视频| 美女高潮的动态| 国产 一区 欧美 日韩| 亚洲国产欧美人成| 22中文网久久字幕| 网址你懂的国产日韩在线| 国产v大片淫在线免费观看| 观看免费一级毛片| 欧美最新免费一区二区三区| 身体一侧抽搐| 97人妻精品一区二区三区麻豆| 99热网站在线观看| 亚洲在线观看片| 国产午夜精品久久久久久一区二区三区| 一本久久精品| 久久鲁丝午夜福利片| 国国产精品蜜臀av免费| av在线老鸭窝| 少妇人妻 视频| 久久99热6这里只有精品| 我的老师免费观看完整版| 六月丁香七月| 国产伦精品一区二区三区四那| 色吧在线观看| 99热这里只有精品一区| 国产精品偷伦视频观看了| 一个人观看的视频www高清免费观看| 中文资源天堂在线| 国产一区二区亚洲精品在线观看| 亚洲在线观看片| 国产成人免费观看mmmm| 欧美 日韩 精品 国产| 国产亚洲5aaaaa淫片| 人妻少妇偷人精品九色| a级一级毛片免费在线观看| 身体一侧抽搐| 久久久色成人| 最近中文字幕2019免费版| 亚洲欧洲日产国产| 国产 一区 欧美 日韩| 欧美bdsm另类| 久久精品久久久久久久性| 亚洲av成人精品一二三区| 成年av动漫网址| 国产国拍精品亚洲av在线观看| 欧美日本视频| 天美传媒精品一区二区| 色网站视频免费| 黄色视频在线播放观看不卡| 国产午夜精品久久久久久一区二区三区| 国产一级毛片在线| av免费在线看不卡| 18+在线观看网站| 亚洲aⅴ乱码一区二区在线播放| 国产精品久久久久久久电影| 99热6这里只有精品| 黄片wwwwww| 日本一本二区三区精品| 高清av免费在线| 久久精品国产亚洲av涩爱| 日韩欧美精品免费久久| 亚洲一区二区三区欧美精品 | 国产日韩欧美亚洲二区| 九色成人免费人妻av| 联通29元200g的流量卡| 18禁在线播放成人免费| 97超碰精品成人国产| 亚洲精品日韩在线中文字幕| 毛片女人毛片| 丝袜喷水一区| 久久国产乱子免费精品| 免费在线观看成人毛片| 国产永久视频网站| 久久人人爽av亚洲精品天堂 | 国产男女内射视频| 国产综合懂色| eeuss影院久久| 99热6这里只有精品| 亚洲精品aⅴ在线观看| av国产久精品久网站免费入址| 亚洲欧美日韩东京热| 日韩成人av中文字幕在线观看| 新久久久久国产一级毛片| 99精国产麻豆久久婷婷| 国产探花极品一区二区| 亚洲欧美精品自产自拍| 看非洲黑人一级黄片| 久久久久国产网址| 日韩,欧美,国产一区二区三区| 亚洲自拍偷在线| 欧美xxxx黑人xx丫x性爽| 国产亚洲精品久久久com| 干丝袜人妻中文字幕| 只有这里有精品99| 成年人午夜在线观看视频| 亚洲三级黄色毛片| 男人爽女人下面视频在线观看| 老司机影院毛片| 亚洲av免费高清在线观看| 亚洲国产高清在线一区二区三| 一本久久精品| 全区人妻精品视频| 久久ye,这里只有精品| 国产探花在线观看一区二区| 哪个播放器可以免费观看大片| 久久久久精品性色| 欧美一级a爱片免费观看看| 日韩不卡一区二区三区视频在线| 国产人妻一区二区三区在| 美女高潮的动态| 成人亚洲欧美一区二区av| 视频中文字幕在线观看| 中文字幕免费在线视频6| 国产精品av视频在线免费观看| 亚洲国产成人一精品久久久| 国产精品无大码| 91精品国产九色| 免费看a级黄色片| 少妇熟女欧美另类| 中文欧美无线码| 成人亚洲精品av一区二区| 欧美bdsm另类| 熟妇人妻不卡中文字幕| 久久精品国产自在天天线| a级毛色黄片| 亚洲精品久久久久久婷婷小说| 一级av片app| 五月伊人婷婷丁香| 国产亚洲av片在线观看秒播厂| 最近最新中文字幕免费大全7| 精品视频人人做人人爽| 大码成人一级视频| 久久久欧美国产精品| 日韩制服骚丝袜av| 国产高清三级在线| 黑人高潮一二区| 欧美激情久久久久久爽电影| 国产老妇伦熟女老妇高清| 日日啪夜夜撸| 卡戴珊不雅视频在线播放| 一个人看的www免费观看视频| 国产精品嫩草影院av在线观看| 精品人妻偷拍中文字幕| 18禁在线播放成人免费| 晚上一个人看的免费电影| 国产精品久久久久久精品电影| 亚洲图色成人| 欧美国产精品一级二级三级 | 亚洲av.av天堂| 久久久久久久大尺度免费视频| 国产成人一区二区在线| 日本av手机在线免费观看| 日韩国内少妇激情av| 久久6这里有精品| 免费观看av网站的网址| 久久精品夜色国产|