甲硫氨酸對噪聲性聽力損失的預(yù)防作用研究

葛振民 馬樞 賈曉青

噪聲性聽力損失(noise-induced hearing loss,NIHL)是指生產(chǎn)、生活以及軍事活動中因接觸噪聲刺激所引起的感音神經(jīng)性聽力減退，大量的研究發(fā)現(xiàn)氧化應(yīng)激是導(dǎo)致耳蝸毛細(xì)胞凋亡引起噪聲性聽力損失發(fā)生的重要機(jī)制[1]，而且動物實驗也已經(jīng)證實抗氧化劑，如：甲硫氨酸等，對噪聲性聽力損失具有明確的保護(hù)作用[2，3]。本研究旨在探討口服甲硫氨酸片對健康成人噪聲性聽力損失的保護(hù)作用。

1 資料與方法

1.1研究對象與分組 選擇解放軍某部健康男性軍人203名作為研究對象，年齡19～35歲，平均21.5±7.2歲，隨機(jī)分為試驗組113例和對照組90例，既往均無明確噪聲接觸史，無聽力減退、耳部疾病或其它影響聽力的疾病(如高血壓、糖尿病、耳毒性藥物使用等)病史。本研究經(jīng)醫(yī)院倫理委員會批準(zhǔn)同意，所有受試者于實驗前均簽署了知情同意書。

1.2噪聲暴露及給藥方法 噪聲暴露條件：自動武器實彈射擊訓(xùn)練，噪聲為脈沖噪聲，峰值160～170 dB SPL，連續(xù)暴露1.5小時。于噪聲接觸前3天，試驗組給予甲硫氨酸片(成都利爾藥業(yè)有限公司，0.25 g×36片/盒)口服，750 mg/次，2次/日，對照組給予等量安慰劑(食用淀粉)口服，均連續(xù)服藥3天。

1.3聽力檢測方法 兩組對象于噪聲暴露前、暴露后1、7天分別行純音聽閾測試、ABR檢查。

1.3.1純音聽閾測試 由同一名檢查者按GB規(guī)定的測試方法，對每位受試者進(jìn)行0.5、1.0、2.0、4.0 kHz頻率的常規(guī)純音聽閾測試。儀器采用丹麥生產(chǎn)的MadsenOB 922型臨床聽力計，測試在環(huán)境噪聲<25 dB A的隔聲室內(nèi)進(jìn)行。

1.3.2ABR檢測 ABR測試儀器選用日本光電誘發(fā)電位儀，測試在隔聲屏蔽室進(jìn)行，記錄電極置于顱頂，參考電極置同側(cè)乳突處，前額發(fā)際接地。短聲刺激，帶通濾波100～3 000 Hz，分析時間10 ms，疊加1 000次；刺激強(qiáng)度從70 dB nHL開始，以10 dB步距遞減，以能引出可重復(fù)波Ⅴ的最小刺激聲強(qiáng)作為ABR波Ⅴ反應(yīng)閾值，記錄ABRⅠ-Ⅴ波間期(Ⅰ-Ⅴ IPL)及波Ⅴ反應(yīng)閾。

1.4統(tǒng)計學(xué)方法 所有檢測結(jié)果使用SPSS11.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)處理。同組試驗前后差異比較采用配對t檢驗分析，組間差異比較采用成組t檢驗分析。

2 結(jié)果

兩組受試者噪聲暴露前、暴露后1、7天純音聽閾見表1，ABR反應(yīng)閾及I-V波間期見表2?？梢姡肼暠┞肚皟山M的純音聽閾、ABR反應(yīng)閾及I-V波間期差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)；噪聲暴露后1天(P<0.01)、7天(P<0.05)試驗組純音聽閾、ABR反應(yīng)閾及I-V波間期均低于對照組。與噪聲暴露前相比較，噪聲暴露后1天兩組純音聽閾、ABR反應(yīng)閾及I-V波間期均升高(P<0.05或P<0.01)，試驗組與對照組差異有顯著統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)；噪聲暴露后7天試驗組與暴露前無差異(P>0.05)，而對照組仍較暴露前升高(P<0.05)；對照組于噪聲暴露7天后按照噪聲性聾治療方案給予治療，遠(yuǎn)期(1年以上)隨訪，聽力基本恢復(fù)正常。

表1 噪聲暴露前、后兩組受試者各頻率純音聽閾比較

注：與對照組同頻率比較，*P<0.05，**P<0.01；與同組暴露前比較，△P<0.05，△△P<0.01

表2 噪聲暴露前、后兩組受試者ABR反應(yīng)閾和I-V波間期(ms)比較

注：與試驗組同時間點比較，★P<0.05，▲P<0.01；與同組暴露前比較，※P<0.05，◆P<0.01

3 討論

噪聲暴露后多種機(jī)制參與噪聲性聽力損失的發(fā)生，包括耳蝸血流減少、谷氨酸的興奮毒性、鈣離子平衡改變及氧化應(yīng)激等[4]，其主要表現(xiàn)為聽敏度下降和聽閾改變。噪聲暴露可引起耳蝸血流的劇烈變化和高代謝活動，產(chǎn)生過多的活性氧和活性氮等自由基，超過了細(xì)胞抗氧化系統(tǒng)的清除能力，蓄積的活性氧和活性氮等自由基損害DNA、脂質(zhì)和蛋白質(zhì)，從而引起耳蝸細(xì)胞的壞死或凋亡[5]。同時，許多研究已經(jīng)證實使用抗氧化劑能夠調(diào)節(jié)耳蝸抗氧化狀態(tài)，減輕噪聲性聽力損失和耳蝸毛細(xì)胞損傷，具有保護(hù)聽力的作用[4，6～8]，故本研究探討口服甲硫氨酸片對噪聲性聽力損失的預(yù)防作用。

甲硫氨酸為氨基酸類藥，是體內(nèi)膽堿生物合成的甲基供體，其釋放出活性甲基，阻斷自由基的連鎖反應(yīng)，保護(hù)抗氧化酶的活性，同時還能夠增加還原型谷胱甘肽的活性，增加機(jī)體抗氧化能力，通過抗氧化機(jī)制可發(fā)揮預(yù)防噪聲性聾的作用[2]。動物實驗證實甲硫氨酸對噪聲、順鉑和氨基糖苷類藥物引起的聽力減退具有保護(hù)作用，Kopke等[9]利用沙鼠研究發(fā)現(xiàn)噪聲暴露前、后或暴露后7小時靜脈使用甲硫氨酸可減輕永久性閾移和耳蝸外毛細(xì)胞死亡；許多研究者將其應(yīng)用于小鼠、豚鼠噪聲性聽力損失的研究也得到了相同的結(jié)果[ 10]。從本研究結(jié)果看，噪聲暴露前3天給予甲硫氨酸片口服，能有效減輕噪聲暴露對聽力的損傷，且噪聲暴露后7天，試驗組的純音聽閾及ABR反應(yīng)閾仍低于對照組(P<0.05或P<0.01)，提示甲硫氨酸對聽力的保護(hù)作用在停止用藥后仍可持續(xù)一段時間，與Alexander等[11]的實驗結(jié)果一致。推測甲硫氨酸可能通過直接清除自由基，保持過氧化氫酶、谷胱甘肽還原酶、超氧化物歧化酶的水平，阻止耳蝸細(xì)胞凋亡，從而預(yù)防噪聲性聽力損失的發(fā)生。

前期研究證實N-乙酰半胱氨酸作為還原型谷胱甘肽補(bǔ)充物前體能夠減輕噪聲對聽力的損傷[7]，驗證了還原型谷胱甘肽參與噪聲性暫時性閾移主要的細(xì)胞內(nèi)抗氧化途徑；Yamasoba等[12]研究發(fā)現(xiàn)噪聲暴露能夠改變耳蝸還原型和氧化型谷胱甘肽的比例，氧化型谷胱甘肽增加，還原型谷胱甘肽減少，而前者參與活性氧引起的耳蝸細(xì)胞損傷；Campbell[13]、Grondin[14]等研究證實甲硫氨酸能減輕順鉑引起的谷胱甘肽還原酶活性降低，預(yù)防順鉑對聽力的損傷；本研究發(fā)現(xiàn)預(yù)服甲硫氨酸片在噪聲暴露后7天其仍具有聽力保護(hù)作用，推測甲硫氨酸也可能通過后期修飾，硫化為半胱氨酸的中間物腺苷甲硫氨酸，增加還原型谷胱甘肽水平而發(fā)揮抗氧化作用，從而減輕噪聲對聽力的損傷。

目前，已經(jīng)開始了幾種抗氧化劑預(yù)防噪聲性聾的臨床試驗，包括甲硫氨酸、維生素A、C、E和鎂劑，N-乙酰半胱氨酸以及依布硒[10]，本研究證實噪聲暴露前口服甲硫氨酸片可一定程度地減輕噪聲性聽力損失的發(fā)生，但噪聲暴露前口服甲硫氨酸的最佳使用時機(jī)還需要進(jìn)一步探討。

4 參考文獻(xiàn)

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