細胞塊免疫標記技術(shù)在胸腹水細胞病理診斷及鑒別診斷中的應(yīng)用價值

趙硯杰

(遼寧省本溪市中心醫(yī)院，遼寧 本溪 117000)

細胞塊免疫標記技術(shù)在胸腹水細胞病理診斷及鑒別診斷中的應(yīng)用價值

趙硯杰

(遼寧省本溪市中心醫(yī)院，遼寧 本溪 117000)

目的分析并探討細胞塊免疫標記技術(shù)應(yīng)用于胸腹水細胞病理診斷及鑒別診斷中的價值。方法收集我院病理科以胸腹水做成的細胞塊122例，其中確診為癌的病例116例，為間皮細胞增生活躍的有6例。對其進行HE常規(guī)染色和細胞免疫標記的處理，并對結(jié)果進行統(tǒng)計分析。結(jié)果CEA在大部分腺癌中表達水平都比較高，但在間皮細胞下基本不表達；CA125在卵巢癌細胞中表達的水平比較高為88%；TTF-1在肺腺癌細胞中表達水平較高為90%；BerEP4在大部分腺癌中表達水平都比較高，但在間皮細胞下基本不表達；CDX2在腸癌和胃癌細胞中表達較高分別為90%和56%；GDFP15在乳腺癌細胞中表達較高為88%；Calretinin在間皮瘤及間皮增生細胞中表達較高分別為100%和83%，在其他腺癌細胞中表達的情況極少。結(jié)論細胞塊免疫標記技術(shù)能夠較為準確的進行胸腹水細胞病理的診斷及鑒別，且方法簡便實用，具有較好的應(yīng)用價值。

胸腹水；細胞塊；免疫標記；診斷及鑒別

在臨床上細胞病理診斷時，常常會遇到各種體液找癌細胞的送檢標本，其中最多也最為常見的就是胸腹水標本[1]。由于經(jīng)常規(guī)離心制作的涂片容易發(fā)生細胞堆積的現(xiàn)象，致使胸腹水找癌細胞時細胞量不理想，結(jié)構(gòu)不清晰等，導(dǎo)致很難進行及時準確的診斷[2]。

1 資料與方法

1.1 一般資料：收集我院病理科以胸腹水做成的細胞塊122例，其中確診為癌的病例116例，為間皮細胞增生活躍的有6例。診斷為癌的116例病例中包括腹水37例，胸水79例，通過組織學(xué)證實，其中腸癌21例，胃癌16例，肺癌29例，卵巢癌17例，乳腺癌17例，惡性間皮瘤8例，間皮細胞增生活躍的6例。

病例滿足條件：①所選取的病例具有較好的免疫標記、細胞塊和HE切片的資料；②所選取的病例經(jīng)影像學(xué)檢查、病理切片和臨床跟蹤觀察確診。

1.2 方法：①細胞塊制備的方法：收集10 mL胸腹水，將其置于一次性可用于離心的塑料管中，以2000 r/min離心10～15 min，取出后倒去上清液，如果樣本為血性胸腹水，可加入少量50%的酒精，待其破壞紅細胞后再次進行離心。離心后，如果沉淀物量少可以重復(fù)加入胸腹水并進行離心，直至沉淀物足夠多并且形成固體塊，隨后用擦鏡紙包裹固定，如果離心后沉淀物不成塊狀，可以用少量3%的融化瓊脂塊混勻后再次離心，直至離心后沉淀成為塊狀為止。將塑料管切開，然后將擦鏡紙包裹和普通組織一起放入脫水機，進行一系列的脫水處理。②細胞塊及常規(guī)切片以細胞免疫化學(xué)方法：使用HE染色法對細胞塊切片進行染色，并采用細胞免疫化學(xué)SP法對其進行處理，按照說明的修復(fù)要求修復(fù)抗體，按照常規(guī)設(shè)置陰陽性對照，所用試劑生產(chǎn)公司為上海太陽生物科技有限公司。

2 結(jié) 果

2.1 HE常規(guī)切片結(jié)果：HE常規(guī)切片能明顯分辯出腫瘤細胞異型，呈腺泡、腺管和實性細胞團等方式排列。

2.2 細胞免疫結(jié)果。免疫結(jié)果判定標準：①陽性：細胞胞質(zhì)或是胞膜、胞核見棕黃色，或是有黃褐色顆粒出現(xiàn)，并且所占細胞比例＞10%；②陰性：細胞胞質(zhì)或是胞膜、胞核沒有棕黃色或黃褐色顆粒出現(xiàn)，或是棕黃色、黃褐色顆粒所占細胞比例＜10%。

根據(jù)結(jié)果統(tǒng)計：①CEA在大部分腺癌中表達水平都比較高，但在間皮細胞下基本不表達；②CA125在卵巢癌細胞中表達的水平比較高為88%；③TTF-1在肺腺癌細胞中表達水平較高為90%；④BerEP4在大部分腺癌中表達水平都比較高，但在間皮細胞下基本不表達；⑤CDX2在腸癌和胃癌細胞中表達較高分別為90%和56%；⑥GDFP15在乳腺癌細胞中表達較高為88%；⑦Calretinin在間皮瘤及間皮增生細胞中表達較高分別為100%和83%。見表1。

表1 免疫細胞化學(xué)標記（+）表達[n(%)]

3 討 論

制作細胞塊的操作過程比較簡單，對設(shè)備是要求比較低，對于臨床上胸腹水找癌細胞的診斷中有很高的實用性，同時以免疫標記進行輔助配合，可以明顯提高癌性胸腹水的陽性診斷率[3]。CA125分子量為200 kDa，它是卵巢細胞相關(guān)的膜表面糖蛋白，只有孕期和經(jīng)期婦女的卵巢中可發(fā)現(xiàn)這種抗原，在正常卵巢細胞中并沒有CA125抗原；TTF-1在甲狀腺組織和肺組織中均能夠表達，但其在肺組織中表達僅局限于肺終末氣道細胞和肺終末氣道細胞的腫瘤，因此可作為標志物；BerEP4在間皮中不表達，在腺癌中表達，它對于腺癌的敏感性很高在60%～100%，而在間皮瘤中僅有4%表達，表達比較微弱；CDX2由311個氨基酸組成，是一種腸特異性的轉(zhuǎn)錄因子，它主要定位于腸上皮絨毛和隱窩的表面，在腸癌細胞中陽性表達率高達95%；GCDFP-15常見于組織囊性病變的囊泡液中，是一種15 kDa的單鏈蛋白，可作為乳腺癌高度敏感型和特異性的標志；Calretinin是一種鈣結(jié)合蛋白，它主要在間皮細胞中表達，尤其對上皮性間皮細胞瘤的鑒定診斷可高達100%。

CA125在卵巢癌細胞中表達的水平比較高為88%；TTF-1在肺腺癌細胞中表達水平較高為90%；BerEP4在大部分腺癌中表達水平都比較高，但在間皮細胞下基本不表達；CDX2在腸癌和胃癌細胞中表達較高分別為90%和56%；GDFP15在乳腺癌細胞中表達較高為88%；Calretinin在間皮瘤及間皮增生細胞中表達較高分別為100%和83%，在其他腺癌細胞中表達的情況極少。

[1] 郭智俊.胸腹水沉淀物瓊脂石蠟雙包埋切片法與常規(guī)涂片法的對比[J].臨床與實驗病理學(xué)雜志,2012,18(4):437.

[2] 王琪.兒童腸旋轉(zhuǎn)不良伴中腸扭轉(zhuǎn)的影像分析[J].江蘇醫(yī)藥,2010, 34(7):751.

[3] 李敏.結(jié)腸造影對新生兒腸旋轉(zhuǎn)不良診斷價值的探討[J].中國新生兒科雜志,2011,20(5):219.

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1671-8194（2014）35-0113-01