宮頸癌篩查現(xiàn)狀與展望

鄭瑟韻

摘要：近年來(lái)宮頸癌的發(fā)病率有上升和年輕化趨勢(shì)，嚴(yán)重威脅廣大婦女的健康。目前有研究表明，宮頸癌是唯一一種通過(guò)醫(yī)學(xué)干預(yù)能使發(fā)病率和死亡率下降的惡性腫瘤，降低宮頸癌發(fā)病率和死亡率的關(guān)鍵是通過(guò)有效的篩查手段，早期發(fā)現(xiàn)和早期治療宮頸癌前病變。

關(guān)鍵詞：宮頸癌；篩查；現(xiàn)狀；展望

Abstract: in recent years, the incidence of cervical cancer has risen and younger trend, a serious threat to women's health. The current studies have shown that, cervical cancer is the only through a medical intervention can make decreases morbidity and mortality.M alignant tumor, the key to reduce the incidence and death rate of cervical cancer screening is the effective means, early detection and early treatment of cervical precancerous lesions.

Keywords: cervical cancer; screening; status; Prospect【中圖分類號(hào)】R737.33【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】A【文章編號(hào)】1672-8602(2014)04-0258-01

宮頸癌是婦女常見(jiàn)惡性腫瘤之一，嚴(yán)重危害婦女的身心健康。全世界范圍內(nèi)，每年大約有50萬(wàn)新發(fā)宮頸癌病例，每年大約有23萬(wàn)婦女死于該病，其中80%的新發(fā)和死亡病例發(fā)生在發(fā)展中國(guó)家。我國(guó)每年新發(fā)病例約占世界宮頸癌新發(fā)病例的28.8%，占我國(guó)婦女惡性腫瘤發(fā)病率的第1位。由于目前對(duì)于宮頸癌的治療，包括手術(shù)、放療、化療等手段均未獲得理想療效，因此宮頸癌前病變的篩查對(duì)于預(yù)防癌癥顯得尤為重要。

1細(xì)胞學(xué)篩查

1.1巴氏涂片： 巴氏涂片采用特有的取樣器刮取宮頸上皮細(xì)胞，經(jīng)過(guò)涂片、固定、染色等步驟制片后進(jìn)行觀察診斷，具有簡(jiǎn)捷、損傷小、費(fèi)用低的特點(diǎn)。研究表明，接受巴氏涂片篩查的人群子宮頸浸潤(rùn)癌的發(fā)病率降低了70%~90%，而未篩查人群的發(fā)病率變化不大。盡管巴氏涂片顯著提高了宮頸癌的早期檢出率，但有統(tǒng)計(jì)分析表明:巴氏涂片的靈敏度卻僅為29%~56%，因此，臨床上往往需要進(jìn)行復(fù)查或結(jié)合其他方法提高靈敏度。

1.2液基薄層細(xì)胞學(xué)檢查： 液基薄層細(xì)胞學(xué)檢查(TCT)是細(xì)胞制片技術(shù)的重大改進(jìn)，通過(guò)分散、離心、過(guò)濾等步驟去除樣品中血細(xì)胞、勃液等雜質(zhì)，制作出收集細(xì)胞全面而視野清晰的薄層涂片，從而使閱片者的診斷更為準(zhǔn)確，有研究表明TCT對(duì)于CIN的敏感度和特異度分別可達(dá)97.7%和95%。目前，TCT普遍采用宮頸細(xì)胞學(xué)分類為診斷標(biāo)準(zhǔn)，該標(biāo)準(zhǔn)將細(xì)胞形態(tài)的觀察結(jié)果進(jìn)行量化分級(jí)并與臨床診斷對(duì)應(yīng)聯(lián)系，使診斷結(jié)果更為客觀準(zhǔn)確。

2影像學(xué)篩查

陰道鏡主要用于觀察宮頸鱗柱上皮交界處及移行帶的病變部位，并可采集組織進(jìn)行病理活檢，對(duì)于診斷臨床上無(wú)癥狀的早期官頸病變尤有積極意義?，F(xiàn)時(shí)，陰道鏡主要采用RCI評(píng)分為診斷標(biāo)準(zhǔn)，包括邊界、顏色、血管和碘四個(gè)指標(biāo)。RCI評(píng)分有效地將陰道鏡圖像與病理學(xué)診斷關(guān)聯(lián)起來(lái)，為檢查者提供客觀的診斷依據(jù)，從而提高了陰道鏡的確診率。有研究表明，采用RCI評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)，陰道鏡的陽(yáng)性預(yù)測(cè)值和靈敏度可分別高達(dá)96.5%和95.3%。盡管陰道鏡是診斷宮頸病變的可靠工具，但難以檢查到細(xì)小及隱蔽的病灶，因此在儀器性能及評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)方面尚需改進(jìn)。

3HPV分型基因檢測(cè)

目前，在已鑒定的100多種HPV中大約有巧種被認(rèn)定為引發(fā)宮頸癌的元兇。研究表明不同亞型的HPV對(duì)宮頸上皮具有不同的侵襲能力，大約70%的宮頸癌由高危型HPV16和18亞型導(dǎo)致，且最終可發(fā)展為宮頸浸潤(rùn)癌，而12%的宮頸癌由高中危型HPV所致，包括31,33,45等亞型，這三種亞型潛在促進(jìn)宮頸低度鱗狀上皮內(nèi)病變向重度鱗狀上皮內(nèi)病變(HSIL)轉(zhuǎn)化的風(fēng)險(xiǎn)，可見(jiàn)宮頸病變的程度與HPV的型別存在密切聯(lián)系。HPV基因分型檢測(cè)可以使醫(yī)療工作者根據(jù)患者感染的HPV型別預(yù)判病情的發(fā)展，進(jìn)行對(duì)癥治療。

41HPV的基因結(jié)構(gòu)

乳頭瘤病毒屬于雙鏈閉環(huán)DNA病毒，基因組長(zhǎng)度約為8 000 bp，含有8個(gè)開(kāi)放閱讀框(ORF)，其中6個(gè)ORF在病毒復(fù)制的早期編碼與轉(zhuǎn)錄相關(guān)的蛋白，稱為早期基因區(qū)(E區(qū))，包括E1,E2,E4,E5以及與癌變相關(guān)的E6,E7基因；2個(gè)ORF在病毒復(fù)制的晚期編碼構(gòu)成病毒衣殼的蛋白，稱為晚期基因區(qū)(L區(qū))，包括L1和L2基因。在HPV分型檢測(cè)方面，L1基因極有實(shí)用價(jià)值，一方面L1基因在各HPV亞型中均含高度保守序列，有利于設(shè)計(jì)共同引物來(lái)擴(kuò)增一系列不同亞型的L1基因；另一方面，其擴(kuò)增產(chǎn)物又含有足以區(qū)分各種亞型的多樣性序列，研究表明，不同亞型的L1序列具有超過(guò)10%的差異，而實(shí)際應(yīng)用中只需不到100個(gè)堿基就足以鑒別出HPV的亞型。因此，L1基因是現(xiàn)時(shí)鑒別HPV亞型最常用的基因。

4.1雜交捕獲法：雜交捕獲法的原理是將RNA探針與樣品中PCR擴(kuò)增后的DNA進(jìn)行雜交，然后利用固相化的特異性抗體將RNA-DNA雜交鏈捕獲，通過(guò)檢測(cè)RNA探針標(biāo)記物的信號(hào)獲得相關(guān)數(shù)據(jù)。美國(guó)Digene公司開(kāi)發(fā)的第二代DNA雜交捕獲技術(shù)是迄今唯一通過(guò)FDA批準(zhǔn)可在臨床使用的HPV分型檢測(cè)產(chǎn)品。HC II的優(yōu)點(diǎn)在于能夠?qū)?3種高危型HPV進(jìn)行高通量檢測(cè)，且具有良好的特異性和敏感性，靈敏度可達(dá)到1.0pg/mL，相當(dāng)于120 000個(gè)病毒的載量。在國(guó)內(nèi)外HC II已廣泛應(yīng)用于篩查高危型HPV。何明等采用HC II檢測(cè)168例妊娠合并宮頸病變患者的高危型HPV載量，結(jié)果發(fā)現(xiàn)陽(yáng)性率隨病情加重而升高，同級(jí)別CIN合并宮頸炎的患者妊娠時(shí)HPV載量高于產(chǎn)后。

4.2多重實(shí)時(shí)定量PCR： 多重實(shí)時(shí)定量PCR是在實(shí)時(shí)定量PCR (RQ-PCR )的基礎(chǔ)上引入多種激發(fā)光譜不相重疊的熒光分子進(jìn)行標(biāo)記，從而能夠同時(shí)對(duì)多種基因進(jìn)行定性和定量分析。在實(shí)際應(yīng)用中，由于激發(fā)光譜各異的熒光分子種類有限，若要使每種HPV亞型都配有專屬的標(biāo)記物，不僅不切合實(shí)際而且成本高昂。盡管在HPV的型別上沒(méi)有做到完全的細(xì)分，但低危型HPV與宮頸癌相關(guān)程度較小，因而并不影響

多重RQ-PCR的實(shí)際功效和優(yōu)越性。不少學(xué)者使用多重RQ-PCR系統(tǒng)與HC II做對(duì)比試驗(yàn)，結(jié)果表明不同廠家研制的多重RQ-PCR檢測(cè)系統(tǒng)，其靈敏度和特異性均顯著高于HCⅡ。更有學(xué)者不滿足于現(xiàn)行檢測(cè)產(chǎn)品的效果而自行設(shè)計(jì)優(yōu)化方案。Micalessi等成功設(shè)計(jì)出7通道的檢測(cè)系統(tǒng)，為研發(fā)能夠區(qū)分更多HPV型別的檢測(cè)產(chǎn)品奠定了基礎(chǔ)。

4.3基因芯片： 基因芯片是指采用原位合成或直接點(diǎn)樣等方式將多種DNA探針以微矩陣方式結(jié)合在玻璃、硝酸纖維膜等固體介質(zhì)上而組成的檢測(cè)載體?；蛐酒膬?yōu)勢(shì)在于能夠?qū)Χ喾N基因進(jìn)行高通量的檢測(cè)。目前，HPV分型檢測(cè)芯片已廣泛應(yīng)用于特定地區(qū)的大規(guī)模篩查。盡管基因芯片技術(shù)高效可靠，但由于宮頸脫落細(xì)胞的取樣不能精確測(cè)量，即使在同一個(gè)取樣者重復(fù)操作的情況下，也難以確保各次取得的細(xì)胞數(shù)量相近，因此在判讀檢測(cè)結(jié)果時(shí)，芯片膜上色斑的深淺并不能確切反映實(shí)際的病毒載量。

4.4聯(lián)合篩查：細(xì)胞學(xué)檢查和HPV基因檢測(cè)是目前宮頸癌篩查的主要方法，兩者結(jié)合應(yīng)用可以同時(shí)了解患病變的程度以及明確HPV感染的型別，能夠進(jìn)一步提高確診率和預(yù)判病情。付玉梅等采用HC II和TCT對(duì)377例宮頸病變的患者進(jìn)行篩查，同時(shí)以病理組織學(xué)活檢作為參考，結(jié)果表明兩者聯(lián)用時(shí)，對(duì)于CIN I及以上病變的敏感性、特異性、準(zhǔn)確性、陽(yáng)性預(yù)測(cè)值和陰性預(yù)測(cè)值均較單獨(dú)使用一種技術(shù)時(shí)有顯著提高。因此在發(fā)達(dá)地區(qū)可以聯(lián)合使用的方法，例如RQ-PCR、基因芯片等高新技術(shù)，在經(jīng)濟(jì)落后的地區(qū)則難以實(shí)施，因此必須針對(duì)各地區(qū)的實(shí)際情況使用相宜的檢測(cè)技術(shù)才能使篩查工作順利開(kāi)展。

5總結(jié)

目前，細(xì)胞學(xué)和組織活檢等篩查技術(shù)已成熟穩(wěn)定，而HPV基因檢測(cè)技術(shù)則發(fā)展迅速。隨著越來(lái)越多分子生物學(xué)領(lǐng)域的技術(shù)引人到HPV篩查工作中，診斷結(jié)果的靈敏度、特異性、重復(fù)性均不斷得到提高。由于新興方法都必須通過(guò)傳統(tǒng)公認(rèn)的方法進(jìn)行驗(yàn)證，因此，在今后的發(fā)展中，將離不開(kāi)新興技術(shù)和傳統(tǒng)技術(shù)的聯(lián)合應(yīng)用，揚(yáng)長(zhǎng)補(bǔ)短，為更有效地預(yù)防宮頸癌奠下基礎(chǔ)。

參考文獻(xiàn)

[1]Velema JP,Ferrer A,Figueroa M,et al.Burneng wood in the kitchen increases the risk of cervical neoplasia ni HPV infected women in Honduras［J］.IntJCancer,2002,97(4)536-541.

[2]Smith JS,Green J,Berrington GA,et al.Cervical cancer and use of hormonal contraptives:asystematic review［J］.Lancet,2003,361:1159-1167.

[3]Duensing S, Munger K. Centro some abnormalities and genomic instability induced by human papilloma virus on proteins[J]. Prog Cell Cycle Res,2003,5:383-391.

[4]Bosch F X, Lorincz A, Munoz N, et al. The causal relation between human Papilloma virusand cervical cancer[J]. J Clin Pathol,2002,55(4):244-265.

［5］Moreno V,Bosch FX,Munoz N,et al.Effect of oral contraceptives on risk of cervical cancer in women with human papilloma virus infection:the IARC multicentric case control study［J］.Lancet,2002,359:1085.

［6］Boyle P,Vecchia C,Walker A,et al.FIGO annual report on the results of treatmenting gynecological Cancer［J］.Journal of epidemiology and biostatictcs,2001,12:743.

[7]Laara E. Trends in mortality from cervical cancer in the Nordic countries: association with organized screening programmes. Lancet, 2005, 34(4): 247～249.