環(huán)吡酮胺陰道栓對(duì)陰道粘膜刺激性和過(guò)敏性試驗(yàn)研究

王小蒙　艾濤　符世托　鄺少軼

【摘要】 目的 為了考察環(huán)吡酮胺陰道栓陰道粘膜用藥的安全性。方法 以家兔和豚鼠為觀察對(duì)象，進(jìn)行環(huán)吡酮胺陰道栓對(duì)家兔陰道粘膜刺激性試驗(yàn)和環(huán)吡酮胺陰道栓對(duì)豚鼠陰道粘膜過(guò)敏性試驗(yàn)。結(jié)果 家兔完整陰道粘膜組和破損陰道粘膜組在連續(xù)7天接觸受試藥后，陰道粘膜均未見(jiàn)到異常分泌物，無(wú)充血、水腫和壞死等癥狀，病理檢查，無(wú)炎癥性細(xì)胞浸潤(rùn)和組織細(xì)胞壞死現(xiàn)象，表明環(huán)吡酮胺陰道栓對(duì)家兔完整陰道粘膜組和破損陰道粘膜組均無(wú)刺激性；豚鼠陰道粘膜接觸環(huán)吡酮胺陰道栓致敏后14天激發(fā)，豚鼠陰道粘膜干凈，未見(jiàn)異常分泌物，無(wú)充血、水腫。結(jié)論 表明環(huán)吡酮胺陰道栓對(duì)豚鼠陰道粘膜無(wú)明顯致敏。

【關(guān)鍵詞】 環(huán)吡酮胺；刺激性；過(guò)敏性；陰道栓

doi：10.3969/j.issn.1004-7484（x）.2014.05.046 文章編號(hào)：1004-7484（2014）-05-2448-02

【Abstract】Objective To investigate drug safety of ciclopirox olamine pessary for vagina mucosa.Method An irritation test with ciclopirox olamine pessary to vaginal mucosa of rabbit and hypersusceptibility test with ciclopirox olamine pessary to vagina mucosa of guinea pigs are performed.Result After continuously administration of ciclopirox olamine pessary for 7 days，the integrate vagina mucosa group and damaged vagina mucosa group of rabbits show no symptom of abnormal discharge，hyperaemia，edema，necrosis，etc，and inflammatory cell accumulation and histiocytic necrotizing are not found in pathological examination，indicating that ciclopirox olamine pessary has no irritation to vagina mucosa of rabbit in the both groups.After continuously allergia of ciclopirox olamine pessary for 14 days，vagina mucosa of guinea pig is clean showing no abnormal discharge and hyperaemia，which indicates that vagina mucosa of guinea pig.Conclusion It shows no hypersusceptibility to ciclopirox olamine pessary.

【Key words】 Ciclopirox；Lrritation；Anaphylaxis；Pessary

藥物的活性成份及其代謝產(chǎn)物、輔料等物質(zhì)及其理化性質(zhì)（包括PH值和滲透壓等）均有可能對(duì)給藥部位組織造成刺激性和過(guò)敏性傷害，因此，藥物在臨床使用前必須研究其制劑的安全性，包括溶血性試驗(yàn)、刺激性試驗(yàn)和過(guò)敏性試驗(yàn)，以明確藥物使用中可能產(chǎn)生的毒性反應(yīng)，為臨床用藥提前防范或治療、搶救措施提供參考依據(jù)。陰道栓劑主要用于局部治療陰道和宮頸疾病，臨床使用中，最常見(jiàn)的不應(yīng)反應(yīng)就是藥物對(duì)陰道粘膜產(chǎn)生局部刺激性，導(dǎo)致非感染性陰道炎，有致敏性的藥物還可引起陰道局部過(guò)敏反應(yīng)，引起陰道粘膜水腫、粘膜組織壞死，嚴(yán)重的可導(dǎo)致全身過(guò)敏反應(yīng)。

環(huán)吡酮胺是一種廣譜外用抗真菌藥物，通過(guò)耗竭真菌細(xì)胞內(nèi)的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，干擾菌體RNA的合成來(lái)達(dá)到抑殺作用，具有穿透力強(qiáng)，毒性低，對(duì)皮膚癬菌、霉菌等皮膚致病菌抑殺作用較強(qiáng)等優(yōu)點(diǎn)，在較高濃度下對(duì)革蘭氏陽(yáng)性和革蘭氏陰性菌及支原體等也有一定的抑制作用，其陰道栓制劑常用于婦科陰道炎治療。本實(shí)驗(yàn)進(jìn)行其陰道栓制劑陰道粘膜刺激性試驗(yàn)和陰道粘膜過(guò)敏性試驗(yàn)，以評(píng)價(jià)其臨床用藥安全性。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)藥品 環(huán)吡酮胺陰道栓（實(shí)驗(yàn)用小栓），0.2g/粒（低劑量：含5.6%環(huán)吡酮胺；高劑量：含11.2%環(huán)吡酮胺），由海南海力制藥有限公司生產(chǎn)。空白栓（附型劑）0.2g/粒，由海南海力制藥有限公司提供。2，4-二硝基氯苯，由Gracia Chemical Technology Co.，Ltd.Chengdu生產(chǎn)。丙酮，500ml（AR）。

1.2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 新西蘭家兔，雌性，16只，1.65-1.9kg，購(gòu)自長(zhǎng)沙市天勤生物技術(shù)有限公司；豚鼠，雌性，40只，255-310g，購(gòu)自長(zhǎng)沙市天勤生物技術(shù)有限公司。

1.3 實(shí)驗(yàn)方法

1.3.1 陰道粘膜刺激性試驗(yàn)[1-3] 實(shí)驗(yàn)分4組：陰道粘膜完整試驗(yàn)組、陰道粘膜完整對(duì)照組、陰道粘膜磨損試驗(yàn)組和陰道粘膜磨損對(duì)照組，每組4只家兔。采用前端鈍圓、直徑為6mm的圓形玻棒插入家兔陰道內(nèi)約2-3cm，每只連續(xù)反復(fù)5次來(lái)回摩擦，造成陰道粘膜損傷。采用陰道給藥，無(wú)菌操作，用直徑約3mm的圓滑玻棒將藥粒直接送入家兔陰道內(nèi)約2.0cm處，每次確保藥物與陰道粘膜接觸4h，若藥物流出過(guò)多，要及時(shí)補(bǔ)給，對(duì)照組給予空白栓，試驗(yàn)組給予環(huán)吡酮胺陰道栓，每天1次，連續(xù)7天。末次給藥后72h處死全部動(dòng)物，解剖打開(kāi)陰道，觀察外陰及陰道有無(wú)異常分泌物，用生理鹽水沖洗干凈，肉眼觀察給藥處陰道粘膜有無(wú)紅斑、水腫等刺激反應(yīng)癥狀，參考陰道刺激反應(yīng)癥狀和評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)表，見(jiàn)表1。給予評(píng)分并求每組刺激反應(yīng)均值（每組刺激反應(yīng)均值=組中所有動(dòng)物的紅斑、水腫和分泌物評(píng)分之和÷動(dòng)物數(shù)），根據(jù)陰道刺激性評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)，見(jiàn)表2。進(jìn)行評(píng)價(jià)。摘取出陰道，用10%福爾馬林固定后送病理檢查。

1.3.2 陰道粘膜過(guò)敏性試驗(yàn) 健康雌性豚鼠40只，按體重由大到小隨機(jī)分組，其中試驗(yàn)組20只（給予環(huán)吡酮胺陰道栓），陰性對(duì)照組10只（給予空白栓），陽(yáng)性對(duì)照組10只（給予2，4-二硝基氯苯）。致敏和激發(fā)給藥均采用陰道給藥途徑，栓劑經(jīng)無(wú)菌處理成約0.1g/粒大小，用玻棒直接推入豚鼠陰道內(nèi)距陰道口約1.5cm處，陽(yáng)性對(duì)照藥用帶灌胃針頭的注射器將藥物注入陰道內(nèi)。致敏給藥隔周1次，連續(xù)3次，末次致敏后14天激發(fā)。實(shí)驗(yàn)組給高劑量環(huán)吡酮胺陰道栓致敏，低劑量環(huán)吡酮胺陰道栓激發(fā)；陽(yáng)性對(duì)照組給1%2，4-二硝基氯苯-丙酮溶液致敏，給0.1%2，4-二硝基氯苯-丙酮溶液激發(fā)；陰性對(duì)照組致敏和激發(fā)都給空白栓。激發(fā)后48h處死各組動(dòng)物，解剖縱面切開(kāi)陰道，生理鹽水沖洗陰道粘膜，觀察粘膜有無(wú)充血、水腫等局部過(guò)敏反應(yīng)癥狀，根據(jù)表1的紅斑和水腫評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)計(jì)算每組動(dòng)物平均過(guò)敏反應(yīng)分值（平均過(guò)敏反應(yīng)分值=組中所有動(dòng)物紅斑和水腫分值之和÷動(dòng)物數(shù)）和致敏率（致敏率=過(guò)敏動(dòng)物數(shù)÷全部動(dòng)物數(shù)×100%），根據(jù)致敏率評(píng)價(jià)致敏程度，見(jiàn)表3。

2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果

2.1 陰道粘膜刺激性試驗(yàn)

2.1.1 肉眼觀察結(jié)果 末次給藥后72h處死動(dòng)物，肉眼觀察家兔陰道粘膜，陰道粘膜磨損試驗(yàn)組和陰道粘膜完整試驗(yàn)組無(wú)異常分泌物，生理鹽水沖洗后觀察陰道粘膜，試驗(yàn)組均無(wú)紅斑、水腫，評(píng)分均為0。對(duì)照組中，陰道粘膜完整家兔均正常，無(wú)紅斑、水腫和異常分泌物，但陰道粘膜磨損組有2只可看到紅斑，分別評(píng)分為2分和1分，平均分值為0.75，根據(jù)評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)，均值小于1仍屬于無(wú)刺激，見(jiàn)表4。

2.1.2 病理檢查結(jié)果 鏡下觀察陰道粘膜組織，陰道粘膜完整的對(duì)照組和試驗(yàn)組均可見(jiàn)鱗狀上皮細(xì)胞完整，無(wú)血管擴(kuò)張，無(wú)細(xì)胞壞死，無(wú)炎細(xì)胞浸潤(rùn)。而陰道粘膜磨損的對(duì)照組和試驗(yàn)組均有2只出現(xiàn)上皮細(xì)胞脫落，對(duì)照組有少量炎細(xì)胞浸潤(rùn)，但均無(wú)血管擴(kuò)張和細(xì)胞壞死，認(rèn)為是機(jī)械性摩擦所致。

2.2 陰道粘膜過(guò)敏性試驗(yàn) 各組動(dòng)物激發(fā)后48h處死，解剖切開(kāi)陰道，肉眼觀察：陽(yáng)性對(duì)照組陰道粘膜有大量膿性分泌物，生理鹽水沖洗后，可見(jiàn)粘膜明顯重度水腫增厚（大于1mm），重度充血（呈紫紅色），致敏率達(dá)100%，呈極強(qiáng)致敏性。陰性對(duì)照組和試驗(yàn)組陰道干凈，無(wú)充血、無(wú)水腫，過(guò)敏反應(yīng)均值和致敏率均為0，見(jiàn)表5。

3 討論

當(dāng)組織細(xì)胞受到病理性刺激，會(huì)產(chǎn)生血管擴(kuò)張、血管通透性增加，血漿滲出造成水腫，且在高倍鏡下可看到局部大量炎癥細(xì)胞浸，嚴(yán)重的可造成細(xì)胞壞死。試驗(yàn)組各動(dòng)物的陰道粘膜連續(xù)7天接觸環(huán)吡酮胺，肉眼觀察陰道粘膜，沒(méi)有發(fā)生紅斑和水腫，平均分值為0，病理檢查，除了磨損組有個(gè)別動(dòng)物出現(xiàn)鱗狀上皮細(xì)胞脫落外，試驗(yàn)組其余動(dòng)物均未見(jiàn)異常的病理改變，表明環(huán)吡酮胺陰道栓對(duì)完整陰道和磨損陰道粘膜均沒(méi)有明顯的直接刺激作用。藥物若對(duì)機(jī)體致敏產(chǎn)生抗體，再次接觸該藥物，可立即產(chǎn)生過(guò)敏反應(yīng)。2，4-二硝基氯苯具有的很強(qiáng)致敏性，常在皮膚變態(tài)反應(yīng)試驗(yàn)中作為陽(yáng)性對(duì)照藥建立過(guò)敏反應(yīng)模型[4]，本實(shí)驗(yàn)陽(yáng)性對(duì)照組激發(fā)后產(chǎn)生明顯的充血和水腫等過(guò)敏反應(yīng)癥狀。實(shí)驗(yàn)組激發(fā)后沒(méi)有出現(xiàn)粘膜充血、水腫過(guò)敏反應(yīng)癥狀，表明環(huán)吡酮胺對(duì)陰道粘膜局部沒(méi)有明顯致敏作用。

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