短葉13號(hào)蘿卜加代技術(shù)研究

駱海波　李世升　李德超　賀從安

摘 要：通過低溫處理蘿卜干種子、萌動(dòng)種子及幼苗，以期從中篩選出更適合短葉13號(hào)蘿卜加代研究的材料，尋找更快、更方便的蘿卜加代方法。試驗(yàn)結(jié)果表明，相比其他兩類材料，蘿卜干種子不易完成春化而開花；而在蘿卜萌動(dòng)種子及蘿卜幼苗兩類材料中，前者加代操作相對(duì)簡便且低溫處理定植后開花比例較高。因此，將萌動(dòng)種子作為蘿卜加代材料可縮短育種進(jìn)程、提高育種效率。

關(guān)鍵詞：春化；加代；發(fā)育時(shí)期；開花；短葉13號(hào)蘿卜

蘿卜是種子春化型作物，低溫是其開花的必要條件。自然低溫條件需要較長時(shí)間才能實(shí)現(xiàn)，因此利用自然條件讓蘿卜開花結(jié)實(shí)周期長、耗時(shí)多。利用人工條件模擬自然低溫促進(jìn)蘿卜提早開花，可大大縮短研究時(shí)間，加快蘿卜育種進(jìn)程[1]。加代技術(shù)是利用二年生作物低溫春化的植物學(xué)習(xí)性，通過低溫處理或激素處理幼苗，人為促進(jìn)植物抽薹、開花及結(jié)籽的技術(shù)，每年至少可完成2～4代。本研究在先前蘿卜人工加代技術(shù)的基礎(chǔ)上[2]，利用恒定低溫條件處理干種子、萌動(dòng)種子及幼苗等不同時(shí)期的短葉13號(hào)常規(guī)蘿卜材料，通過比較上述不同蘿卜材料經(jīng)人工低溫處理后開花情況及種子形成情況，篩選更方便、快捷的蘿卜加代方法。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

供試材料來自武漢市蔬菜研究所十字花科研究室純化的短葉13號(hào)常規(guī)蘿卜品種。

1.2 試驗(yàn)方法

分別對(duì)短葉13號(hào)蘿卜品種的3個(gè)不同發(fā)育時(shí)期（處于休眠狀態(tài)干種子、萌動(dòng)種子及處于子葉時(shí)期幼苗）的材料進(jìn)行處理。干種子直接放置于2～4℃冰箱進(jìn)行低溫處理；另外將短葉13號(hào)干種子放入玻璃平皿浸種，分別將浸種2 d左右剛露白萌動(dòng)的種子及浸種7 d已發(fā)育至子葉期的幼苗移入裝有有機(jī)基質(zhì)的穴盤中，并置于2～4℃冰箱進(jìn)行低溫處理，均處理20 d。每個(gè)材料設(shè)置3個(gè)重復(fù)，處理期間需要人工澆水以保持適當(dāng)濕度，待處理完后直接移苗于露地，作好標(biāo)記，具體操作過程如圖1。田間調(diào)查每個(gè)處理的定植時(shí)間、開花時(shí)間、花器官形態(tài)及結(jié)莢情況等。

1.3 蘿卜胚胎分離及花藥觀察

手工從蘿卜角果中分離胚珠，然后再利用解剖針在解剖鏡（江南JSZ5B）下分離得到蘿卜不同發(fā)育時(shí)期的胚胎，花藥形態(tài)及蘿卜胚胎利用體式顯微鏡（Olympus SCX-12）及CCD觀察并拍照。

1.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)及制圖

數(shù)據(jù)獲取后利用Excel進(jìn)行描述性統(tǒng)計(jì)分析，然后利用Coreldraw12作圖。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同蘿卜材料開花情況比較

表1結(jié)果表明，除蘿卜干種子開花比例極低（0.54%，n=402）外，其他2類材料開花比例均較高，人工低溫處理蘿卜萌動(dòng)種子及蘿卜幼苗定植后開花比例分別為91.72%（n=95）、95.85%（n=120）。盡管蘿卜干種子經(jīng)人工低溫處理后開花比例較低，但其操作簡單（直接將其放置低溫冰箱即可）。另外，相比蘿卜幼苗的加代過程，蘿卜萌動(dòng)種子的加代步驟也比較簡單，只需要將剛剛萌動(dòng)的種子放入穴盤進(jìn)行低溫處理。處理蘿卜幼苗則需將其人工插入穴盤基質(zhì)，加之移苗過程易折斷下胚軸致其倒伏。

2.2 不同蘿卜材料開花后花器官形態(tài)比較

通過比較發(fā)現(xiàn)，蘿卜干種子、蘿卜萌動(dòng)種子及蘿卜幼苗經(jīng)低溫處理后所形成的生殖器官——花在外形上不存在差異。3種蘿卜材料經(jīng)加代后花器官一致，部分雄性不育植株花形態(tài)中雄蕊敗育情況也十分明顯（圖2）。

2.3 不同蘿卜材料開花后角果發(fā)育及胚胎發(fā)育情況分析

圖3為短葉13號(hào)蘿卜莢果及種子胚胎發(fā)育情況，本試驗(yàn)結(jié)果表明，3種蘿卜材料在人工加代開花（可育植株）后均能形成正常角果，加代后所形成的角果與自然條件下所形成角果無異。進(jìn)一步通過顯微解剖的方法分離得到不同發(fā)育時(shí)期內(nèi)胚珠中的胚胎，結(jié)果顯示胚胎發(fā)育也是正常的。

3 小結(jié)與討論

蘿卜加代技術(shù)不僅為研究蘿卜育性、蘿卜重要性狀遺傳及種子發(fā)育規(guī)律提供可貴試驗(yàn)材料，而且使其研究過程大大縮短，研究速度加快。通過人工低溫處理蘿卜種子使其完成開花在前人研究中已見報(bào)道[3，4]，本研究希望通過篩選不同蘿卜材料，尋找更快、更方便的蘿卜加代方法。蘿卜干種子、蘿卜萌動(dòng)種子及蘿卜幼苗分別是不同狀態(tài)的種子及其發(fā)育產(chǎn)物，分別對(duì)上述蘿卜材料開展人工低溫處理工作并分析其開花情況，結(jié)果表明，相比其他2種材料，蘿卜干種子在相同條件下不易完成春化而開花。而在蘿卜萌動(dòng)種子及蘿卜幼苗兩類材料中，前者加代操作相對(duì)簡便且低溫處理定植后開花比例較高?？偠灾?，將蘿卜萌動(dòng)種子作為蘿卜加代材料可使蘿卜加代過程更快、更便捷，效率也很高。

參考文獻(xiàn)

[1] 汪隆植，何啟偉.中國蘿卜[M].北京：科學(xué)技術(shù)文獻(xiàn)出版社，2004：22-34.

[2] 梅時(shí)勇.系統(tǒng)開展蘿卜全產(chǎn)業(yè)鏈科技研發(fā) 促進(jìn)我們蘿卜產(chǎn)業(yè)不斷提檔升級(jí)[J].長江蔬菜，2013（24）：1-5.

[3] 張麗，宮國義.兩種春化方式對(duì)不同蘿卜品種抽薹開花的影響[J].北方園藝，2006（2）：35-36.

[4] 駱海波，張雪清，李德超，等.蘿卜加代技術(shù)[J].種子世界，2004（12）：46.

摘 要：通過低溫處理蘿卜干種子、萌動(dòng)種子及幼苗，以期從中篩選出更適合短葉13號(hào)蘿卜加代研究的材料，尋找更快、更方便的蘿卜加代方法。試驗(yàn)結(jié)果表明，相比其他兩類材料，蘿卜干種子不易完成春化而開花；而在蘿卜萌動(dòng)種子及蘿卜幼苗兩類材料中，前者加代操作相對(duì)簡便且低溫處理定植后開花比例較高。因此，將萌動(dòng)種子作為蘿卜加代材料可縮短育種進(jìn)程、提高育種效率。

關(guān)鍵詞：春化；加代；發(fā)育時(shí)期；開花；短葉13號(hào)蘿卜

蘿卜是種子春化型作物，低溫是其開花的必要條件。自然低溫條件需要較長時(shí)間才能實(shí)現(xiàn)，因此利用自然條件讓蘿卜開花結(jié)實(shí)周期長、耗時(shí)多。利用人工條件模擬自然低溫促進(jìn)蘿卜提早開花，可大大縮短研究時(shí)間，加快蘿卜育種進(jìn)程[1]。加代技術(shù)是利用二年生作物低溫春化的植物學(xué)習(xí)性，通過低溫處理或激素處理幼苗，人為促進(jìn)植物抽薹、開花及結(jié)籽的技術(shù)，每年至少可完成2～4代。本研究在先前蘿卜人工加代技術(shù)的基礎(chǔ)上[2]，利用恒定低溫條件處理干種子、萌動(dòng)種子及幼苗等不同時(shí)期的短葉13號(hào)常規(guī)蘿卜材料，通過比較上述不同蘿卜材料經(jīng)人工低溫處理后開花情況及種子形成情況，篩選更方便、快捷的蘿卜加代方法。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

供試材料來自武漢市蔬菜研究所十字花科研究室純化的短葉13號(hào)常規(guī)蘿卜品種。

1.2 試驗(yàn)方法

分別對(duì)短葉13號(hào)蘿卜品種的3個(gè)不同發(fā)育時(shí)期（處于休眠狀態(tài)干種子、萌動(dòng)種子及處于子葉時(shí)期幼苗）的材料進(jìn)行處理。干種子直接放置于2～4℃冰箱進(jìn)行低溫處理；另外將短葉13號(hào)干種子放入玻璃平皿浸種，分別將浸種2 d左右剛露白萌動(dòng)的種子及浸種7 d已發(fā)育至子葉期的幼苗移入裝有有機(jī)基質(zhì)的穴盤中，并置于2～4℃冰箱進(jìn)行低溫處理，均處理20 d。每個(gè)材料設(shè)置3個(gè)重復(fù)，處理期間需要人工澆水以保持適當(dāng)濕度，待處理完后直接移苗于露地，作好標(biāo)記，具體操作過程如圖1。田間調(diào)查每個(gè)處理的定植時(shí)間、開花時(shí)間、花器官形態(tài)及結(jié)莢情況等。

1.3 蘿卜胚胎分離及花藥觀察

手工從蘿卜角果中分離胚珠，然后再利用解剖針在解剖鏡（江南JSZ5B）下分離得到蘿卜不同發(fā)育時(shí)期的胚胎，花藥形態(tài)及蘿卜胚胎利用體式顯微鏡（Olympus SCX-12）及CCD觀察并拍照。

1.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)及制圖

數(shù)據(jù)獲取后利用Excel進(jìn)行描述性統(tǒng)計(jì)分析，然后利用Coreldraw12作圖。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同蘿卜材料開花情況比較

表1結(jié)果表明，除蘿卜干種子開花比例極低（0.54%，n=402）外，其他2類材料開花比例均較高，人工低溫處理蘿卜萌動(dòng)種子及蘿卜幼苗定植后開花比例分別為91.72%（n=95）、95.85%（n=120）。盡管蘿卜干種子經(jīng)人工低溫處理后開花比例較低，但其操作簡單（直接將其放置低溫冰箱即可）。另外，相比蘿卜幼苗的加代過程，蘿卜萌動(dòng)種子的加代步驟也比較簡單，只需要將剛剛萌動(dòng)的種子放入穴盤進(jìn)行低溫處理。處理蘿卜幼苗則需將其人工插入穴盤基質(zhì)，加之移苗過程易折斷下胚軸致其倒伏。

2.2 不同蘿卜材料開花后花器官形態(tài)比較

通過比較發(fā)現(xiàn)，蘿卜干種子、蘿卜萌動(dòng)種子及蘿卜幼苗經(jīng)低溫處理后所形成的生殖器官——花在外形上不存在差異。3種蘿卜材料經(jīng)加代后花器官一致，部分雄性不育植株花形態(tài)中雄蕊敗育情況也十分明顯（圖2）。

2.3 不同蘿卜材料開花后角果發(fā)育及胚胎發(fā)育情況分析

圖3為短葉13號(hào)蘿卜莢果及種子胚胎發(fā)育情況，本試驗(yàn)結(jié)果表明，3種蘿卜材料在人工加代開花（可育植株）后均能形成正常角果，加代后所形成的角果與自然條件下所形成角果無異。進(jìn)一步通過顯微解剖的方法分離得到不同發(fā)育時(shí)期內(nèi)胚珠中的胚胎，結(jié)果顯示胚胎發(fā)育也是正常的。

3 小結(jié)與討論

蘿卜加代技術(shù)不僅為研究蘿卜育性、蘿卜重要性狀遺傳及種子發(fā)育規(guī)律提供可貴試驗(yàn)材料，而且使其研究過程大大縮短，研究速度加快。通過人工低溫處理蘿卜種子使其完成開花在前人研究中已見報(bào)道[3，4]，本研究希望通過篩選不同蘿卜材料，尋找更快、更方便的蘿卜加代方法。蘿卜干種子、蘿卜萌動(dòng)種子及蘿卜幼苗分別是不同狀態(tài)的種子及其發(fā)育產(chǎn)物，分別對(duì)上述蘿卜材料開展人工低溫處理工作并分析其開花情況，結(jié)果表明，相比其他2種材料，蘿卜干種子在相同條件下不易完成春化而開花。而在蘿卜萌動(dòng)種子及蘿卜幼苗兩類材料中，前者加代操作相對(duì)簡便且低溫處理定植后開花比例較高?？偠灾?，將蘿卜萌動(dòng)種子作為蘿卜加代材料可使蘿卜加代過程更快、更便捷，效率也很高。

參考文獻(xiàn)

[1] 汪隆植，何啟偉.中國蘿卜[M].北京：科學(xué)技術(shù)文獻(xiàn)出版社，2004：22-34.

[2] 梅時(shí)勇.系統(tǒng)開展蘿卜全產(chǎn)業(yè)鏈科技研發(fā) 促進(jìn)我們蘿卜產(chǎn)業(yè)不斷提檔升級(jí)[J].長江蔬菜，2013（24）：1-5.

[3] 張麗，宮國義.兩種春化方式對(duì)不同蘿卜品種抽薹開花的影響[J].北方園藝，2006（2）：35-36.

[4] 駱海波，張雪清，李德超，等.蘿卜加代技術(shù)[J].種子世界，2004（12）：46.

摘 要：通過低溫處理蘿卜干種子、萌動(dòng)種子及幼苗，以期從中篩選出更適合短葉13號(hào)蘿卜加代研究的材料，尋找更快、更方便的蘿卜加代方法。試驗(yàn)結(jié)果表明，相比其他兩類材料，蘿卜干種子不易完成春化而開花；而在蘿卜萌動(dòng)種子及蘿卜幼苗兩類材料中，前者加代操作相對(duì)簡便且低溫處理定植后開花比例較高。因此，將萌動(dòng)種子作為蘿卜加代材料可縮短育種進(jìn)程、提高育種效率。

關(guān)鍵詞：春化；加代；發(fā)育時(shí)期；開花；短葉13號(hào)蘿卜

蘿卜是種子春化型作物，低溫是其開花的必要條件。自然低溫條件需要較長時(shí)間才能實(shí)現(xiàn)，因此利用自然條件讓蘿卜開花結(jié)實(shí)周期長、耗時(shí)多。利用人工條件模擬自然低溫促進(jìn)蘿卜提早開花，可大大縮短研究時(shí)間，加快蘿卜育種進(jìn)程[1]。加代技術(shù)是利用二年生作物低溫春化的植物學(xué)習(xí)性，通過低溫處理或激素處理幼苗，人為促進(jìn)植物抽薹、開花及結(jié)籽的技術(shù)，每年至少可完成2～4代。本研究在先前蘿卜人工加代技術(shù)的基礎(chǔ)上[2]，利用恒定低溫條件處理干種子、萌動(dòng)種子及幼苗等不同時(shí)期的短葉13號(hào)常規(guī)蘿卜材料，通過比較上述不同蘿卜材料經(jīng)人工低溫處理后開花情況及種子形成情況，篩選更方便、快捷的蘿卜加代方法。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

供試材料來自武漢市蔬菜研究所十字花科研究室純化的短葉13號(hào)常規(guī)蘿卜品種。

1.2 試驗(yàn)方法

分別對(duì)短葉13號(hào)蘿卜品種的3個(gè)不同發(fā)育時(shí)期（處于休眠狀態(tài)干種子、萌動(dòng)種子及處于子葉時(shí)期幼苗）的材料進(jìn)行處理。干種子直接放置于2～4℃冰箱進(jìn)行低溫處理；另外將短葉13號(hào)干種子放入玻璃平皿浸種，分別將浸種2 d左右剛露白萌動(dòng)的種子及浸種7 d已發(fā)育至子葉期的幼苗移入裝有有機(jī)基質(zhì)的穴盤中，并置于2～4℃冰箱進(jìn)行低溫處理，均處理20 d。每個(gè)材料設(shè)置3個(gè)重復(fù)，處理期間需要人工澆水以保持適當(dāng)濕度，待處理完后直接移苗于露地，作好標(biāo)記，具體操作過程如圖1。田間調(diào)查每個(gè)處理的定植時(shí)間、開花時(shí)間、花器官形態(tài)及結(jié)莢情況等。

1.3 蘿卜胚胎分離及花藥觀察

手工從蘿卜角果中分離胚珠，然后再利用解剖針在解剖鏡（江南JSZ5B）下分離得到蘿卜不同發(fā)育時(shí)期的胚胎，花藥形態(tài)及蘿卜胚胎利用體式顯微鏡（Olympus SCX-12）及CCD觀察并拍照。

1.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)及制圖

數(shù)據(jù)獲取后利用Excel進(jìn)行描述性統(tǒng)計(jì)分析，然后利用Coreldraw12作圖。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同蘿卜材料開花情況比較

表1結(jié)果表明，除蘿卜干種子開花比例極低（0.54%，n=402）外，其他2類材料開花比例均較高，人工低溫處理蘿卜萌動(dòng)種子及蘿卜幼苗定植后開花比例分別為91.72%（n=95）、95.85%（n=120）。盡管蘿卜干種子經(jīng)人工低溫處理后開花比例較低，但其操作簡單（直接將其放置低溫冰箱即可）。另外，相比蘿卜幼苗的加代過程，蘿卜萌動(dòng)種子的加代步驟也比較簡單，只需要將剛剛萌動(dòng)的種子放入穴盤進(jìn)行低溫處理。處理蘿卜幼苗則需將其人工插入穴盤基質(zhì)，加之移苗過程易折斷下胚軸致其倒伏。

2.2 不同蘿卜材料開花后花器官形態(tài)比較

通過比較發(fā)現(xiàn)，蘿卜干種子、蘿卜萌動(dòng)種子及蘿卜幼苗經(jīng)低溫處理后所形成的生殖器官——花在外形上不存在差異。3種蘿卜材料經(jīng)加代后花器官一致，部分雄性不育植株花形態(tài)中雄蕊敗育情況也十分明顯（圖2）。

2.3 不同蘿卜材料開花后角果發(fā)育及胚胎發(fā)育情況分析

圖3為短葉13號(hào)蘿卜莢果及種子胚胎發(fā)育情況，本試驗(yàn)結(jié)果表明，3種蘿卜材料在人工加代開花（可育植株）后均能形成正常角果，加代后所形成的角果與自然條件下所形成角果無異。進(jìn)一步通過顯微解剖的方法分離得到不同發(fā)育時(shí)期內(nèi)胚珠中的胚胎，結(jié)果顯示胚胎發(fā)育也是正常的。

3 小結(jié)與討論

蘿卜加代技術(shù)不僅為研究蘿卜育性、蘿卜重要性狀遺傳及種子發(fā)育規(guī)律提供可貴試驗(yàn)材料，而且使其研究過程大大縮短，研究速度加快。通過人工低溫處理蘿卜種子使其完成開花在前人研究中已見報(bào)道[3，4]，本研究希望通過篩選不同蘿卜材料，尋找更快、更方便的蘿卜加代方法。蘿卜干種子、蘿卜萌動(dòng)種子及蘿卜幼苗分別是不同狀態(tài)的種子及其發(fā)育產(chǎn)物，分別對(duì)上述蘿卜材料開展人工低溫處理工作并分析其開花情況，結(jié)果表明，相比其他2種材料，蘿卜干種子在相同條件下不易完成春化而開花。而在蘿卜萌動(dòng)種子及蘿卜幼苗兩類材料中，前者加代操作相對(duì)簡便且低溫處理定植后開花比例較高?？偠灾?，將蘿卜萌動(dòng)種子作為蘿卜加代材料可使蘿卜加代過程更快、更便捷，效率也很高。

參考文獻(xiàn)

[1] 汪隆植，何啟偉.中國蘿卜[M].北京：科學(xué)技術(shù)文獻(xiàn)出版社，2004：22-34.

[2] 梅時(shí)勇.系統(tǒng)開展蘿卜全產(chǎn)業(yè)鏈科技研發(fā) 促進(jìn)我們蘿卜產(chǎn)業(yè)不斷提檔升級(jí)[J].長江蔬菜，2013（24）：1-5.

[3] 張麗，宮國義.兩種春化方式對(duì)不同蘿卜品種抽薹開花的影響[J].北方園藝，2006（2）：35-36.

[4] 駱海波，張雪清，李德超，等.蘿卜加代技術(shù)[J].種子世界，2004（12）：46.