標(biāo)本溶血對(duì)肝功能檢驗(yàn)結(jié)果的影響

楊 鵬，呂 波，呂秀波，張文硯，王曉濤，吳 楊，劉 楊

(1解放軍第210醫(yī)院403臨床部，遼寧大連116021;2大連機(jī)車(chē)醫(yī)院)

溶血是臨床血樣檢測(cè)不可避免的問(wèn)題，標(biāo)本溶血對(duì)肝功能檢驗(yàn)指標(biāo)會(huì)有一定的干擾作用，影響檢驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性，使之不能為臨床提供可靠的數(shù)據(jù)［1］。而標(biāo)本溶血時(shí)主要影響哪些指標(biāo)，測(cè)定結(jié)果是否真實(shí)可靠，是所有檢驗(yàn)工作者需要了解的問(wèn)題。本文觀察了8項(xiàng)肝功能檢驗(yàn)指標(biāo)在標(biāo)本溶血前后檢測(cè)結(jié)果的變化，現(xiàn)報(bào)告如下。

臨床資料:隨機(jī)抽取我院2012年6～12月體檢者80例，其中男42例、女38例，年齡20～50(38.2±3.3)歲。經(jīng)過(guò)臨床檢查，無(wú)肝腎功能障礙和血液系統(tǒng)疾病等，均為健康體檢者。

儀器與試劑:儀器為日本東芝120FR全自動(dòng)生化分析儀，質(zhì)控血清為英國(guó)朗道生化質(zhì)控品，參數(shù)設(shè)置和校準(zhǔn)均按廠家說(shuō)明書(shū)嚴(yán)格操作。檢測(cè)時(shí)儀器性能良好，質(zhì)控在可控范圍內(nèi)。谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)、谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)生化分析試劑盒均購(gòu)自日本世諾醫(yī)學(xué)科技有限公司，堿性磷酸酶(ALP)生化分析試劑盒購(gòu)自上海復(fù)星長(zhǎng)征公司，谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶(GGT)、總膽紅素(TBIL)、直接膽紅素(DBIL)生化分析試劑盒均購(gòu)自日本和光株式會(huì)社，總蛋白(TP)、白蛋白(ALB)生化分析試劑盒均購(gòu)自煙臺(tái)奧斯邦生物有限公司。

方法:對(duì)每名體檢者嚴(yán)格空腹12～14 h，在清晨同一時(shí)間抽取靜脈血4 mL，分別注入2支干燥試管，每支試管2 mL血液標(biāo)本，并做標(biāo)記。其中一支自然凝固，另一支在血液凝固前用金屬棒攪拌快速攪拌10 min使其溶血(血清中血紅蛋白水平為3～9 g/L)，然后3 000 r/min離心10 min，均未產(chǎn)生肉眼可見(jiàn)的乳糜血和黃疸，直接進(jìn)行肝功能8項(xiàng)的檢測(cè)，包括 ALT、AST、TP、ALB、ALP、GGT、TBIL、DBIL。采用SPSS19.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件，計(jì)量資料用±s表示，組間比較采用配對(duì)t檢驗(yàn)，P≤0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

結(jié)果:80例體檢者的溶血標(biāo)本和未溶血標(biāo)本進(jìn)行8項(xiàng)肝功能檢驗(yàn)指標(biāo)的檢測(cè)，未溶血標(biāo)本和溶血標(biāo)本GGT的檢測(cè)結(jié)果比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)，而未溶血標(biāo)本和溶血標(biāo)本的 ALT、AST、TP、ALB、ALP、TBIL、DBIL的檢測(cè)結(jié)果比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P 均 ＜0.05)。溶血標(biāo)本 ALT、AST、TP、TBIL、DBIL的檢測(cè)結(jié)果比未溶血標(biāo)本增高，ALB和ALP的檢測(cè)結(jié)果比未溶血標(biāo)本降低。見(jiàn)表1。

表1 溶血標(biāo)本和未溶血標(biāo)本的肝功能檢驗(yàn)結(jié)果比較(±s)

表1 溶血標(biāo)本和未溶血標(biāo)本的肝功能檢驗(yàn)結(jié)果比較(±s)

t P ALT(U/L)檢驗(yàn)指標(biāo) 溶血標(biāo)本 未溶血標(biāo)本28.15 ±12.225 27.13 ±12.340 4.234 ＜0.05 AST(U/L) 70.41 ±32.483 23.41 ± 6.044 9.062 ＜0.05 TP(g/L) 85.62 ± 9.418 72.73 ± 5.421 9.177 ＜0.05 ALB(g/L) 43.16 ± 3.009 44.71 ± 2.593 －5.917 ＜0.05 ALP(U/L) 69.46 ±18.666 77.26 ±21.255 －5.862 ＜0.05 GGT(U/L) 27.31 ±17.867 27.85 ±18.069 －1.362 ＞0.05 TBIL(μmol/L)17.47 ± 3.559 12.46 ± 4.356 11.837 ＜0.05 DBIL(μmol/L)7.15 ± 1.986 4.24 ± 1.587 7.679 ＜0.05

討論:溶血可分為體內(nèi)溶血和體外溶血，體內(nèi)溶血可由物理因素(如人工心臟瓣膜或大血管手術(shù)后)、生物因素(惡性瘧疾)、藥物因素、配血不合引起的輸血反應(yīng)等因素引起;體外溶血可由物理因素(機(jī)械性破壞、凍瘡)、化學(xué)因素(如血樣接觸活性劑)和代謝因素(如遺傳性疾病引起的紅細(xì)胞脆性增加)等引起［2］。

溶血對(duì)不同肝功能檢驗(yàn)項(xiàng)目結(jié)果的影響機(jī)制不同，主要表現(xiàn)為以下幾個(gè)方面:①細(xì)胞內(nèi)外成分濃度差的干擾，如紅細(xì)胞內(nèi)AST和ALT活性分別較血清中高38倍和7倍左右［3］，溶血后細(xì)胞內(nèi)濃度高的物質(zhì)，如酶類(lèi)、血紅蛋白、離子等順濃度差溢出，使測(cè)定值明顯高于正常標(biāo)本;溶血后細(xì)胞內(nèi)濃度低的物質(zhì)，如脂蛋白、鈉等稀釋了血漿標(biāo)本，反而使測(cè)定值明顯降低。②血紅蛋白對(duì)蛋白質(zhì)的干擾使TP的分析濃度高于實(shí)際濃度［4］。③有色物質(zhì)對(duì)吸收光譜的干擾，血紅蛋白的顏色影響原實(shí)驗(yàn)最佳波長(zhǎng)的選擇，造成吸光度和散光度產(chǎn)生較大誤差，尤其是終點(diǎn)法影響更大。干擾結(jié)果有正、負(fù)兩個(gè)方面，當(dāng)被測(cè)溶液的顏色與有色物質(zhì)的顏色接近時(shí)發(fā)生正干擾，而與有色物質(zhì)的顏色相關(guān)較遠(yuǎn)時(shí)產(chǎn)生負(fù)干擾。我們的試劑盒是用重氮法測(cè)定總膽紅素的，最后生成紫紅色的偶氮膽紅素，主要在波長(zhǎng)為540～560 m處有光吸收。而血紅蛋白在波長(zhǎng)540～550 nm處有光吸收，恰與偶氮膽紅素的比色波長(zhǎng)相近。因此，溶血后紅細(xì)胞破裂時(shí)大量血紅蛋白進(jìn)入血清，勢(shì)必造成總膽紅素測(cè)定值的升高。

為了減少標(biāo)本溶血現(xiàn)象的發(fā)生，我們應(yīng)該做到以下幾點(diǎn):①掌握采集血標(biāo)本的正確方法:臨床采血多選用肘正中靜脈或貴要靜脈，嬰幼兒多選用頸外靜脈或股靜脈，避免選擇過(guò)細(xì)的靜脈，更不要從輸液管處抽血;遇到抽血困難的患者，扎止血帶時(shí)間不可過(guò)長(zhǎng)，亦不要反復(fù)拍打穿刺部位，以防機(jī)械刺激造成溶血。正確的靜脈采血方法是熱敷穿刺部位，等血管充盈后再抽血，無(wú)法抽取合格標(biāo)本時(shí)，將抽取的帶泡沫的標(biāo)本立即送檢，不要使其干燥而影響檢測(cè)。②嚴(yán)格按照標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程操作:抽血時(shí)要選擇好穿刺部位，常規(guī)消毒待消毒液干燥后，找準(zhǔn)血管，爭(zhēng)取一針見(jiàn)血，并徐徐轉(zhuǎn)動(dòng)針?biāo)ǔ槿⊙?，向試管注血時(shí)，要沿著試管壁緩慢注入，不得將泡沫注入試管。③妥善保存標(biāo)本:標(biāo)本送入檢驗(yàn)科后，應(yīng)放在室溫下保存，以防發(fā)生溶血。在血標(biāo)本的運(yùn)輸過(guò)程中，防止過(guò)度振蕩而發(fā)生溶血。④?chē)?yán)把注射器及試管的質(zhì)量關(guān):嚴(yán)格掌握一次性注射器、一次性試管的進(jìn)貨渠道，杜絕有不合格產(chǎn)品流入市場(chǎng)和醫(yī)療單位，保證檢驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性，減少患者不必要的經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)和痛苦［5，6］。

檢驗(yàn)人員發(fā)現(xiàn)有溶血現(xiàn)象的血樣時(shí)，應(yīng)立即采取相應(yīng)的措施，主動(dòng)與臨床聯(lián)系，結(jié)合臨床首先排除體內(nèi)溶血的可能。若不是體內(nèi)溶血，檢驗(yàn)人員要對(duì)溶血標(biāo)本報(bào)告嚴(yán)格把關(guān)，要注有溶血程度說(shuō)明，必要時(shí)不發(fā)報(bào)告，要臨床重新抽血復(fù)查;如因特殊情況不能重采，應(yīng)在化驗(yàn)單上注明，以便臨床醫(yī)生準(zhǔn)確評(píng)價(jià)檢驗(yàn)結(jié)果的可靠性。

［1］謝小文.標(biāo)本溶血對(duì)生化檢驗(yàn)結(jié)果的影響及處理對(duì)策［J］.醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)，2012，19(4):90-91.

［2］王學(xué)秀.血液溶血原因及對(duì)策［J］.檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)與臨床，2012，9(10):1279-1280.

［3］虞瑩，孫竹華.溶血對(duì)心肌酶譜測(cè)定指標(biāo)的干擾和影響［J］.檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)與臨床，2012，9(4):467-468.

［4］李恒.標(biāo)本溶血對(duì)生化檢驗(yàn)結(jié)果的影響及對(duì)策［J］.海軍總醫(yī)院學(xué)報(bào)，2011，24(1):54-55.

［5］陳俊峰.11項(xiàng)血液生化指標(biāo)測(cè)定值在溶血前后的比較［J］.河南預(yù)防醫(yī)學(xué)雜志，2011，22(3):218-219.

［6］許慧嫻，曾裕微.探討溶血地臨床血生化檢驗(yàn)的干擾［J］.中國(guó)中醫(yī)藥，2012，10(10):159-160.