血漿IL-17水平與頸動(dòng)脈內(nèi)中膜厚度的相關(guān)性研究

陽(yáng)慧，蘇雨江，陸士娟，陳漠水，邢波，鐘江華，孫定軍，馬添翼

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血漿IL-17水平與頸動(dòng)脈內(nèi)中膜厚度的相關(guān)性研究

陽(yáng)慧，蘇雨江，陸士娟，陳漠水，邢波，鐘江華，孫定軍，馬添翼

（海口市人民醫(yī)院中南大學(xué)湘雅醫(yī)學(xué)院附屬?？卺t(yī)院心內(nèi)科，海南 ?？?570208）

目的探討原發(fā)性高血壓并頸動(dòng)脈硬化患者血漿中白細(xì)胞介素-17(IL-17)水平與頸動(dòng)脈內(nèi)中膜厚度(IMT)的相互關(guān)系。方法選取原發(fā)性高血壓患者220例，行頸動(dòng)脈彩超檢查，根據(jù)頸動(dòng)脈內(nèi)中膜厚度分組，原發(fā)性高血壓并頸動(dòng)脈斑塊組(斑塊組)96例，原發(fā)性高血壓并頸動(dòng)脈增厚組(增厚組)61例，原發(fā)性高血壓并頸動(dòng)脈正常組(正常組)63例，對(duì)照組61例。采集所有研究對(duì)象的血漿，采用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)測(cè)定其血漿中IL-17濃度，比較血漿IL-17水平與IMT的相關(guān)性。結(jié)果(1)血漿IL-17水平在斑塊組為(401.850±111.137)pg/ml、增厚組為(272.018±82.373)pg/ml、正常組為(195.864±64.001)pg/ml和對(duì)照組為(25.509±7.721)pg/ml，血漿IL-17水平依次降低，差異具有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均P=0.000，P＜0.001)；(2)相關(guān)分析顯示血漿IL-17水平與IMT呈正直線相關(guān)(r=0.732，P＜0.001)。結(jié)論原發(fā)性高血壓并頸動(dòng)脈硬化患者血漿IL-17與頸動(dòng)脈內(nèi)中膜厚度呈正相關(guān)。

原發(fā)性高血壓；頸動(dòng)脈硬化；白介素-17

原發(fā)性高血壓病(Essential hypertension，EH)是最常見(jiàn)的一種心血管綜合征，常伴隨多個(gè)心血管的危險(xiǎn)因素，可導(dǎo)致多個(gè)靶器官損害(Target organ damage，TOD)。動(dòng)脈粥樣硬化也稱動(dòng)脈硬化(Atherosclerosis，AS)，是EH最常見(jiàn)的并發(fā)癥之一，常導(dǎo)致腦卒中和冠心病的發(fā)生，EH是AS的重要危險(xiǎn)因子。頸動(dòng)脈粥樣硬化(Carotid arteriosclerosis，CAS)是大動(dòng)脈血管的常見(jiàn)病變，CAS的病變位置大多發(fā)生在頸總動(dòng)脈及其分支動(dòng)脈。頸動(dòng)脈內(nèi)中膜厚度(Carotid intima-media thickness，IMT)可以早期定性和定量評(píng)估CAS嚴(yán)重程度，在一定程度上可反映冠心病及腦卒中的發(fā)病及預(yù)后。當(dāng)發(fā)現(xiàn)動(dòng)脈粥樣硬化時(shí)予以及時(shí)、有效的治療可以大大減少腦梗死及冠心病的發(fā)病率。根據(jù)CAS的嚴(yán)重程度可將IMT分為三期：IMT＜0.9 mm為頸動(dòng)脈內(nèi)膜正常期，0.9 mm≤IMT≤1.2 mm為頸動(dòng)脈內(nèi)膜增厚期，IMT>1.2 mm為頸動(dòng)脈內(nèi)膜斑塊形成期。頸動(dòng)脈內(nèi)膜增厚及斑塊形成定義為CAS。研究發(fā)現(xiàn)，IMT，可以較好地評(píng)估CAS嚴(yán)重程度，與腦卒中(不管是出血型、腔隙性、非腔隙性、心源性腦卒中)的發(fā)生、復(fù)發(fā)、部位息息相關(guān)[1]，頸動(dòng)脈內(nèi)膜的增厚及斑塊形成明顯升高了腦卒中的發(fā)生率[2]。此外，CAS的嚴(yán)重程度可在一定程度上作為評(píng)價(jià)冠狀動(dòng)脈硬化病變程度的指標(biāo)，頸動(dòng)脈狹窄的患者與頸動(dòng)脈正常人相比，其心血管事件發(fā)生率更高[3-4]。

然而，原發(fā)性高血壓并頸動(dòng)脈硬化的機(jī)制尚未明確，可能與多種因素相關(guān)。研究認(rèn)為IL-17可能與原發(fā)性高血壓并動(dòng)脈粥樣硬化相關(guān)。而IL-17是否與EH及AS病程進(jìn)展程度存在相關(guān)性，IL-17是否參與促AS病變，是否介導(dǎo)粥樣斑塊的不穩(wěn)定調(diào)節(jié)，目前尚未形成一致結(jié)論。本研究通過(guò)檢測(cè)血漿中IL-17在EH并CAS患者中的濃度變化，探討其與IMV的相互關(guān)系，為評(píng)估EH及CAS病程進(jìn)展程度，防治EH并CAS提供更可靠的理論依據(jù)，從而進(jìn)一步指導(dǎo)臨床診斷、治療及預(yù)后。

1 資料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)材料人血漿IL-17酶聯(lián)免疫分析測(cè)定試劑盒由武漢博士德生物工程有限公司提供。

1.2 實(shí)驗(yàn)對(duì)象

1.2.1 研究對(duì)象選擇實(shí)驗(yàn)組病例來(lái)自中南大學(xué)湘雅醫(yī)學(xué)院附屬?？卺t(yī)院心血管內(nèi)科于2012年5月至2013年3月間住院的EH患者226例，排除有個(gè)別缺失值的6例，剩余220例，男性105例，女性115例，年齡(57.93±8.76)歲，均行頸動(dòng)脈超聲檢查。根據(jù)IMT值分組，其中EH并頸動(dòng)脈斑塊組96例(斑塊組)，EH并頸動(dòng)脈增厚組61例(增厚組)，EH并頸動(dòng)脈正常組63例(正常組)。對(duì)照組為同期同院健康體檢中心選取的非高血壓頸動(dòng)脈檢查正常者61例，男性25例，女性36例，年齡(54.97±9.49)歲。原發(fā)性高血壓病患者病史均在1年以內(nèi)，記錄其使用降壓藥類型、他汀類藥物。

1.2.2 高血壓病組

1.2.2.1 入選標(biāo)準(zhǔn)診斷依據(jù)參照2012年《中國(guó)高血壓防治指南》中高血壓病診斷標(biāo)準(zhǔn)：血壓持續(xù)或偶測(cè)非同日3次以上坐位收縮壓大于(SBP)140 mmHg (1 mmHg＝0.133 kPa)和(或)舒張壓(DBP)90 mmHg。

1.2.2.2 排除標(biāo)準(zhǔn)具有下列疾病或情況者，排除在本實(shí)驗(yàn)之外：(1)入選者有繼發(fā)性高血壓、白大衣性高血壓；(2)痛風(fēng)、風(fēng)濕等各種自身免疫性疾??；(3)感染、創(chuàng)傷及手術(shù)者，高熱及服用炎癥抑制劑者；(4)心功能Ⅲ～Ⅳ級(jí)(NYHA分級(jí))、心臟瓣膜病、先天性心臟病及心臟急慢性炎癥者；(5)哮喘、各種腎病患者；(6)惡性腫瘤者；(7)肝炎、肝硬化、肝功能不全、腎功能不全者；(8)吸煙量平均每天超過(guò)5支、飲酒量每天超過(guò)50 g者。

1.2.2.3 分組符合入選標(biāo)準(zhǔn)和排除標(biāo)準(zhǔn)的EH患者共220例，住院期間經(jīng)過(guò)我院頸動(dòng)脈彩超檢查，測(cè)定頸動(dòng)脈內(nèi)中膜厚度，結(jié)合其檢查結(jié)果若IMT＜0.9 mm為內(nèi)膜正常組，0.9 mm≤IMT≤1.2 mm為內(nèi)膜增厚組，IMT>1.2 mm為內(nèi)膜斑塊組。內(nèi)膜增厚及斑塊形成定義為CAS。其中EH并頸動(dòng)脈斑塊組96例，EH并頸動(dòng)脈增厚組61例，EH并頸動(dòng)脈正常組63例。

1.2.3 正常對(duì)照組正常對(duì)照組為同期同院健康體檢中心選取的非高血壓且頸動(dòng)脈檢查未見(jiàn)異常的健康體檢者，共61例。

1.3 實(shí)驗(yàn)方法

1.3.1 測(cè)量身高、體重參照2012年《中國(guó)成人超重和肥胖癥預(yù)防控制指南》測(cè)量所有入選者。

1.3.2 測(cè)量血壓血壓的測(cè)量均由我科具有豐富經(jīng)驗(yàn)的醫(yī)護(hù)人員按照《中國(guó)高血壓防治指南》標(biāo)準(zhǔn)測(cè)量。

1.3.3 頸動(dòng)脈彩超檢查入選者取平臥位，由指定的兩位高年資超聲科醫(yī)生及同一超聲機(jī)器進(jìn)行操作。依次探查頸動(dòng)脈的根部鎖骨上，左、右兩側(cè)的頸總動(dòng)脈、頸總動(dòng)脈分叉處以及頸內(nèi)動(dòng)脈的后壁?？偣矞y(cè)量3個(gè)心動(dòng)周期，取其平均數(shù)作為頸動(dòng)脈內(nèi)中膜厚度數(shù)值(IMT)。若IMT＜0.9 mm為內(nèi)膜正常；0.9 mm≤IMT≤1.2 mm為內(nèi)膜增厚；IMT＞1.2 mm為內(nèi)膜斑塊形成；內(nèi)膜增厚及斑塊形成定義為CAS。

1.3.4 標(biāo)本采集所有研究對(duì)象均禁食10 h以上，于次日清晨空腹抽取肘靜脈血3 ml×3管，置于含有1/10體積的0.109 mmol/L枸櫞酸鈉抗凝液的硅化管中，顛倒混勻，離心10 min，收集上層血漿，置于無(wú)菌Eppendarf管中，于-80℃的超低溫冰箱中保存；采用酶聯(lián)免疫吸附雙抗體夾心法(ELISA)測(cè)定血漿IL-17濃度。同時(shí)所有對(duì)象測(cè)定空腹血糖、甘油三酯、血總膽固醇、高密度脂蛋白、低密度脂蛋白、肝功能、腎功能等，均在我院檢驗(yàn)科質(zhì)控合格的全自動(dòng)生化分析儀上進(jìn)行。

1.3.5 實(shí)驗(yàn)原理檢測(cè)相抗體經(jīng)生物素(biotin)標(biāo)記，隨后加入樣本充分反應(yīng)，與過(guò)氧酶標(biāo)記的親和素反應(yīng)。PBS或TBS洗滌后以TMB顯色，TMB在酶的作用下會(huì)變成藍(lán)色，再在酸的反應(yīng)下變成黃色。顏色深淺與IL-17濃度呈正相關(guān)；在450 nm的波長(zhǎng)下檢測(cè)光密度(Optical density，OD)值；最后根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線，計(jì)算出待測(cè)血漿IL-17的濃度。

1.3.6 試劑使用試劑的準(zhǔn)備、保存及操作步驟嚴(yán)格按照試劑盒說(shuō)明步驟進(jìn)行。

1.3.7 結(jié)果判斷(1)以橫坐標(biāo)(對(duì)數(shù)坐標(biāo))作為標(biāo)準(zhǔn)物的濃度，以縱坐標(biāo)(普通坐標(biāo))為所測(cè)得的OD值，再在半對(duì)數(shù)坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線。(2)根據(jù)樣品OD值在該曲線圖上查出相應(yīng)的IL-17濃度。

1.3.8 性能參數(shù)(1)特異性：系統(tǒng)和其他細(xì)胞因子無(wú)交叉反應(yīng)；(2)敏感性：＜1 pg/ml；(3)檢測(cè)范圍：15.6～1 000 pg/ml。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法采用SPSSl7.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，符合正態(tài)分布的所有計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(x-±s)表示；計(jì)數(shù)資料以頻數(shù)表、百分率或構(gòu)成比描述。不符合正態(tài)分布則以百分位數(shù)描述。符合正態(tài)分布的各組間比較采用單因素方差分析，任意兩組間比較方差齊時(shí)用SNK檢驗(yàn)，方差不齊時(shí)兩兩比較采用Tamhane檢驗(yàn)；不符合正態(tài)分布的組間比較用非參數(shù)檢驗(yàn)。計(jì)數(shù)資料比較采用χ2檢驗(yàn)；正態(tài)分布各變量因素間的關(guān)系用Pearson相關(guān)分析。不符合正態(tài)分布的變量因素間的關(guān)系用Spearman相關(guān)分析。各臨床指標(biāo)對(duì)IL-17的影響采用逐步法多元線性回歸分析。P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，P＜0.01為差異有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。相關(guān)系數(shù)r＞0，正相關(guān)；r＜0，負(fù)相關(guān)，r的絕對(duì)值越大表明相關(guān)性越強(qiáng)。r=0表示零相關(guān)，r=1表示完全相關(guān)。

2 結(jié)果

2.1 各組一般資料比較本研究顯示，各組患者在年齡、性別構(gòu)成、空腹查血糖(FPG)、膽固醇(TC)、血甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)、血尿酸(UA)、肌酐(Cr)、天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)、丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)、體重指數(shù)(BMI)、服用降壓藥、他汀類藥物、高血壓病史等一般臨床資料比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；EH病組SBP、DBP、LDL-C、CRP值均高于對(duì)照組(P＜0.05)。EH病組中正常組與增厚組及斑塊組CRP值比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；EH病組中斑塊組SBP高于正常組及增厚組SBP(均P＜0.05)，增厚組SBP高于正常組(P＜0.05)；EH病組中斑塊組及增厚組DBP均高于頸動(dòng)脈正常組DBP(P＜0.05)，斑塊組DBP與增厚組比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；EH病組中斑塊組LDL-C與增厚組比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，斑塊及增厚組LDL-C均高于正常組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，見(jiàn)表1。

表1 各組患者一般資料的比較（x±s）

2.2 各組頸動(dòng)脈彩超結(jié)果的比較斑塊組IMT數(shù)值高于增厚組(P=0.000，P＜0.001)，增厚組IMT值高于正常組(P=0.000，P＜0.001)，正常組IMT值與對(duì)照組比較差異無(wú)顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.984，P>0.05)，見(jiàn)表2、表3。

表2 各組頸動(dòng)脈IMTm的比較(±s，mm)

表2 各組頸動(dòng)脈IMTm的比較(±s，mm)

注：與對(duì)照組比較，aP＜0.001；與正常組比較，bP＜0.001；與增厚組比較，cP＜0.001。

組別對(duì)照組正常組增厚組斑塊組例數(shù)61 63 61 96頸動(dòng)脈內(nèi)中膜厚度IMT 0.760±0.699 0.765±0.092 1.144±0.042ab1.317±0.096abc

2.3 各組血漿IL-17濃度的比較斑塊組IL-17水平顯著高于增厚組(P=0.000，P＜0.001)，增厚組IL-17水平顯著高于正常組(P=0.000，P＜0.001)，正常組IL-17水平高于對(duì)照組(P=0.000，P＜0.001)，見(jiàn)表4、表5及圖1。

2.4 血漿IL-17水平與IMT相關(guān)性分析對(duì)所有入選者血漿IL-17水平與IMT進(jìn)行Pearson直線相關(guān)性分析表明，血漿IL-17水平與IMT水平呈正相關(guān)，差異有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(r=0.732，P＜0.001)，見(jiàn)圖2。

2.5 IMT與各臨床指標(biāo)間的多元線性回歸分析對(duì)所有入選者IMT與血漿IL-17水平、BMI、性別、年齡、血壓、血糖、腎功能、血脂、肝功能、CRP、降壓藥、他汀類藥物、原發(fā)性高血壓病史等各項(xiàng)指標(biāo)進(jìn)行逐步法多元線性回歸分析，以比較各個(gè)臨床指標(biāo)對(duì)IMT的影響。結(jié)果表明：BMI、性別、血糖、腎功能、甘油三酯、高密度脂蛋白膽固醇、肝功能、CRP、病史等對(duì)IMT無(wú)明顯影響(P>0.05)；IL-17濃度、收縮壓、舒張壓、年齡、低密度膽固醇等是影響IMT的主要危險(xiǎn)因素(P＜0.01)，見(jiàn)表6。

表3 各組頸動(dòng)脈IMT進(jìn)行Tamhane多重比較

表4 各組血漿IL-17的比較(±s，pg/ml)

表4 各組血漿IL-17的比較(±s，pg/ml)

注：與對(duì)照組比較，aP＜0.001；與正常組比較，bP＜0.001；與增厚組比較，cP＜0.001。

組別對(duì)照組正常組增厚組斑塊組例數(shù)61 63 61 96 IL-17 25.509±7.721 195.864±64.001a272.018±82.373ab401.850±111.137abc

表5 各組血漿IL-17進(jìn)行Tamhane多重比較

表6 IMT與各臨床指標(biāo)間的多元線性回歸分析

圖1 各組血漿中IL-17濃度比較

圖2 IL-17水平與IMT水平相關(guān)性分析

3 討論

既往對(duì)高血壓病及其并發(fā)癥發(fā)病機(jī)制的探索大多集中于全身性的調(diào)節(jié)系統(tǒng)，較常見(jiàn)的如交感副交感神經(jīng)系統(tǒng)、腎素-血管緊張素-醛固酮系統(tǒng)、水鈉離子通道平衡調(diào)節(jié)、中樞神經(jīng)系統(tǒng)等,在防治高血壓病及其并發(fā)癥過(guò)程中發(fā)揮了極其重要的作用。近年的研究發(fā)現(xiàn)，EH并AS是一種低度慢性炎癥反應(yīng)性疾病，它與免疫、炎癥的相關(guān)研究資料也逐漸增多。

本實(shí)驗(yàn)在排除其他病的干擾及控制混雜因素后發(fā)現(xiàn)，斑塊組患者血漿IL-17水平高于增厚組，增厚組高于正常組，正常組高于對(duì)照組，EH所有組均高于正常對(duì)照組，差異均有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。本研究結(jié)果與既往臨床及動(dòng)物研究結(jié)果基本一致。在臨床研究中，Taleb等[5]在體內(nèi)實(shí)驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)在動(dòng)脈粥樣硬化的血管炎癥反應(yīng)中IL-17發(fā)揮重要作用，可能與細(xì)胞因子信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)抑制物-3(Suppressor of cytokine signaling-3，SOCS3)表達(dá)減少有關(guān)。來(lái)超[6]通過(guò)研究白介素-17在頸動(dòng)脈粥樣硬化狹窄模型中的表達(dá)，顯示在損傷側(cè)動(dòng)脈粥樣硬化明顯處IL-17抗體聚集，在粥樣硬化斑塊中表現(xiàn)明顯，而內(nèi)膜及中層平滑肌層IL-17表達(dá)較少；在未損傷側(cè)頸動(dòng)脈IL-17抗體聚集較少。吉慶偉等[7]檢測(cè)原發(fā)性高血壓(EH)伴頸動(dòng)脈粥樣硬化患者外周血Th17細(xì)胞比例的變化與血管緊張素Ⅱ(AngⅡ)水平的相關(guān)性，發(fā)現(xiàn)與EH組和對(duì)照組相比較，CAS組Th17細(xì)胞比例顯著升高，血漿IL-17水平顯著升高。CAS組AngⅡ水平高于EH組和對(duì)照組，EH組與對(duì)照組間AngⅡ水平差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。AngⅡ水平與Th17細(xì)胞比例、血漿IL-17水平呈正相關(guān)。表明EH患者的AngⅡ水平和Th17細(xì)胞活性升高,這種改變可能與頸動(dòng)脈粥樣硬化的發(fā)生發(fā)展有關(guān)。這些研究說(shuō)明在動(dòng)脈粥樣硬化過(guò)程中IL-17作為致炎性因子，在動(dòng)脈粥樣硬化形成、發(fā)展及粥樣斑塊形成中起重要作用，并與斑塊穩(wěn)定性有關(guān)。

本研究通過(guò)線性相關(guān)分析結(jié)果顯示：血漿IL-17水平與IMT值呈正相關(guān)，提示原發(fā)性高血壓患者隨著頸動(dòng)脈內(nèi)中膜厚度增厚，IL-17濃度相應(yīng)增高，表明血漿IL-17的濃度是間接反映EH并AS的進(jìn)展程度的重要指標(biāo)，與相關(guān)實(shí)驗(yàn)結(jié)果基本相符。在動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中，有研究顯示在促AS形成的條件下(如老年)，IL-17的表達(dá)成倍增加。van Es等[8]用LDLR-/-小鼠在研究中發(fā)現(xiàn)，IL-17受體信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)是一個(gè)促動(dòng)脈粥樣硬化事件。Madhur等[9]在動(dòng)脈粥樣硬化斑塊的形成過(guò)程中認(rèn)為IL-17可以促進(jìn)頸動(dòng)脈粥樣硬化的狹窄加重并調(diào)節(jié)斑塊穩(wěn)定性，通過(guò)研究載脂蛋白E (APOE)-/-及IL17 A/ApoE-/-老鼠予以高脂肪喂養(yǎng)及血管緊張素Ⅱ輸液，或局部頸動(dòng)脈結(jié)扎術(shù)形成頸動(dòng)脈粥樣硬化模型。結(jié)果顯示在實(shí)驗(yàn)動(dòng)物研究中，IL-17促進(jìn)了動(dòng)脈粥樣硬化及全身的血管炎癥，IL-17可調(diào)節(jié)斑塊的穩(wěn)定性。研究發(fā)現(xiàn)IL-17對(duì)血管緊張素II誘導(dǎo)的動(dòng)脈粥樣硬化模型小鼠有促進(jìn)作用，并介導(dǎo)斑塊的不穩(wěn)定[10]。此外，通過(guò)對(duì)體內(nèi)試驗(yàn)研究[11]，根據(jù)頸動(dòng)脈超聲將230名研究對(duì)象[男性126名，女性104名，平均年齡(68.24±6.71歲)]分為三組：斑塊陰性組、穩(wěn)定斑塊組和不穩(wěn)定斑塊組，發(fā)現(xiàn)在頸動(dòng)脈粥樣硬化斑塊不穩(wěn)定患者中存在Th17/Treg功能失衡，Th17細(xì)胞可能通過(guò)細(xì)胞因子促進(jìn)動(dòng)脈粥樣硬化形成，而調(diào)節(jié)性T細(xì)胞可能抑制動(dòng)脈粥樣硬化斑塊的不穩(wěn)定，具有一定的保護(hù)作用，通過(guò)調(diào)節(jié)Th17/Treg細(xì)胞平衡可能會(huì)為動(dòng)脈粥樣硬化的治療提供新的方向。本實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，隨頸動(dòng)脈內(nèi)中膜厚度增加，IL-17濃度升高，表明IL-17參與動(dòng)脈粥樣硬化的發(fā)展，與上述研究結(jié)果基本相符。然而IL-17在體內(nèi)是否促進(jìn)動(dòng)脈硬化發(fā)展及其具體機(jī)制尚不明確，尚需進(jìn)一步研究。

van Es等[8]第一個(gè)研究了IL-17在AS形成過(guò)程中的作用機(jī)理，認(rèn)為IL-17通過(guò)先天和適應(yīng)性免疫介導(dǎo)了動(dòng)脈粥樣硬化的過(guò)程，而骨髓細(xì)胞起著重要作用。他們將低密度脂蛋白膽固醇(Low densith lipoprotein，LDL)受體基因缺陷的小鼠作為模型，通過(guò)飲食中大量攝取脂肪形成動(dòng)脈粥樣硬化的另一模型。無(wú)論是野生型還是IL-17A受體缺陷型，在動(dòng)脈粥樣硬化病變的發(fā)展過(guò)程中骨髓細(xì)胞都起著重要作用。接受IL-17受體基因缺陷的骨髓后，IL-17受體陽(yáng)性的小鼠外周血單核細(xì)胞(Peripheral blood mononuclear cells，PBMCs)中IL-17減少了約90%。具體如下：對(duì)主動(dòng)脈根部AS病變的一個(gè)模型小鼠予以0.25%的膽固醇和15%可可脂的飲食。12周后發(fā)現(xiàn)接受IL-17受體缺陷骨髓細(xì)胞，病變大小減少了46%，而機(jī)體體重和血清膽固醇水平?jīng)]有觀察到顯著差異。較小的病灶的病理分析顯示：與移植IL-17受體缺失骨髓的小鼠比較，膠原蛋白及中性粒細(xì)胞沒(méi)有顯著變化，肥大細(xì)胞下降約40%，但巨噬細(xì)胞含量略有增加。研究表明剔除IL-17受體骨髓細(xì)胞的小鼠全身性炎癥減少。小鼠經(jīng)抗IL-17處理后主動(dòng)脈根部病變減少約50%，血管平滑肌纖維帽細(xì)胞和膠原蛋白的相對(duì)含量增加，同時(shí)發(fā)現(xiàn)VCAM-1(Vascular cell adhesion molecule-1，)陽(yáng)性細(xì)胞、T細(xì)胞(CD3+)、巨噬細(xì)胞-2+(Macrophages-2+，MAC-2+)、凋亡細(xì)胞(TUNEL+)等炎癥因子數(shù)量的減少。因而，高劑量IL-17對(duì)培養(yǎng)的血管內(nèi)皮細(xì)胞和平滑肌細(xì)胞有促炎作用。通過(guò)血管平滑肌細(xì)胞途徑IL-17A能聯(lián)合腫瘤壞死因子-γ(Tumor necrosis factor-γ，IFN-γ)促進(jìn)炎癥介質(zhì)的加工，它不會(huì)影響培養(yǎng)的平滑肌細(xì)胞的生長(zhǎng)情況，也不會(huì)影響血管壁有絲分裂的潛力。Smith等[12]通過(guò)對(duì)ApoE-/-及年齡、性別匹配的C57BL/6小鼠研究，結(jié)果發(fā)現(xiàn)在促動(dòng)脈粥樣硬化的條件下IL-17促進(jìn)T細(xì)胞的分化。IL-17在動(dòng)脈粥樣硬化形成過(guò)程中起著促致動(dòng)脈粥樣硬化的炎癥作用，通過(guò)促進(jìn)單核細(xì)胞/巨噬細(xì)胞進(jìn)入主動(dòng)脈壁產(chǎn)生作用。但該實(shí)驗(yàn)在動(dòng)物模型上操作，沒(méi)有在體內(nèi)進(jìn)行進(jìn)一步實(shí)驗(yàn)研究。

此外，本研究通過(guò)逐步法進(jìn)行多元線性回歸分析顯示：IL-17水平、年齡、血壓、低密度膽固醇是影響IMT厚度的主要危險(xiǎn)因素，控制IL-17水平、血壓、低密度膽固醇可能會(huì)減輕頸動(dòng)脈硬化疾病病程。本研究結(jié)果與國(guó)內(nèi)外相關(guān)研究結(jié)論基本一致。Kozakova等[13]研究了包含歐洲19個(gè)中心的627名健康受試者，通過(guò)對(duì)頸動(dòng)脈粥樣硬化的危險(xiǎn)因素進(jìn)行了多元回歸分析，結(jié)果顯示：與頸動(dòng)脈內(nèi)中膜厚度獨(dú)立相關(guān)的危險(xiǎn)因素是年齡、頸總動(dòng)脈直徑、收縮壓、低密度脂蛋白膽固醇。此外研究發(fā)現(xiàn)，高血壓患者與正常人比較，頸動(dòng)脈超聲檢查IMT及斑塊形成的發(fā)生率明顯升高，IMT與高血壓病程、血壓分級(jí)及缺血性腦卒中等多種疾病的發(fā)生呈正相關(guān)[14-15]。Femia等[14]對(duì)1 536例受試者進(jìn)行為期3.5年隨訪后報(bào)道，高血壓患者頸動(dòng)脈IMT為正常人群的1.45倍。因此，血壓升高影響了IMT的增厚，與本實(shí)驗(yàn)結(jié)果相符。頸動(dòng)脈內(nèi)中膜增厚是斑塊形成的基礎(chǔ)，為其前期的病理表現(xiàn)，而斑塊的實(shí)質(zhì)是內(nèi)膜的粗糙和增厚，隨病情進(jìn)展繼而形成脂質(zhì)沉積、纖維化、鈣化、機(jī)化血栓、組織內(nèi)出血等，因此，降低血脂特別是低密度膽固醇可能改善頸動(dòng)脈的增厚及斑塊形成。年齡作為促動(dòng)脈硬化危險(xiǎn)因素在本研究中得到證實(shí)。動(dòng)物研究發(fā)現(xiàn)，老年APOE-/-小鼠(40～55周齡)血清IL-17水平高于對(duì)照的C57/ BL6小鼠，主動(dòng)脈IL-17信使RNA(Messenger RNA，mRNA)增加100倍，在老年APOE-/-小鼠動(dòng)脈粥樣硬化主動(dòng)脈中發(fā)現(xiàn)IL-17表達(dá)的T細(xì)胞增加[12]。APOE-/-小鼠口服抗-CD3抗體(調(diào)節(jié)T細(xì)胞產(chǎn)生)，可以使動(dòng)脈粥樣硬化病灶減少30%。在脾淋巴細(xì)胞IL-17和其他炎癥因子生成下降[16]。

IL-17不同于其他炎癥指標(biāo)，如WBC、CRP、TNF-α、IL-6等，這些指標(biāo)只能說(shuō)明炎癥反映是動(dòng)脈硬化發(fā)生時(shí)伴隨的一種現(xiàn)象，與內(nèi)皮功能障礙無(wú)明顯相關(guān)性，不能從本質(zhì)上反映動(dòng)脈粥樣硬化的機(jī)制作用。而IL-17具有調(diào)控作用，不僅是炎癥及免疫反應(yīng)的重要調(diào)節(jié)因子，使T細(xì)胞的作用增強(qiáng)，調(diào)節(jié)先天及適應(yīng)性免疫反應(yīng)，而且可激活RhoA/Rho激酶信號(hào)通路，從而導(dǎo)致內(nèi)皮功能障礙，可能是促進(jìn)動(dòng)脈粥樣硬化發(fā)生、發(fā)展的因子，可能與動(dòng)脈粥樣硬化存在因果聯(lián)系。

在本實(shí)驗(yàn)研究中，筆者初步觀察到EH并CAS患者血漿IL-17濃度較對(duì)照組升高，IMT與血漿IL-17濃度呈正直線相關(guān)，然而IL-17與高血壓病相關(guān)靶器官損害的作用機(jī)制、因果聯(lián)系及其對(duì)其他心血管疾病的預(yù)測(cè)及評(píng)估價(jià)值仍有待進(jìn)一步深入研究及探討。隨著對(duì)IL-17的研究深入，是否能將IL-17的檢測(cè)作為一種判斷高血壓并頸動(dòng)脈粥樣硬化病情進(jìn)展及指導(dǎo)臨床診治的檢測(cè)手段仍是個(gè)值得研究的課題。IL-17作為一種血管炎癥因子，在高血壓并頸動(dòng)脈粥樣硬化病的預(yù)防及治療領(lǐng)域有著廣闊的前景。

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Correlation of plasma IL-17 and intima-media thickness of carotid artery.

YANG Hui,SU Yu-jiang,LU

Shi-juan,CHEN Mo-shui,XING Bo,ZHONG Jiang-hua,SUN Ding-jun,MA Tian-yi.
Department of Cardiology, Haikou People's Hospital,Haikou Hospital of Xiangya Medical College,Central South University,Haikou 570208, Hainan,CHINA

ObjectiveTo study the relationship between the level of interleukin-17(IL-17)in the plasma and the intima-media thickness(IMT)of carotid artery in patients of essential hypertension complicated with carotid atherosclerosis.MethodsIn this study,220 hypertensive patients were categorized into three groups by IMT:plaque group(essential hypertension with carotid artery plaque,96 patients),thickening group(essential hypertension with carotid artery thickening,61 patients),normal group(essential hypertension with normal carotid artery,63 patients). The control group included 61 non-hypertensive patients with normal carotid artery.The fasting periphery blood and the centrifugal upper plasma were collected from hypertensive groups and the control group to test the plasma level of IL-17 by using enzyme linked immunosorbent assay(ELISA).The correlation between the levels of IL-17 from all groups and carotid IMT were compared respectively.Results(1)The level of IL-17 was(401.850±111.137)pg/ml in plaque group,(272.018±2.373)pg/ml in thickening group,(195.864±64.001)pg/ml in normal group,and(25.509± 7.721)pg/ml in the control group,which reduced successively,with statistically significant difference(all P=0.000,P＜0.001).(2)Correlation analysis showed that the level of IL-17 was positively related to IMT by(r=0.732,P＜0.001).ConclusionThe plasma level of IL-17 is positively related to IMT in patients of essential hypertension complicated with carotid atherosclerosis.

Essential hypertension;Carotid atherosclerosis;Interleukin-17

R544.1

A

1003—6350(2014)08—1105—06

10.3969/j.issn.1003-6350.2014.08.0431

2013-09-12)

蘇雨江。E-mail：su5959@sina.com