燒傷患者耐甲氧西林金黃色葡萄球RAPD分析

摘要：目的 調(diào)查燒傷患者耐甲氧西林金黃色葡萄球菌（MRSA）的耐藥性及分子流行病學(xué)情況，為控制感染提供科學(xué)依據(jù)。方法 燒傷患者分離的金黃色葡萄球菌用PCR法擴(kuò)增其mecA基因確定MRSA菌株，K-B紙片法檢測MRSA的耐藥性，隨機(jī)引物擴(kuò)增多態(tài)性DNA（RAPD）進(jìn)行同源性分析。結(jié)果 MRSA的分離率為41.1%，對(duì)多種抗生素均耐藥，沒有發(fā)現(xiàn)耐萬古霉素和替考拉寧的菌株。23株MRSA經(jīng)RAPD分型，均獲得穩(wěn)定的條帶，可分為四型，以Ⅱ型為主，共檢出13株。結(jié)論 燒傷患者分離MRSA菌株具有多重耐藥性，應(yīng)根據(jù)藥敏試驗(yàn)結(jié)果合理選用抗生素進(jìn)行治療；采用RAPD對(duì)MRSA的同源性進(jìn)行研究，為控制感染提供分子流行病學(xué)依據(jù)。

關(guān)鍵詞：燒傷患者；耐甲氧西林金黃色葡萄球菌；耐藥性；隨機(jī)擴(kuò)增DNA多態(tài)性分析

Antibiotics Resistance and RAPD Analysis of Methicillin-resistant Staphylococcus Aureus Isolated from Burn Wounds

SHI Shu-fan，YANG Chang-shun

（Department of Clinical Laboratory，The First Peoplecs Hospital of Huaihua City， Huaihua 418000，Hunan，China）

Abstract：Objective To investigate the status of antibiotics resistance and the genetic homology of methicillin-resistant staphylococcus aureus isolated from burn wounds and provide scientific evidence for controlling MRSA infection. Methods MRSA was identified by mecA PCR. Drug resistance was perfomed using K-B method. The RAPD technique was used to identify the genotypes. Results The separation rate of MRSA was 41.1%. MRSA was resistant to much drugs .But all strains were susceptible to vancomycin and teicoplanin. All 23 stains of MRSA produced fingerprints by RAPD， and was classified into four genotypes.13 strains wereⅡtype which was the dominant type. Conclusion The MRSA isolated from burn wounds has high and multi drug resistance， we should resanobaly choose drugs according to the susceptibility test. RAPD results reveal the special epidemic genotypes of MRSA and this study can provide molecular epidemiological evidence for control of MRSA infection.

Key words：Burn wounds；Methicillin-resistant staphylococcus aureus；Drug resistance；RAPD

燒傷是一種較為常見且可能產(chǎn)生嚴(yán)重后果的外傷，全身感染是燒傷患者致死的重要原因。研究表明[1，2]金黃色葡萄球菌為燒傷患者感染最常見的病原菌，而且金黃色葡萄球菌隨時(shí)可引起患者創(chuàng)口感染，特別是MRSA， 近年來在燒傷創(chuàng)面的檢出率逐年上升。因此對(duì)其耐藥性及流行病學(xué)進(jìn)行研究對(duì)于正確治療其引起的感染，防止其播散，及時(shí)控制其引起的暴發(fā)流行有重要意義。本文對(duì)某院燒傷患者分離的MRSA菌株進(jìn)行耐藥性及RAPD基因分型研究，結(jié)果報(bào)告如下。

1資料與方法

3討論

燒傷科是醫(yī)院感染的高危病區(qū)，燒傷創(chuàng)面由于是開放性，加上嚴(yán)重?zé)齻颊咦陨砻庖吖δ苁軗p，極易發(fā)生創(chuàng)面細(xì)菌污染和定植，甚至發(fā)展膿毒血癥[4]。自上世紀(jì)90年代至今， 金黃色葡萄球菌是引起臨床感染的一種主要病原菌， 在燒傷創(chuàng)面感染中占據(jù)十分重要的位置[5，6]，特別是MRSA， 近年來在燒傷創(chuàng)面的檢出率逐年上升。本研究中共檢出MRSA 23株，分離率達(dá)到41.1%。MRSA對(duì)青霉素，氨芐西林，哌拉西林/他唑巴坦，頭孢噻肟，頭孢吡肟，美洛培南，環(huán)丙沙星、紅霉素耐藥率均為100%；對(duì)利福平和阿米卡星耐藥率均超過50%；對(duì)替考拉寧和萬古霉素的耐藥率為0%。病原菌多重耐藥是導(dǎo)致燒傷病房醫(yī)院感染最主要因素之一，本實(shí)驗(yàn)也顯示MRSA菌株具有高耐藥性和多重耐藥性，因此臨床治療過程中尤其要注重合理使用抗菌藥物，根據(jù)藥敏試驗(yàn)結(jié)果有針對(duì)性的選用敏感抗菌藥物，掌握用藥時(shí)間、用量，嚴(yán)格掌握經(jīng)驗(yàn)性、預(yù)防性用藥的指征，燒傷病房應(yīng)建立抗菌藥物使用及致病菌耐藥性監(jiān)測制度，以最大限度地減少耐藥菌引起的燒傷病房醫(yī)院感染的發(fā)生。本實(shí)驗(yàn)雖未發(fā)現(xiàn)耐萬古霉素和替考拉寧的MRSA菌株，但國外已報(bào)道檢出了VISA及VRSA，國內(nèi)也已發(fā)現(xiàn)對(duì)萬古霉素敏感性降低的MRSA菌株，且目前對(duì)于這兩類細(xì)菌尚無有效的治療藥物，應(yīng)引起臨床高度重視。

MRSA對(duì)目前臨床上所使用的大多數(shù)抗生素具有高耐藥性和多重耐藥性，其導(dǎo)致的感染治療較困難，死亡率較高。因此，采取有效的流行病學(xué)分型手段監(jiān)測MRSA，分析其來源、分布，對(duì)確定MRSA引起的感染暴發(fā)及其傳播途徑，進(jìn)而采取有效的控制非常必要。目前有很多的分型方法對(duì)院內(nèi)感染病原菌進(jìn)行同源性研究，其中RAPD分型簡便快速，在 耐 甲氧西林金黃色葡萄球菌醫(yī)院感染研究中應(yīng)用較為廣泛[7，8]。本實(shí)驗(yàn)中23株MRSA經(jīng)過RAPD擴(kuò)增，均獲得一定數(shù)量的條帶，條帶數(shù)在1～6之間，分型率達(dá)100%。基因分型結(jié)果提示， 2，5-8，12-19共13株同屬Ⅱ型，是我院的主要流行株，其次是Ⅰ型檢出7株，這是一個(gè)危險(xiǎn)的信號(hào)，說明在本院內(nèi)存在著同源菌的流行趨勢，有引起感染暴發(fā)流行的可能，具體什么原因造成的流行還需進(jìn)一步調(diào)查。因此加強(qiáng)燒傷病房的制度管理，做好消毒隔離、加強(qiáng)感染管理、規(guī)范陪護(hù)及探視制度，加強(qiáng)多重耐藥菌管理制度，加強(qiáng)醫(yī)務(wù)人員手衛(wèi)生等都是預(yù)防、減少M(fèi)RSA在燒傷科病房感染的重要措施。

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