患者血清中含有冷自身抗體的處理方法

摘要：目的 通過100例冷抗體引起血型定型和交叉配型困難，探討臨床輸血科（血庫）規(guī)范操作ABO血型鑒定的重要性。方法 應(yīng)用吸收放散等血型血清學(xué)方法去除致敏在紅細胞表面和血清中的冷自身抗體來進行血型鑒定和交叉配型。結(jié)果 在100例患者血清中， 其中冷抗體的效價1∶32者93例（93%），1∶64者5例（5%），其中2 例患者為高效價冷抗體效價為1∶1024（2%）。結(jié)論 由于我省處于高原地區(qū)受氣候和醫(yī)療條件的制約，為了保證臨床輸血安全，應(yīng)規(guī)范ABO正反定型的鑒定，及時排除冷自身抗體的干擾，減少臨床輸血反應(yīng)的發(fā)生。

關(guān)鍵詞：ABO血型定型；冷抗體；吸收放散試驗

冷抗體多數(shù)為IgM型。冷抗體引發(fā)的自身免疫性疾病常繼發(fā)于肝硬化、淋巴瘤、傳染性單核細胞增多癥、支原體肺炎、多發(fā)性骨髓瘤等疾病。此外，異常升高的血清冷抗體效價可能使血型鑒定及交叉配血困難[1]。筆者在工作中發(fā)現(xiàn)了100例患者血清中含有冷抗體，造成ABO 血型定型時正反定型結(jié)果的不一致及交叉配型困難現(xiàn)象?，F(xiàn)將結(jié)果整理并報告如下。

1資料與方法

1.1一般資料 選取100例冷抗體引起血型定型和交叉配型困難者，正定型所用抗A、抗B、抗AB 和抗Rh（D）及反定型所用A1、B、O 型標(biāo)準(zhǔn)紅細胞均由上海血液中心提供。

1.2方法

1.2.1測定血清冷抗體效價 采集患者靜脈血5 mL，室溫離心處理，分離得患者血清。取患者血清0.5mL經(jīng)生理鹽水稀釋后以1∶1體積比加入經(jīng)3次洗滌的健康人O 型紅細胞制成2%～5%紅細胞懸液室溫下以3400轉(zhuǎn)離心15 s，然后以規(guī)范的操作手法觀察凝集強度，以出現(xiàn)\"1+\"凝集者為冷抗體效價的終點。

1.2.2冷抗體去除 將冷抗體效價≤1：64樣本的正反定型和自身對照管放置在37℃的水浴中10min，立即離心觀察結(jié)果，此時血型正反定型相符，自身對照管凝集消失，可以證明所檢測血型排除了冷抗體的影響。將冷抗體效價為1：1024的正反定型和自身對照試管放入37℃的水浴箱10 min后，離心觀察結(jié)果，正反定型結(jié)果不一致，自身對照管凝集強度減弱但不消失，將效價為1∶1024的血清取健康人O型紅細胞2 mL（細胞已用生理鹽水洗滌3次且最后一次洗滌后用吸水紙除去多于上清液），健康人O型紅細胞與患者血清（血漿）等量混合后置于4℃冰箱使其充分吸收2 h后3000轉(zhuǎn)離心5 min，取上清液進行交叉配血試驗、反定型和不規(guī)則抗體篩選，若一次吸收不完全影響實驗結(jié)果可重復(fù)吸收一次[2]。

1.2.3制備2%～5%患者紅細胞懸液：將生理鹽水置于37℃水浴中共浴20～30 min，待其溫度達到37℃后取5mL加入試管中并加入高效價冷抗體患者的紅細胞0.5 mL混勻，3000轉(zhuǎn)離心5 min棄上清收集沉淀，洗滌3～5次，用生理鹽水將其紅細胞配制成2%～5%的紅細胞懸液，加入吸收后的血清離心觀察凝集情況，無凝集可用作ABO 血型正定型、Rh 血型鑒定和交叉配血試驗。

2結(jié)果

在100例患者中，其中將冷抗體效價≤1∶64的93例患者的正反定型和自身對照管放置在37℃水浴箱5min后離心觀察結(jié)果，正反定型結(jié)果一致，自身對照管凝集消失，另外2例患者冷抗體效價為1∶1024的患者的正反定型和自身對照試管置37℃水浴箱10 min后離心觀察結(jié)果，凝集不消失，使用經(jīng)37℃生理鹽水放散后的紅細胞懸液和經(jīng)冷抗體吸收后的患者血清進行血型鑒定時，ABO正定型與反定型的結(jié)果一致。

3討論

冷抗體是一種自身抗體， 一般人群血清中冷抗體效價≤1∶16，對血型鑒定結(jié)果沒有影響[3]，但在某些病理情況下， 高效價冷抗體在37℃仍然具有較強凝聚力可能會引發(fā)血型定型不準(zhǔn)確或者交叉配型困難從而影響輸血安全。通過對273例實驗結(jié)果進行分析發(fā)現(xiàn)，伴隨溫度的升高，冷抗體的凝集能力會隨之下降。對于低效價冷抗體，當(dāng)溫度達到37℃時，其凝集活性幾乎完全消失，不會對血型定型造成影響；與低效價冷抗體不同，高效價冷抗體的凝集力在溫度達到37℃時仍處于較強狀態(tài)，容易引發(fā)血型定型不準(zhǔn)確或者交叉配型困難。

由于我省處于青藏高原低區(qū)，受當(dāng)?shù)貧夂驐l件的和醫(yī)療條件的影響，臨床血庫在進行血型鑒定和交叉配型時經(jīng)常會受到冷凝集素的干擾導(dǎo)致血型誤判和交叉配型困難，筆者建議如果我們在鑒定血型和交叉配型中觀察到ABO血型的正反定型不一致，并且血清的抗體篩選試驗出現(xiàn)凝集顆粒，此時加做自身對照，離心后判定結(jié)果，自身對照不凝集排除是由冷自身抗體引起，考慮由其它因素影響判定，需進一步鑒定，若自身對照凝集，證明患者血清中含有冷自身抗體，將正反定型和自身對照試管全部放入37℃水浴箱孵育3～5 min后立即離心判定，凝集消失，說明此患者血清中含有低效價冷自身抗體，正反定型和交叉配型均在37℃水浴箱中進行。若凝集減弱但不消失，需進行吸收和放散實驗，用放散后的細胞和吸收后的血清進行交叉配血試驗。在對冷抗體效價較高或者自身抗體中含有抗I的病例進行輸血時對患者自身要注意保暖[4]；此外注意對待輸血液的預(yù)熱處理保證血液溫度在37℃；如有條件給患者輸注洗滌過的RBC效果最好；在輸血過程中要注意輸血速度不宜過快；最后，在整個輸血過程中要密切觀察以確保輸血安全。

參考文獻：

[1]杜麗欣，李鳳蓮，李書清，等.IgM型抗N抗體導(dǎo)致交叉配血不合一例分析[J].檢驗醫(yī)學(xué)，2010，25（1）：80-80.

[2]呂先萍.實用臨床輸血技術(shù).[M].2011年4月第1版.鄭州大學(xué)出版社，2011.237.978-7-81106-906-8.

[3]侯治兵.IgM抗-E抗體伴冷自身抗體致配血困難1例[J].國際檢驗醫(yī)學(xué)雜志，2008，29（1）：96-96.

[4]薛麗，謝波，劉嫦瑛，等.冷自身抗體伴抗-Leb致配血不合1例[J].中國輸血雜志，2011，24（1）：69-70.

編輯/張燕