HIF—1α和VEGF在稽留流產患者血清和絨毛中的表達及二者的相關性分析

摘要：目的 研究HIF-1α和VEGF在稽留流產患者血清和絨毛中的表達及二者的相關性分析。方法 從2013年2月～9月共有72例經B超檢查后確診為稽留流產的早孕孕婦于我院進行治療。將這72例患者定為觀察組。另外，以數(shù)字法隨機抽取72例正常早孕的孕婦作為對照組進行比較。對兩組早孕孕婦分別運用酶聯(lián)免疫法（ELISA）檢測其HIF-1α和VEGF在血清里的濃度情況，并記錄下來，進行比較；其次，運用免疫組織化學方法分別檢測兩組孕婦體內HIF-1α和VEGF在絨毛中的表達以及含量，并記錄下來進行比較；最后根據(jù)兩表數(shù)據(jù)分析其相關性，并記錄下來。結果 經研究比較，通過酶聯(lián)免疫法（ELISA）檢測出觀察組中HIF-1α的濃度為（353.8±108.6）ng/L，VEGF的濃度為（30.7±6.2）ng/L。這一結果顯著低于對照組的（426.5±135.2）ng/L，（58.3±46.5）ng/L，差異均有統(tǒng)計學意義（均P<0.05）。其次，通過對比發(fā)現(xiàn)，用免疫組織化學方法分別對兩組孕婦檢測后得出，觀察組早孕孕婦絨毛中的HIF-1α濃度水平為（3.5±2.2）ng/L，VEGF在絨毛中的濃度水平為（3.4±2.0）ng/L。這一結果依然顯著低于對照組的（6.4±3.0）ng/L，（7.0±4.0）ng/L，差異均有統(tǒng)計學意義（均P<0.05）。最后，根據(jù)記錄的數(shù)據(jù)，按照Pearson相關分析法分析后可知，相關性為（--）的有8例，相關性為（-+）的有20例，相關性為（+-）的有18例，相關性為（++）的有26例。差異均有統(tǒng)計學意義（均P<0.05）。這一結果表明在同一病例體內，HIF-1α和VEGF的表達具有正相關性，說明隨著HIF-1α表達的減少，VEGF的表達也逐漸減少。結論 HIF-1α和VEGF在血清和絨毛中的低表達以及其相關性可能是導致稽留流產的主要原因。

關鍵詞：HIF-1α；VEGF；稽留流產；血清和絨毛；表達；相關性分析

根據(jù)調查顯示，流產發(fā)生的概率越來越高。一方面，一部分母親不愿意孩子出生而選擇人工的流產；另一方面，則是由于種種意外而導致了流產的發(fā)生[1]?；袅鳟a就是其中一種特殊的流產形式。醫(yī)學界將其稱為過期流產或者流產不下，這是因為稽留流產是指那些胎兒已經死亡，但是沒能夠正常脫落并排除體外的流產情況，這就使醫(yī)學界規(guī)定凡是胚胎在母親腹中兩個月及以上時間停止發(fā)育，則可判定為稽留流產。然而研究顯示[2]，HIF-1α和VEGF這兩種因子的表達以及其相關性會對稽留流產的產生形成極大的影響。本文就HIF-1α和VEGF在血清以及絨毛中的表達及其相關性進行了研究，結論展示如下

1 資料與方法

1.1一般資料 從2013年2月～9月論理學會批準，簽訂知情同意書，于我院共有72例早孕孕婦被診斷出稽留流產。將這72例早孕孕婦視為觀察組，她們的年齡分布為16～32歲，平均年齡（24.5±2.3）歲，孕周為（6.6±2.5）w；另外以數(shù)字法隨機選取于我院治療的正常早孕孕婦72例作為對照組，她們的年齡分布為18～33歲，平均年齡為（26.8±1.8）歲，孕周為（7.2±1.8）w。兩組在年齡以及懷孕情況等方面比較，差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05）。具有可比性。

1.2方法

1.2.1酶聯(lián)免疫法 首先讓血清先凝聚至少30min，之后將血清取出，運用酶稀釋液讓酶復合物進行充分的稀釋后，加入血清以及陰性陽性的對照物，并加入質控品進行調控。1h后再進行洗版操作，再過30min，即可加入終止液完成反應部分。讀出數(shù)據(jù)并記錄下來。

1.2.2免疫組化sp法 選取適當?shù)牟牧虾?，用石蠟包埋，制成厚度?～5μm的切片，石蠟切片水化后，用PBS試液沖洗3次，5min/次。之后，修復相應所需的抗體，并且滴加一滴過氧化酶阻斷溶液，阻斷其活性。重復操作后，每張切片加1～2滴新鮮配制的DAB溶液，在顯微鏡下掌握好其顯色的時間，再用自來水沖洗之后進行觀察。

1.3結果判斷[3] 根據(jù)試劑盒中所給的對照數(shù)據(jù)標準，將顯微鏡下所觀察到的數(shù)據(jù)顏色進行比對，確定其顯色范圍，記錄結果。

1.4統(tǒng)計學方法 以SPSS13.0軟件分析。數(shù)據(jù)比較以χ2檢驗。計量數(shù)據(jù)以t檢驗。P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結果

2.1兩組孕婦HIF-1α和VEGF在血清中的濃度比較經過研究比較，通過酶聯(lián)免疫法（ELISA）檢測出觀察組中HIF-1α的濃度為（353.8±108.6）ng/L，VEGF的濃度為（30.7±6.2）ng/L。這一結果顯著低于對照組的（426.5±135.2）ng/L，（58.3±46.5）ng/L，差異均有統(tǒng)計學意義（均P<0.05）。這一結果說明HIF-1α和VEGF的濃度在稽留流產孕婦的血清中表達的較少，提示其可能是導致稽留流產的主要原因，見表1。

2.2兩組孕婦HIF-1α和VEGF在絨毛中的濃度情況比較通過對比發(fā)現(xiàn)，用免疫組織化學方法分別對兩組孕婦檢測后得出，觀察組早孕孕婦絨毛中的HIF-1α濃度水平為（3.5±2.2）ng/L，VEGF在絨毛中的濃度水平為（3.4±2.0）ng/L。這一結果依然顯著低于對照組的（6.4±3.0）ng/L，（7.0±4.0）ng/L，差異均有統(tǒng)計學意義（均P<0.05）。說明了正常早孕孕婦的絨毛中HIF-1α和VEGF的表達水平顯著高于稽留流產孕婦，見表2。

2.3稽留流產孕婦HIF-1α和VEGF在血清和絨毛中的相關性分析根據(jù)記錄的數(shù)據(jù)，按照Pearson相關分析法分析后可知，相關性為（--）的有8例，相關性為（-+）的有20例，相關性為（+-）的有18例，相關性為（++）的有26例。差異均有統(tǒng)計學意義（均P<0.05）。這一結果表明在同一病例體內，HIF-1α和VEGF的表達具有正相關性，說明隨著HIF-1α表達的減少，VEGF的表達也逐漸減少。見表3。

3 討論

隨著時代的變遷，懷孕的年齡在一步步的降低著。正常的受孕年齡被不斷拉低后，各種危及孕婦以及胎兒的疾病也逐漸產生[4-5]?；袅鳟a就是其中一種比較特殊的流產形式。對于稽留流產，近年來的研究顯示[6-7]，HIF-1α和VEGF這兩種因子對其發(fā)生有著顯著地控制作用，它們之間的相關性表達致使其含量產生連帶的降低，正是這種低表達率導致了稽留流產的發(fā)生。而就目前國內外研究來看[8-9]，VEGF作為HIF-1α的靶基因，極大的受到了HIF-1α的牽制。

本文通過對比稽留流產孕婦以及正常早孕孕婦體內HIF-1α和VEGF在血清和絨毛中的表達與相關性，得出了一些結論。經過研究發(fā)現(xiàn)，觀察組的孕婦血清內HIF-1α和VEGF的含量要顯著低于正常對照的孕婦，這一結果與薛英杰的研究結果相一致[10]，表明了HIF-1α和VEGF在血清中的低含量使稽留流產發(fā)生的概率大大的增加；其次，通過實驗對比發(fā)現(xiàn)，用免疫組織化學sp方法分別對兩組孕婦檢測后得出，觀察組早孕孕婦絨毛中的HIF-1α濃度水平為（3.5±2.2）ng/L，VEGF在絨毛中的濃度水平為（3.4±2.0）ng/L。這一結果依然顯著低于對照組的（6.4±3.0）ng/L，（7.0±4.0）ng/L，這一結果符合冉鳳明的研究數(shù)據(jù)[11]，提示HIF-1α和VEGF在絨毛中的低表達率也是其成為元兇的原因之一。最后，經過計算驗證，得出的結果是HIF-1α和VEGF的表達在血清中呈正相關，在絨毛中的表達也呈正相關，由于HIF-1α和VEGF之間的正相關性，導致它們的表達一增都增，一降都降，也正是由于HIF-1α和VEGF在血清以及絨毛中的低表達才導致了稽留流產的高發(fā)生率。

綜上所述，HIF-1α和VEGF在血清和絨毛中的表達過低以及其正相關性即是產生稽留流產的主要原因，這一結果值得深入研究，以對于這一流產方式進行及時的救治與防范。

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