艾滋病檢測技術(shù)的研究進展

目前全球范圍內(nèi)對艾滋病的防治一直保持高度重視的態(tài)度，對疾病的蔓延程度持續(xù)嚴密監(jiān)控，對于艾滋病毒的檢測有了長足的發(fā)展，多種新型的實驗室檢測方法不斷涌現(xiàn)，新一代的檢測技術(shù)在其靈敏度和特異性上均有很大程度的提高，現(xiàn)將艾滋病檢測技術(shù)的最新研究進展作一綜述。

人類免疫缺陷病毒（human immunodeficiency virus， HIV）是引發(fā)獲得性免疫缺陷綜合征（acquired immunodeficiency syndrome， AIDS）即艾滋病的病原體，其臨床的主要特征為細胞免疫缺陷，患者多發(fā)致死性感染疾病。目前，患有該病的患者無法完全治愈，也沒有明確的疫苗可以進行預防，該病流行較快，且由于并發(fā)多種致死性感染疾病，其病死率極高，嚴重威脅人類健康。目前，鑒于全球范圍內(nèi)對艾滋病的防治給予極高度的重視，促進了艾滋病的實驗室檢測技術(shù)的不斷革新與飛速發(fā)展，新型的艾滋病毒檢測方法在特異性和敏感性上均有很大的提升，現(xiàn)如今的發(fā)展方向是更加快速、簡易、可靠，來符合大規(guī)模篩選的需求，這對阻止艾滋病的快速傳播具有重要意義。

1 抗體檢測技術(shù)

臨床上最為有效的檢測方法為HIV抗體檢測，通常HIV抗體陽性會在患者感染HIV 4周后顯現(xiàn)，然后迅速蔓延至全身，所以HIV抗體檢測是一項重要的感染指標[1，2]。目前臨床上應(yīng)用較多的為雙抗原夾心法，具有極高的特異性和靈敏性。HIV抗體檢測的初篩最為經(jīng)典的為免疫吸附試驗（ELISA），目前國內(nèi)外廣泛使用的主要為第3代試劑，主要以血源篩查。國際上在一些國家和地區(qū)已經(jīng)開始使用第4代試劑，與第3代試劑相比，其檢出的時間、窗口期更短，并且能夠同時對多種抗原抗體進行檢測，加大了篩查力度，在早期診斷的效果要明顯好于第3代[3]。盡管第4代試劑性能優(yōu)良，但其檢測仍存在2～3周的窗口期，而且其敏感度和特異性仍然需要大量的臨床試驗進行評估，此外，所有ELISA檢測方法的最大缺點為可能有假陽性結(jié)果的出現(xiàn)，所以僅限于初期篩查，還需要確證實驗加以輔助。

目前國際上公認的最為有效的確證實驗為免疫試驗（WB），我國的臨床檢測規(guī)定具體如下：①HIV陽性：至少有2條env帶或至少1條env帶以及p24同時出現(xiàn)；②HIV陰性：沒有任何特異性的條帶；③HIV不確定：出現(xiàn)條帶但不滿足陽性條件[4]。WB實驗操作更為復雜，其成本也更高，而且必須在分子生物學實驗室中完成，雖然仍然會有假陽性以及其他抗體的干擾，但WB檢測依然是目前世界上公認的最為常用的確認試驗。

2 病毒檢測研究進展

2.1 核酸檢測 隨著分子生物學方法的不斷革新，核酸檢測逐漸受到人們的重視并成為了抗原抗體檢測方法的很好的補充。該技術(shù)可以進行單個抗原的檢測并且具有極高的靈敏度和特異性。聚合酶鏈反應(yīng)試驗（PCR），其具體原理為對一段指定的DNA序列進行放大，在幾個小時的加熱處理后，DNA變性、退火可以穩(wěn)定的放大到3kb左右，被放大的序列轉(zhuǎn)移到尼龍膜或硝酸纖維膜上，再與特異性的探針進行結(jié)合完成檢測。應(yīng)用PCR檢測技術(shù)可以在患者出現(xiàn)HIV感染的癥狀前，從其血清中檢測出含有HIV基因的特異性片段，也可以在出現(xiàn)HIV疑似癥狀的患者的外周血白細胞中檢測來進行確證[5]。

2.2 病毒培養(yǎng) 病毒檢測是所有方法中最為精確的方法，通常采用對單個核細胞（PBMC）進行體外培養(yǎng)然后進行HIV診斷。該方法具有極強的專一性，極少出現(xiàn)假陽性，對于母親陽性的新生兒是否感染HIV以及經(jīng)抗原抗體加成呢不確定的患者的診斷具有重要意義。但該方法的應(yīng)用前提為需要有一定數(shù)量的感染細胞，并經(jīng)過長時間培養(yǎng)后才能分離病毒，敏感性差，實驗周期長，操作較為復雜，培養(yǎng)環(huán)境要求較高，且檢測費用昂貴，臨床檢測不適用，更適合于科研。

綜上所述，艾滋病的臨床診斷要求檢測方法具有較高的靈敏度和特異性，綜合應(yīng)用不同方法有助于與患者的早期診斷，防止漏診誤診的發(fā)生，可以更好的對艾滋病治療藥物的療效評價，是治療艾滋病的關(guān)鍵。

參考文獻：

[1]張永剛，季 陽，賈桂芳.HIV 抗體ELISA陽性標本蛋白印跡試驗研究[J].中國性病艾滋病防治.1997，3（2）：81.

[2]許文燕摘譯，邢文革審校.六種HIVp24抗原和HIV抗體聯(lián)合檢測試劑的敏感度和特異度評估[J].艾滋病檢測實驗室網(wǎng)絡(luò)通信，2006，1（1）：23.

[3]周惠瓊，曾書炎，江立敏.HIV-1 抗體蛋白印跡試驗帶型分析[J].中國性病艾滋病防治，1997，3（5）：223.

[4]王 紅，何少蓉，莫志宏.艾滋病核酸檢測方法研究進展[J].中華醫(yī)學研究雜志.2004，4（7）：7.

[5]馮基剛，蔣 巖，肖 瑤.檢測HIV早期感染的血清學方法[J].中華實驗和臨床病毒學雜志，2006，20：83-85.

編輯/王海靜