髓樣細(xì)胞表達(dá)的觸發(fā)因子受體-1的研究現(xiàn)狀及臨床應(yīng)用

髓樣細(xì)胞表達(dá)的觸發(fā)因子受體-1（triggering receptors expressed on myeloid cells-1，TREM-1）分子是Bouchon[1]等于2000年首次確認(rèn)的一種與炎癥級聯(lián)放大密切相關(guān)的免疫球蛋白超家族中的一員，其主要表達(dá)于髓系細(xì)胞如中性粒細(xì)胞、CD14+單核/巨噬細(xì)胞的表面。多種細(xì)菌成分、創(chuàng)傷等均能使TREM-1分子的表達(dá)上調(diào)，并能與TREM-1分子的內(nèi)源性配體一起激活其受體，促進炎癥反應(yīng)細(xì)胞因子和趨化因子的釋放，放大炎癥反應(yīng)。最近發(fā)現(xiàn)還存在TREM-1分子的可溶性形式（sTREM-1），其是由金屬蛋白酶（MMPs）使細(xì)胞膜上的TREM-1分子外功能區(qū)脫落而形成的[1]，sTREM-1分子與多種炎癥性疾病密切相關(guān)，同反應(yīng)炎癥的其它指標(biāo)相比具有明顯的優(yōu)越性，可作為炎癥性疾病的早期診斷和預(yù)后判斷的新指標(biāo)。

1TREM-1分子的分子結(jié)構(gòu)和分子生物學(xué)特征

1.1 TREM-1分子的分子結(jié)構(gòu)目前，研究發(fā)現(xiàn)，TREM包括三個激活受體分別為TREM-1、TREM-2以及TREM-3和一個抑制受體TLT-1（TREM like transcript-1）。研究證實，TREM-1參與并放大炎癥反應(yīng)；TREM-2能活化單核細(xì)胞來源的樹突狀細(xì)胞，并調(diào)節(jié)破骨細(xì)胞的成熟，TREM-2的缺失已證實與嚴(yán)重的常染色體疾病Nas-Hakola?。∟HD）密切相關(guān)。關(guān)于TLT-1的研究有兩種[2]，有的認(rèn)為TLT-1是抑制性受體，稱其為TREM-1的類似轉(zhuǎn)錄子，其與TREM-1有高度同源性，在細(xì)胞表達(dá)上也與TREM-1一致，起調(diào)節(jié)同一家族激活受體的作用。

1.2 TREM-1分子的活化機制及生物學(xué)功能通過給予對抗性的多肽阻斷TREM-1分子，能明顯的緩解大腸炎小鼠模型的臨床病程和組織病理學(xué)變化。說明TREM-1分子不僅參與且放大急性炎癥性疾病，而且在慢性炎癥性疾病中也起作用。在患有非小細(xì)胞肺癌的患者的腫瘤組織中，癌細(xì)胞能直接的上調(diào)腫瘤相關(guān)性巨噬細(xì)胞上的TREM-1分子表達(dá)增加，且其表達(dá)水平的升高與腫瘤的復(fù)發(fā)率和存活率相關(guān)。但TREM-1分子在腫瘤的演進過程中的確切機制還未闡明，還需進一步深入研究證實。

1.3 TREM-1分子的細(xì)胞內(nèi)信號轉(zhuǎn)導(dǎo)機制目前，比較認(rèn)可的TREM-1分子與其未知配體結(jié)合激活后，其活化信號向細(xì)胞內(nèi)傳導(dǎo)的過程中DAP12扮演了極其重要的角色。DAP12(DNAX activation protein of 12×103)分子，是C型凝集素超家族的成員，含有一個免疫受體酪氨酸活化基序（immunoreceptor tyrosine-based activation motif，ITAM），主要表達(dá)在NK細(xì)胞、單核細(xì)胞、樹突細(xì)胞和巨噬細(xì)胞表面的跨膜銜接蛋白。TREM-1分子活化后還可以激活絲裂原活化蛋白激酶（MAPK）信號途徑，使轉(zhuǎn)錄因子Creb-1、NFAT、AP-1和NF-κB活化且水平升高，轉(zhuǎn)錄編碼促炎因子和細(xì)胞表面分子的基因，導(dǎo)致促炎細(xì)胞因子的分泌和釋放增加。另外，PI3K和ERK途徑能使BAD、BID和BAX等促凋亡因子失活，進而促進線粒體的完整性并且延長細(xì)胞壽命。

1.4TREM-1分子與Toll樣受體的關(guān)系最早被發(fā)現(xiàn)的Toll家族成員為果蠅Toll蛋白，它是蠅胚胎發(fā)育中控制背腹側(cè)極性的信號通路組成之一[3]?，F(xiàn)在認(rèn)為許多種Toll樣受體（TLRs）與針對多種微生物病原體相關(guān)模式（PAMPs）的先天免疫應(yīng)答有關(guān)。最早發(fā)現(xiàn)的人TLR分子目前稱為TLR4分子，是針對最常見的PAMP脂多糖（LPS）應(yīng)答的主要成分。大量的研究已經(jīng)證實，TREM-1分子的活化效應(yīng)需要其天然配體與TLR配體的協(xié)同作用來實現(xiàn)，而且其中TLR4分子的配體LPS的作用又最強。TLR4基因敲除小鼠對LPS幾乎無應(yīng)答，且對內(nèi)毒素性休克高度耐受。生化研究進一步證實TLR4為LPS受體的組分之一[4]。目前對TLR4及其相關(guān)蛋白的研究比較公認(rèn)的是：TLR4為一種穿膜多肽，以同二聚體形式存在于胞漿膜。TLR4多肽的胞外部分與膜上的CD14和分泌型蛋白MD2有聯(lián)系。

1.5TREM-1分子配體的研究TREM-1分子在嚴(yán)重的感染和膿毒血癥的先天性免疫應(yīng)答中起重要的作用。干予調(diào)節(jié)TREM-1分子的激活水平可以改善嚙齒類動物模型的肺炎和膿毒血癥的結(jié)局。然而，TREM-1分子的天然配體到目前為止還沒有被明確和發(fā)現(xiàn)，這使得其受體的生物學(xué)特性的深入研究受到很大的影響。Radaev等人對人TREM-1分子的晶體結(jié)構(gòu)進行分析，認(rèn)為TREM-1分子可能含有2個不同的、分離的配體結(jié)合位點。提示TREM-1分子的活化需要其自身配體和TLR配體的協(xié)同作用。用一種重組體TREM-1分子融合蛋白，Haselmayer等人證實TREM-1分子特異性的結(jié)合到血小板上[5]。TREM-1分子的特異性信號必需為血小板誘導(dǎo)的多形核細(xì)胞效應(yīng)子作用（LPS刺激下）。然而，TREM-1分子與其配體的相互作用則不需要血小板、多形核白細(xì)胞復(fù)合物形成體，它是依賴于細(xì)胞黏附分子和選擇蛋白。因此，進一步證實TREM-1分子的內(nèi)源性配體表達(dá)于血小板的表面，并且TREM-1分子及其配體的相互作用促進了LPS誘導(dǎo)的多形核白細(xì)胞激活。這為我們更深一步了解TREM-1分子和它在感染的先天性免疫應(yīng)答中的作用提供了新的思路。

2可溶性的TREM-1分子的生物學(xué)特征：

最近有兩種關(guān)于sTREM-1分子來源的解釋：轉(zhuǎn)錄翻譯的TREM-1分子-mRNA剪切變體和成熟細(xì)胞表面TREM-1分子的蛋白水解分裂脫落而成。大量數(shù)據(jù)證實，后者可能為TREM-1分子的真正來源，其可溶性的受體形式通過TREM-1分子特有的蛋白水解作用形成。例如，對以往的資料進行仔細(xì)分析發(fā)現(xiàn)，檢測出現(xiàn)的sTREM-1分子水平與細(xì)胞表面表達(dá)下降的TREM-1分子的水平相同。檢測LPS 誘導(dǎo)刺激的條件下，人外周血sTREM-1分子的水平，發(fā)現(xiàn)LPS刺激后6h內(nèi)sTREM-1分子的濃度達(dá)到一個峰值，然后其水平逐漸降低。在臨床研究中發(fā)現(xiàn)，敗血癥的患者，在可以明確診斷的前兩天，sTREM-1分子的水平已經(jīng)達(dá)到非常高的濃度。此外，檢測肺炎患者的支氣管肺泡分泌物，以及重度膿毒血癥患者早期的外周血，以上兩者均可觀察到sTREM-1分子濃度明顯升高，而在敗血癥恢復(fù)期，sTREM-1分子的濃度是逐漸降低的。Gomez等人則進一步解釋了這種現(xiàn)象，是金屬蛋白酶能通過其較長的近膜接頭，以蛋白水解性裂解的方式，使細(xì)胞膜上TREM-1分子的外功能區(qū)從細(xì)胞上脫落。說明LPS作用于髓樣細(xì)胞以后，通過一種轉(zhuǎn)錄機制使膜上的TREM-1分子的表達(dá)水平增加[6]，進而金屬蛋白酶的活性增強，使得細(xì)胞膜上表達(dá)的TREM-1分子的胞外功能區(qū)脫落，形成sTREM-1分子，sTREM-1分子的水平逐漸升高，并且與感染性炎癥的程度呈正相關(guān)，說明sTREM-1分子是反應(yīng)炎癥早期階段的一個敏感指標(biāo)，同時也可作為炎癥性疾病診斷和預(yù)后判斷的可靠指標(biāo)。

Gibot等人還發(fā)現(xiàn)sTREM-1分子能抑制促炎癥性細(xì)胞因子的產(chǎn)生，且下調(diào)炎性細(xì)胞因子的有害作用，對膿毒血癥動物模型有保護作用，其作用機制可能為，sTREM-1分子競爭性的結(jié)合了TREM-1分子的天然配體，從而阻斷了細(xì)胞膜上TREM-1分子信號的傳導(dǎo)。因此，sTREM-1分子的存在及其在血漿中的水平的變化，可能是機體在炎癥反應(yīng)中一種自我保護和調(diào)節(jié)機制。

3 問題與展望

近年來，對于TREM-1的信號傳導(dǎo)機制和其在炎癥反應(yīng)中所發(fā)揮的作用有了更加深入的認(rèn)識。提示TREM-1可能為抗炎治療的關(guān)鍵靶分子，且可作為炎癥的早期診斷和預(yù)后判斷的重要指標(biāo)。然而，迄今未知TREM-1的天然配體還未明確，TREM-1與TLR4的關(guān)系還有待進一步研究；sTREM-1的精確結(jié)構(gòu)和作用尚未完全明確；TREM-1是否機體的其它免疫反應(yīng)如自身免疫性疾病、腫瘤免疫反應(yīng)、移植排斥、病毒感染等疾病。隨著越來越多的學(xué)者對TREM-1分子的關(guān)注和研究手段的進步，相信上述問題會被一一破解。

參考文獻(xiàn)：

[1]Bouchon A， Dietrich J， Colonna M. Cutting edge: inflammatory respo nses can be triggered by TREM-1， a novel receptor expressed on neutr ophils and monocytes[J].Immunol，2000，164（10）:4991-4995.

[2]Gómez PV，Soares SA，Rodríguez RA，et al.Metalloproteinases shed TREM-1 ectodomain from lipopolysaccharide-stimulated human mono cytes[J].Immunol，2007，179（6）：4065-4073.

[3]Bouchon A， Hernandez-Munain C， Cella M， et al. ADAP12 -mediated pathway regulates expression of CC chemokine receptor 7 and maturation of human dendritic cells[J]. Exp Med，2001，194 (8) :1111–1122.

[4]Washington AV，Quigley L，McVicar DW. Initial characterization of TREM-like transcript (TLT)-1：A putative inhibitory receptor within the TREM cluster[J].Blood，2002，100(10)：3822-3824.

[5]Washington AV，Schubert RL，Quigley L，et al.A TREM family member，TLT-1，is found exclusively in the alpha-granules of megakaryocytes and platelets[J].Blood，2004，104(4):1042 -1047.

[6]Gibot S.TREM，new receptors mediating innate immunity[J]. Med Sci，2004，20(5)：503-505.編輯/蘇小梅