抗內(nèi)皮細(xì)胞抗體檢測在診斷血管炎中的應(yīng)用分析

摘要：目的探究在系統(tǒng)性血管炎臨床診斷中抗內(nèi)皮細(xì)胞抗體（AECA）檢測的應(yīng)用意義。方法回顧性分析2011年12月~2013年12月我院收治的87例系統(tǒng)性血管炎患者，運用細(xì)胞酶聯(lián)免疫吸附試驗法檢測患者血清中AECA的水平；同時取87例正常人作為對照組，同樣進(jìn)行上述的血液生化檢查，將兩組檢測結(jié)果進(jìn)行對比分析。結(jié)果系統(tǒng)性血管炎組患者血清AECA陽性率明顯高于正常人組，兩組之間的數(shù)據(jù)差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。結(jié)論系統(tǒng)性血管炎患者普遍存在血清AECA表達(dá)陽性，因此AECA檢測對于血管炎的臨床診斷具有較高的敏感性。

關(guān)鍵詞：抗內(nèi)皮細(xì)胞抗體（AECA）；系統(tǒng)性血管炎；診斷

血管內(nèi)皮細(xì)胞表面存在很多抗原分子，抗內(nèi)皮細(xì)胞抗體可通過與內(nèi)皮細(xì)胞表面相應(yīng)的抗原結(jié)合，引起相關(guān)免疫反應(yīng)，造成血管管壁的損傷，引發(fā)炎癥反應(yīng)[1]。AECA作為一種血清生化檢測指標(biāo)，廣泛應(yīng)用于免疫介導(dǎo)的血管損傷相關(guān)的機(jī)體疾病。本研究通過檢測系統(tǒng)性血管炎患者血清AECA陽性率分析AECA檢測對于血管炎診斷敏感性的高低，現(xiàn)匯報如下：

1資料與方法

1.1一般資料選擇自2011年12月~2013年12月于我院風(fēng)濕免疫科就診的87例系統(tǒng)性血管炎患者作為研究對象，疾病診斷均符合1990年美國風(fēng)濕病學(xué)會系統(tǒng)性血管炎的診治分類標(biāo)準(zhǔn)，見表1。所有患者作為一組，其中男58例，女29例，年齡28~75歲，平均年齡（37.4±2.6）歲，同時取87例正常人（未患免疫相關(guān)性疾病）作為對照組，男56例，女31例，年齡32~74歲，平均年齡（38.4±2.3）歲。此項研究已獲得本單位倫理委員會的論證批準(zhǔn)，同時所有受試者均由本人或其家屬簽署知情同意書。

1.2方法[2]具體試驗步驟：第一步，在體外進(jìn)行人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞的分離和培養(yǎng)，對于培養(yǎng)得到的內(nèi)皮細(xì)胞的特性需進(jìn)行堅定，方法為經(jīng)人Ⅷ因子相關(guān)抗原免疫組織化學(xué)染色法；第二步，將通過不同臍帶分離培養(yǎng)得到的1~2代內(nèi)皮細(xì)胞經(jīng)細(xì)胞酶聯(lián)免疫吸附試驗法進(jìn)行混合培養(yǎng)，在其分裂增殖成單層后再種植于96孔細(xì)胞培養(yǎng)板，采用37℃、5％CO2環(huán)境進(jìn)行孵育；第三步，在內(nèi)皮細(xì)胞再次分裂增殖成單層，用磷酸鹽緩沖液(PBS)沖洗3次，再用0.2％戊二醛和0.5％Triton-X-100固定15 min；2％牛血清白蛋白(BSA)37℃封閉2h；加入1：50待測血清37℃、2h；第四步，加入1：3000稀釋的辣根酶標(biāo)羊抗人IgG二抗(Sigma公司)37℃、1h；3，3'，5，5'-四甲基聯(lián)苯胺(TMB)顯色(Sigma公司)，終止，讀數(shù)。

1.3觀察指標(biāo)[3]兩組患者血清生化檢測結(jié)果中AECA的陽性率。

1.4統(tǒng)計學(xué)方法應(yīng)用SPSS 18.0 軟件進(jìn)行統(tǒng)計分析。結(jié)果以標(biāo)準(zhǔn)差(x±s)，算術(shù)平均數(shù)±形式表示，計量資料進(jìn)行t檢驗，計數(shù)資料應(yīng)用χ2檢驗，P<0.05時差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2結(jié)果

87例患者中，血清AECA陽性例數(shù)58例，陽性率達(dá)66.67%；87例正常人中，血清AECA陽性例數(shù)3例，陽性率為3.45%，兩組之間的數(shù)據(jù)差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（χ2=76.3601，P<0.05）；各病種間的數(shù)據(jù)差異不顯著，沒有統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05），見表2。

3討論

系統(tǒng)性血管炎是一類由于血管管壁發(fā)生炎癥反應(yīng)而出現(xiàn)血管的損傷，如纖維素滲出沉積、膠原纖維玻璃樣變性、血管內(nèi)皮細(xì)胞變性壞死等特征的臨床綜合征。系統(tǒng)性血管炎按發(fā)病原因分為原發(fā)性血管炎和繼發(fā)性血管炎，前者包括變應(yīng)性肉芽腫血管炎、結(jié)節(jié)性多動脈炎、韋格納肉芽腫病、顯微鏡下多動脈炎、大動脈炎等，后者包括系統(tǒng)性紅斑狼瘡、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎皮肌炎有肺部病發(fā)癥等。血管管壁發(fā)生炎癥主要表現(xiàn)為炎性細(xì)胞的浸潤、內(nèi)皮細(xì)胞的變性壞死、血管管壁通透性增大等。血管炎的發(fā)生機(jī)制存在多種學(xué)說，其中內(nèi)皮細(xì)胞的受損一直是國內(nèi)外學(xué)者研究血管炎發(fā)生機(jī)制的熱點問題，同時AECA的存在可能與內(nèi)皮細(xì)胞的受損擁有相關(guān)性；在實際臨床工作中，也發(fā)現(xiàn)在系統(tǒng)性血管炎患者的血清中檢測到AECA的存在[4]。

抗內(nèi)皮細(xì)胞抗體(AECA)是一類可以與存在于內(nèi)皮細(xì)胞多種分子蛋白相互結(jié)合的非同質(zhì)性自身免疫性抗體，它的抗原分子為表達(dá)于血管內(nèi)皮細(xì)胞表面或吸附于其上的一些蛋白分子，同時這些抗原分子會因患者以及所患疾病的不同而表現(xiàn)出一定的特異性，當(dāng)然這些抗原分子中會存在一些針對某個或某類疾病相關(guān)的特定抗原， AECA在不同的自身免疫性疾病中也可能具有不同的致病作用，即是，AECA在不同的疾病中具有不同的異質(zhì)性，而這種異質(zhì)性的存在也為其用于不同疾病的診斷提供了可能。AECA還可以與血管內(nèi)皮細(xì)胞之外的細(xì)胞上皮細(xì)胞、外周血單個核細(xì)胞以及成纖維細(xì)胞發(fā)生交叉抗原反應(yīng)。有研究報道稱[5]，在經(jīng)由機(jī)體免疫反應(yīng)、炎癥反應(yīng)所介導(dǎo)的，同時與血管管壁內(nèi)皮細(xì)胞損傷相關(guān)的多數(shù)自身免疫性疾病中發(fā)現(xiàn)有抗內(nèi)皮細(xì)胞抗體廣泛出現(xiàn)，這種現(xiàn)象在系統(tǒng)性血管炎中尤其突出，除此之外，其他相關(guān)疾病還包括有系統(tǒng)性紅斑狼瘡(SLE) 、白塞病網(wǎng)、系統(tǒng)性硬化等等。近年來，對于AECA及其相關(guān)靶抗原的研究已經(jīng)逐漸成為熱點，AECA通過多種復(fù)雜機(jī)制參與血管ECs的損傷，并誘導(dǎo)血管炎癥發(fā)生，與眾多疾病，尤其是系統(tǒng)性血管炎的發(fā)病過程及病情活動有一定的相關(guān)性。本研究結(jié)果提示在大多數(shù)系統(tǒng)性血管炎患者的血清中可以檢測到AECA的存在，這將為系統(tǒng)性血管炎的臨床診斷工作開辟出一條新的思路，在一定程度上，AECA的檢測對于系統(tǒng)性血管炎的臨床診斷的敏感性的提高具有較高的價值。

綜上所述，抗內(nèi)皮細(xì)胞抗體檢測可以提高系統(tǒng)性血管炎診斷的敏感性，值得在臨床推廣應(yīng)用。

參考文獻(xiàn)：

[1]陳柏諭，任少敏.抗內(nèi)皮細(xì)胞抗體與系統(tǒng)性血管炎關(guān)系的研究進(jìn)展[J].臨床兒科雜志，2013，31(9):891-892.

[2]李立明，李金玉，曾小平，等.抗內(nèi)皮細(xì)胞抗體與抗中性粒細(xì)胞胞漿抗體聯(lián)合檢測在診斷血管炎中的應(yīng)用[J].贛南醫(yī)學(xué)院學(xué)報，2011，31(1):381-39.

[3]肖艷群，張健，蔣玲麗，等.與α-烯醇化酶相關(guān)的抗內(nèi)皮細(xì)胞抗體ELISA的建立及臨床初步應(yīng)用[J].檢驗醫(yī)學(xué)，2011，26(12):891-892.

[4]張夢瑩，李志，呂坤，等.系統(tǒng)性紅斑狼瘡患者血清抗內(nèi)皮細(xì)胞抗體和抗β2糖蛋白Ⅰ抗體水平及其對人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞增殖的影響[J].中國臨床藥理學(xué)與治療學(xué)，2013，18(2):1421-1426.

[5]江盈，楊祖欽，麥菁蕓，等.抗內(nèi)皮細(xì)胞抗體在過敏性紫癜腎炎患兒中的表達(dá)及臨床意義[J].中國中西醫(yī)結(jié)合腎病雜志，2012，13(5):436-437.編輯/申磊