滇西地區(qū)藥用倒提壺的化學(xué)成分研究

摘要：目的 研究滇西地區(qū)藥用倒提壺（Cynoglossum amabile stapf et Drumm）的化學(xué)成分。方法 采用色譜分離，輔以重結(jié)晶純化，經(jīng)理化試驗以及光譜測試，或者與標(biāo)準(zhǔn)品TLC對照分析等方法進(jìn)行結(jié)構(gòu)鑒定。結(jié)果 分離并鑒定化合物6個，分別是齊墩果酸（Oleanolic acid，1）、正二十二烷酸（Docosanoic acid，2）、十五碳酸（pentadecanoic acid，3）、胡蘿卜苷（daucosterol，4）、葡萄糖（glucose，5）、蔗糖（sucrose，6）。結(jié)論 化合物5，6為首次從該植物中分離得到。

關(guān)鍵詞：滇西地區(qū)；倒提壺；化學(xué)成分

倒提壺Cynoglossum amabile stapf et Drumm，又名藍(lán)布裙、狗屎藍(lán)花、雞爪參、七星箭（重慶）、藍(lán)花參（云南紅河）等，為紫草科琉璃草屬多年生草本植物，是我國布依族、阿昌族、白族、基諾族等多個民族的民間習(xí)用藥，治療瘧疾、肝炎、痢疾、尿痛、白帶、肺結(jié)核咳嗽、外用治療創(chuàng)傷出血、骨折、關(guān)節(jié)脫臼等，用量為15～50g[1]。主要分布于云南、貴州、重慶、新疆等地。生于海拔1250～4565m的山坡草地，山地灌叢，干旱路邊及針葉林緣。以根及全草入藥，其味苦，性涼，有清熱利濕、散瘀止血、止咳、鎮(zhèn)痛之功效[2]；本文對滇西南地區(qū)所采倒提壺全草95%乙醇提取物的石油醚部、氯仿部、正丁醇部位進(jìn)行化學(xué)成分研究，分離并鑒定了6個成分：齊墩果酸（Oleanolic acid，1）、正二十二烷酸（Docosanoic acid，2）、十五碳酸（pentadecanoic acid，3）、胡蘿卜苷（daucosterol，4）、葡萄糖（glucose，5）、蔗糖（sucrose，6）。

1資料與方法

1.1一般資料 熔點用Yanaco顯微熔點儀測定，溫度未校正；UV用Shimadzu UV-2450紫外光譜儀測定（MeOH或EtOH）；紅外光譜用Shimadzu IR Prestige-21型紅外光譜儀測定，KBr壓片；MS用Autospec-3000質(zhì)譜儀測定；核磁共振譜用AM-400或DRX-500型核磁共振波譜儀測定，TMS為內(nèi)標(biāo)。

1.2試劑 倒提壺生藥材采自云南省保山市山區(qū)，經(jīng)保山中醫(yī)藥高等?？茖W(xué)校林國萍副教授鑒定為倒提壺Cynoglossum amabile stapf et Drumm全草。

柱層析用硅膠、薄層層析硅膠G板均為青島海洋化工廠或煙臺市實驗化工廠產(chǎn)品；葡聚糖凝膠LH-20為Pharmacia公司產(chǎn)品；烷基鍵合硅膠Rp-18為日本富士硅化工產(chǎn)品；大孔吸附樹脂AB-8為南開大學(xué)化工廠生產(chǎn)；纖維素用色譜微晶纖維素；提取分離用試劑或溶劑為一般工業(yè)級化學(xué)純試劑；顯色劑用10%硫酸-乙醇溶液、碘蒸汽、三氯化鐵-鐵氰化鉀試液。

2方法與結(jié)果

2.1分離步驟 倒提壺干燥全草30kg粉碎，95%乙醇回流提取得浸膏3kg，用水分散，然后分別依次用石油醚，氯仿，乙酸乙酯，正丁醇萃取，減壓濃縮回收溶劑，得到石油醚，氯仿，乙酸乙酯，正丁醇各部分浸膏。

正丁醇部分用水溶劑過濾后上大孔樹脂D101，分別用水和95%乙醇洗脫95%乙醇部分減壓回收溶劑后得浸膏400kg。石油醚部、氯仿和正丁醇部分經(jīng)硅膠、MCI、葡聚糖凝膠LH-20、反相硅膠Rp-18 等色譜方法分離，輔以重結(jié)晶等純化方法，共分離并鑒定了6個單體化合物。

石油醚部、氯仿部分經(jīng)TLC比較斑點基本一致合并為一個部分FrA；以MCI脫色后，得到脫色浸膏105g，經(jīng)硅膠柱色譜分離，氯仿-甲醇（98：2～8.5：1.5）梯度洗脫得到個二部分FrA1-2；FrA1用環(huán)己烷：丙酮（100：0～7：3）系統(tǒng)梯度洗脫，所得流分再經(jīng)反復(fù)的硅膠柱色譜分離，葡聚糖凝膠LH-20純化得到化合物1（106 mg）、2（11mg）、4（23mg）； Fr A2部分經(jīng)反復(fù)硅膠柱層析氯仿-甲醇（9：1～8：2）梯度洗脫得甲醇重結(jié)晶到化合物4（45 mg）。正丁醇部分經(jīng)過大孔樹脂層析用純水洗脫部分經(jīng)甲醇-水重結(jié)晶得到化合物5（5.6g）、6（3.0g）。

2.2結(jié)構(gòu)測定

2.2.1齊墩果酸 白色針晶（氯仿-甲醇），mp大于300℃；1H-NMRδ：0.65、0.68、0.73、0.79、0.84、1.12、1.37（各3H，s），3.22（1H，m），5.13（1H，m）；13C-NMR（CDCl3）δ：122.1（C-12），143.7（C-13），180.7（C-28）；鑒定該化合物為齊墩果酸。其波譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報道基本一致[3]。2.2.2二十二烷酸 無色針晶（甲醇），mp.80～83℃；IR顯示羥基（3300-2500 cm-1），羰基（1705 cm-1），碳氧鍵（1040 cm-1）等官能團(tuán)；UVλmax（甲醇）僅有末端吸收。其EI- MS m/z：340（M+），43（100），出現(xiàn)一系列減失質(zhì)量數(shù)14的片段，鑒定為二十二烷酸。

2.2.3十五碳酸 無色油狀； H-NMR（500MHz， CD3OD）δ： 0.88（3H，t，J=7.0Hz，H-15），1.25 （22H，m， H-4～H-14），1.45（4H，m，H-2～H-3）；（+）ESI-MS m/z：265[M+Na]+鑒定為為十五碳酸。

2.2.4 β-胡蘿卜苷 白色粉末，mp 294-295℃；Libermann-Burchard 反應(yīng)陽性；Molish 反應(yīng)為陽性；經(jīng)與β-胡蘿卜苷標(biāo)準(zhǔn)品在三個溶劑系統(tǒng)對照，Rf值與顯色行為一致；EI-MS m/z 576 [M]+，414，396，381，275，255 ，147；鑒定為β-胡蘿卜苷。

2.2.5葡萄糖 塊狀結(jié)晶 （H2O-MeOH）；與葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)品進(jìn)行TLC對照，三種溶劑系統(tǒng)[氯仿-甲醇-水（7：3：0.5），乙酸乙酯-甲醇-水（7：3：0.3），乙酸乙酯-正丁醇-水（4：1：5， 上層） ]下色譜行為一致。鑒定為葡萄糖。

2.2.6蔗糖 棒狀結(jié)晶 （H2O-MeOH）；與蔗糖標(biāo)準(zhǔn)品進(jìn)行硅膠TLC薄層色譜對照，三展開系統(tǒng)[氯仿-甲醇-水（7：3：0.5），乙酸乙酯-甲醇-水（7：3：0.3），乙酸乙酯-正丁醇-水（4：1：5， 上層）]下色譜行為一致。鑒定為蔗糖。

3討論

從倒提壺的乙醇提取物中分離鑒定了6個化合物，為常見的三萜、甾體類成分；之前的報道倒提壺主要含有吡咯生物堿，但我們本次從石油醚和氯仿萃取物中主要分離得到甾體類成分，研究結(jié)果豐富了對倒提壺的物質(zhì)基礎(chǔ)認(rèn)識，為進(jìn)一步了解倒提壺的提供了科學(xué)依據(jù)。

參考文獻(xiàn)：

[1]陳奇，陶子平，畢明，等.心益好及其組方成分的藥理學(xué)研究[J].中藥藥理與臨床，1985：55-56.

[2] 吳振海，陳彥生，梁紅衛(wèi)，等.黃土高原紫草科植物[J].西北植物學(xué)報，1999，19（5）：59.

[3]王奇志，梁敬鈺，原悅.巖黃連化學(xué)成分[J].中國天然藥物，2007，5（1）：31-34.

編輯/申磊