羧甲基殼聚糖口腔膜劑的制備及質(zhì)量控制

摘要：目的 研究羧甲基殼聚糖口腔膜劑的制備和含量測定。方法 采用殼聚糖和羧甲基殼聚糖為成膜材料，對主藥成分進行定性分析，采用紫外分光光度法對奧硝唑進行定量分析。結(jié)果 制備的膜劑成膜好，用紫外分光光度法能很好地測定奧硝唑含量。結(jié)論 該膜制備工藝簡單，含量測定快速、簡便，質(zhì)量易控制。

關(guān)鍵詞：羧甲基殼聚糖口腔膜劑；制備；質(zhì)量控制

羧甲基殼聚糖（carboxymethyl chitosan，CMC）是在殼聚糖分子鏈上引入羧甲基而成的水溶性衍生物，不僅具有較強的抗菌、止血等生物活性，還具有良好的成膜性[1]。由于口腔疾病的局限性，再加上局部用藥可使藥物直達\"病灶\"，給藥劑量小、全身副作用小以及局部藥物濃度高等優(yōu)點，所以近年來將藥物制成局部應(yīng)用的制劑的研究也越來越多。

目前口腔膜劑的成膜材料主要分為三類[2]：①天然的高分子化合物，如明膠、白芨膠、淀粉等。但此類成膜性能差，經(jīng)常與其他成膜材料合用，容易滋生細菌，所以應(yīng)用此類成膜材料需添加防腐劑。②半合成的高分子化合物，如羧甲基纖維素鈉、羥丙甲纖維素等。其特點是毒性小、粘度大、溶于水。③合成的高分子多聚物，如聚乙烯醇和卡波姆。以上成膜材料均具有固有的結(jié)構(gòu)缺點。

筆者以羧甲基殼聚糖為成膜材料，以奧硝唑為主藥制備膜劑，并對其質(zhì)量控制進行了研究。本文的膜劑選用羧甲基殼聚糖和殼聚糖為成膜材料，兩者均為天然高分子聚合物，廣泛存在于蟹、蝦殼中，在自然界中有巨大的儲備量，且羧甲基殼聚糖對與口腔疾病密切相關(guān)的多數(shù)厭氧菌均有一定抑制作用[3]。此外，通過改變羧甲基殼聚糖與殼聚糖的比例，可以制成不同降解時間的膜劑[4]，以滿足臨床需求?，F(xiàn)報道如下：

1資料與方法

1.1一般資料

1.1.1儀器 UV-240紫外分光光度儀，日本島津；電子分析天平，上海光學(xué)儀器廠。

1.1.2試藥 奧硝唑?qū)φ掌罚ㄙ徸灾袊称匪幤窓z定研究院）；甘油及冰醋酸（均購自萊陽經(jīng)濟技術(shù)開發(fā)區(qū)精細化工廠），羧甲基殼聚糖及殼聚糖（購自青島海生生物工程有限公司）。

1.2方法

1.2.1吸收波長的選擇 精密稱取奧硝唑?qū)φ掌?0mg，加蒸餾水適量使溶解并稀釋至1000ml，搖勻，配成濃度為20ug·ml-1的奧硝唑溶液（A液）。同時按處方比例配制不含奧硝唑的口腔膜劑水溶液。以蒸餾水為空白在200～400nm波長范圍掃描。結(jié)果，奧硝唑?qū)φ掌匪芤涸?19nm波長處有最大吸收峰。而空白膜劑水溶液在此波長無吸收，說明輔料對主藥含量測定無干擾。

1.2.2標準曲線的繪制 分別量取A液15.0、20.0、25.0、30.0、35.0、40.0、45.0、50.0ml，用蒸餾水稀釋成50ml，配成系列標準溶液，于319nm波長處測定吸收度（A）。以吸光度A為縱坐標，濃度C為橫坐標，繪制標準曲線，計算回歸方程，見表1。

1.2.3膜劑的處方及制備

1.2.3.1處方 奧硝唑0.50g，殼聚糖1.6g，羧甲基殼聚糖1.6g，甘油2.5g，糖精鈉0.4g，蒸餾水加至100g。

1.2.3.2制備方法 取殼聚糖1.6g，溶于20ml2%醋酸中；取羧甲基殼聚糖1.6g，溶于40ml蒸餾水中。將以上兩種溶液混合，加入甘油2ml，攪拌，混勻備用。取奧硝唑0.50g，溶于20ml蒸餾水中，后加入0.4g糖精鈉，攪拌溶解；再與上述備用的殼聚糖、羧甲基殼聚糖溶液混合，加適量蒸餾水至規(guī)定量，攪拌混勻后靜置。50℃水浴20～30min，氣泡完全消失后，在消毒處理并涂有少量液體石蠟的不銹鋼板（6cm×20cm）上鋪成。50℃干燥，脫模，分割成所需尺寸（每片約含奧硝唑1mg）在紫外燈下照射15min，密封包裝。

1.2.4膜劑的定量方法

1.2.4.1樣品的預(yù)處理 隨機抽取膜片，剪碎后，置于50ml的容量瓶中，加蒸餾水適量，水浴溶解后再稀釋至刻度，搖勻后過濾，得樣品溶液。

1.2.4.2奧硝唑的含量測定 樣品溶液于319nm波長處，測定吸光度A值，代入回歸方程計算各樣品中奧硝唑的百分含量。

2結(jié)果

2.1外觀按照處方制備的3批樣品，外觀平整，厚度均勻，柔韌性及硬度適中，且膜透明、光滑，無氣泡。膜劑的厚度為0.3mm。

2.2鑒別 取本品適量（約相當于奧硝唑0.1g），加硫酸溶液（3→100）5ml，攪拌使之溶解后，濾過，濾液加三硝基苯酚試液2ml，即產(chǎn)生黃色沉淀。

2.3含量測定取3批樣品，每批制劑取3片（每片含奧硝唑1mg）。剪碎后以蒸餾水為溶媒，充分溶解，微孔濾器過濾至50ml量瓶中，稀釋至刻度于319nm波長處測吸光度A值，代入回歸方程，計算奧硝唑的含量，見表1。

2.4含量均勻度的測定 參照《中國藥典》2010年版二部附錄ⅪE\"含量均勻度檢查法\"[5]，取同批研制的藥膜10片，分別依法測定每片以標示量為100的相對含量x，求其均值 和標準差S以及標示量與均值之差的絕對值A(chǔ)，計算A+1.80S=7.59﹤15.0，結(jié)果表明該膜劑的含量均勻度符合規(guī)定，見表3。

2.5穩(wěn)定性試驗的測定 耐高溫耐低溫實驗將樣品分別放置55℃烘箱中恒溫6h，置一5℃冰箱內(nèi)24 h，取出后放置室溫下；

常溫實驗將密封保存的每批樣本取5份，于第1d，1個月，3個月常溫下儲存，避光防置。

在上述條件下觀察其樣品變化，結(jié)果表明，其外觀、顏色、柔韌性和藥物含量等無明顯改變。

2.6微生物限度的檢查 參照《中國藥典》2010年版二部附錄ⅪJ\"微生物限度檢查法\"[5]測定細菌數(shù)、霉菌數(shù)、酵母菌數(shù)及控制菌檢查對本品三批樣品進行檢查，檢查結(jié)果均符合規(guī)定。

3討論

3.1本膜劑在制模時由于成膜材料稠度較高，故去除氣泡成了制備模劑的難題。因此，在制備過程中應(yīng)避免混合快，攪拌劇烈，保溫脫泡時靜置，停止攪拌，氣泡加熱至表面，然后剔除。另外，干燥成膜時應(yīng)控制溫度緩慢上升，避免溫度上升過快產(chǎn)生氣泡，從而影響膜劑質(zhì)量。

3.2冠周炎的菌群是復(fù)雜的，主要由革蘭陰性菌和厭氧菌[6]構(gòu)成?？咕幬锏氖褂迷诠谥芨腥究刂浦衅鹆酥匾淖饔谩５捎跓o法直接作用于牙周袋里的微生物，故抗菌藥物的全身給藥的有效性受到了限制。因此，局部應(yīng)用抗菌藥物于口腔內(nèi)的牙周袋內(nèi)被認為是一種優(yōu)良的替代傳統(tǒng)冠周炎治療的方法。本膜劑柔韌性及硬度適度，可根據(jù)患者臨床需要取適宜大小的藥膜放置于牙周袋內(nèi)，既能取得較好的臨床療效，又不會給患者帶來不適，便于醫(yī)務(wù)人員操作。

此外，奧硝唑[7，8]為第三代硝基咪唑類藥物，在治療口腔厭氧菌感染方面療效顯著，最低抑菌濃度為3.1ug·ml-1，最低殺菌濃度為6.3ug·ml-1；且藥效持續(xù)時間長，不良反應(yīng)少。

本膜劑制備方法簡單，紫外分光光度法測定主藥的含量，方法快速、可靠，且質(zhì)量穩(wěn)定、易控制，適合在基層醫(yī)院推廣應(yīng)用。

參考文獻：

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[8]Wust J.Susceptibility of anaerobic bacteria to metronidazole，ornidazole，and tinidazole and routine susceptibility testing by standardized methods[J].Antimicrob Agents Chemother，1977，11（4）：631-637.

編輯/申磊