摘要:目的 探討Techno TwinStation全自動血型儀在ABO、Rh(D)血型鑒定及不規(guī)則抗體篩查中的應(yīng)用價值。方法 Techno TwinStation全自動血型儀對41577例標(biāo)本進(jìn)行ABO正反定型、Rh(D)血型鑒定;對1959例標(biāo)本進(jìn)行不規(guī)則抗體的篩查,并與手工法(血型鑒定采用試管法,不規(guī)則抗體篩查采用微柱凝膠法)進(jìn)行比較。結(jié)果 41577例標(biāo)本中全自動血型儀與試管法ABO血型鑒定的準(zhǔn)確率分別為99.80%和99.75%,無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P﹥0.05),Rh(D)血型鑒定準(zhǔn)確率均為100%,不規(guī)則抗體篩查儀器法與手工微柱凝膠法的陽性率均為0.31%(5/1959),假陽性0例。結(jié)論 Techno全自動血型儀在ABO,Rh(D)血型鑒定及不規(guī)則抗體篩查中可避免人為差錯,提高工作效率,其結(jié)果更安全,可靠。
關(guān)鍵詞:Techno全自動血型儀;微柱凝膠法;血型;不規(guī)則抗體
血型鑒定和不規(guī)則抗體篩查是患者在輸血前必須進(jìn)行的檢驗(yàn)項(xiàng)目,正確的血型鑒定是保證臨床輸血安全的首要條件,也是輸血工作的重點(diǎn),傳統(tǒng)的手工試管法,雖然準(zhǔn)確率可以滿足臨床需要,但人為因素影響較大。不規(guī)則抗體篩查可有效減少溶血性輸血反應(yīng)的發(fā)生。為提高血型鑒定的準(zhǔn)確性和安全性,減少不規(guī)則抗體篩查中遇到的假陽性問題。我院應(yīng)用Techno TwinStation全自動血型儀進(jìn)行血型鑒定和不規(guī)則抗體的篩檢,并與手工法(試管法,手工微柱凝膠法)進(jìn)行比較,結(jié)果如下。
1資料與方法
1.1一般資料 本院2011年5月~2012年5月住院患者經(jīng)EDTA-K2抗凝標(biāo)本41577例。
1.2試劑 單克隆抗-A、抗-B血清、RhD(IgM)單克隆抗體(上海血液生物醫(yī)藥公司),A1、B、O試劑紅細(xì)胞及Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ號篩選紅細(xì)胞、多特異性抗人球蛋白試劑(上海血液生物醫(yī)藥公司),抗體篩選用微柱凝膠卡(美國Bio-Rad公司)。
1.3儀器 Techno TwinStation全自動血型儀(美國Bio-Rad公司),專用離心機(jī)及孵育器(美國Bio-Rad公司)。
1.4方法
1.4.1儀器法檢測血型和不規(guī)則抗體 Techno TwinStation全自動血型儀具有兩套獨(dú)立的加樣系統(tǒng),可快速準(zhǔn)確地分配樣本和試劑,并且同時對樣本和試劑的液面水平和凝塊進(jìn)行檢查。血型診斷系統(tǒng)自動完成加樣(標(biāo)本、微板卡、試劑、細(xì)胞均須條形碼識別條碼),以及樣本孵育、離心、反應(yīng)級別評定、結(jié)果判定以及數(shù)據(jù)傳輸和保存。
1.4.2手工微柱凝膠法檢測不規(guī)則抗體 分別向凝膠微柱內(nèi)加入1滴1%的Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ號篩選細(xì)胞及1滴受檢者血漿,置37℃專用孵育器中孵育15 min,1000 g離心10min,觀察結(jié)果。細(xì)胞位于柱底者為不規(guī)則抗體篩選陰性,浮在微柱表面或懸于柱中者為陽性。采用抗人球蛋白法[1]對陽性樣本進(jìn)行確認(rèn)。
1.4.3試管法鑒定血型 嚴(yán)格按照試劑說明書進(jìn)行ABO正反定型以及Rh(D)血型鑒定。疑難血型鑒定采用《實(shí)用血液免疫學(xué)血型理論和實(shí)驗(yàn)技術(shù)》[1]的要求操作。
1.5統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用GraphPadPrism5.0統(tǒng)計(jì)軟件χ2檢驗(yàn)
2結(jié)果
2.1 ABO及Rh(D)血型鑒定結(jié)果Techno TwinStation全自動血型儀檢測41577例患者ABO的正反定型、Rh(D)血型結(jié)果(見表1)。41577例一次判讀成功41493例,正確率99.80%,與文獻(xiàn)報(bào)道一致[2,3]。Rh(D)陽性正確率100%;Rh(D)陰性169例,經(jīng)血型血清學(xué)方法復(fù)檢后,確認(rèn)為Rh(D)陰性無誤。84例不能一次正確判讀的標(biāo)本多發(fā)性骨髓瘤占42例,新生兒5例,亞型3例,溶血性貧血1例,紅白血病1例,骨髓移植1例;其余為灰塵、氣泡等原因引起。11例直接報(bào)告弱陽性(weak)的樣本,經(jīng)進(jìn)一步檢測,有2例為AB3和ABx。試管法檢測血型正確率99.75%。兩種方法結(jié)果無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P﹥0.05)。
2.2不規(guī)則抗體的檢測結(jié)果 由于手工微柱凝膠法與儀器法均采用微柱凝膠技術(shù),檢測所用的微板相同,1595例標(biāo)本陽性檢出率儀器法與手工微柱凝膠法均為0.31%(5/1595)。假陽性0例。
2.3兩種方法單位時間內(nèi)工作量 儀器法和試管法每小時完成血型鑒定分別為72和30例,不規(guī)則抗體的檢測儀器法和手工微柱凝膠法分別為108和120例。
3討論
血型鑒定看似簡單,但責(zé)任重大。試管法雖然經(jīng)典,但由于編號、加樣、判讀、記錄結(jié)果均為人工操作,主觀錯誤難以避免,特別是大批量處理標(biāo)本時更容易引起醫(yī)療差錯。試管法無法一次性判斷成功的標(biāo)本均是由正反定型不符引起,儀器法無法一次判讀成功的標(biāo)本,大多數(shù)是也是由于正反定型不符引起,少部分是因?yàn)闅馀?、灰塵等原因引起的判讀不準(zhǔn)。其中出現(xiàn)正反定型不符的原因主要有:新生兒、腫瘤患者、亞型、自身免疫性疾病和骨髓移植后患者等,儀器法對亞型有較好的靈敏性,對于判讀不準(zhǔn)確的樣本,如脂血、輕度溶血、標(biāo)本體積過少的標(biāo)本以及未抗凝完全的標(biāo)本應(yīng)該采用手工法復(fù)試,肉眼判定結(jié)果;對于氣泡、灰塵等原因引起的判讀不準(zhǔn),可以直接通過肉眼觀察微板凝集情況判讀。
不規(guī)則抗體篩查,因?yàn)槎际俏⒅z法,在操作時間和結(jié)果判讀方面,儀器法的優(yōu)勢并不明顯。只是在避免人為差錯方面優(yōu)勢明顯。
ABO全自動血型儀改變了傳統(tǒng)的手工操作、肉眼判讀結(jié)果的檢測方法,使血型鑒定工作實(shí)現(xiàn)了自動化、標(biāo)準(zhǔn)化、信息化、批量化[4],提高了工作效率,降低了差錯率。正反定型結(jié)果由儀器進(jìn)行核對,所有實(shí)驗(yàn)結(jié)果由網(wǎng)絡(luò)進(jìn)行信息傳輸,杜絕了人為操作和判讀錯誤的發(fā)生。實(shí)驗(yàn)結(jié)果以數(shù)據(jù)和圖片的形式存于計(jì)算機(jī)內(nèi),實(shí)現(xiàn)了血型檢測結(jié)果的保存。血型檢測結(jié)果通過電腦打印原始資料完整,便于查詢和追溯,對醫(yī)療糾紛舉證有積極意義。因此全自動血型儀將會在臨床工作中得到越來越廣泛的使用。
參考文獻(xiàn):
[1]李勇,馬學(xué)嚴(yán),主編.實(shí)用血液免疫學(xué)血型理論和實(shí)驗(yàn)技術(shù)[M].北京:科學(xué)出版社,2006:642-643.
[2]夏衛(wèi),郭永芳.ABO血型全自動微板檢測法可靠性探討[J].中國輸血雜志,2000,13(3):166-167.
[3]胡繼征,陸典瑞,李啟輝.自動微板法在獻(xiàn)血者ABO血型鑒定中的應(yīng)用[J].廣州醫(yī)藥,2003,34(4):63.
[4]Schoenfeld H,Pretzel KJ,von Heymann C,et al.Validation of a hospital-laboratory workstation for immunohematologic methods[J].Transfusion,2010,50(1):26-31.
編輯/申磊