腦出血后血漿凝血酶及MMP—9的動態(tài)變化及相關(guān)性

摘要： 目的 探討腦出血患者凝血酶、MMP-9在腦出血急性期經(jīng)時動態(tài)變化及二者相關(guān)性，為急性期腦出血的治療奠定臨床的理論基礎(chǔ)。方法 分別于發(fā)病后不同時間點抽取45例腦出血患者靜脈血檢測凝血酶及MMP-9水平。同時檢測15例正常受試者的血漿凝血酶及MMP-9的水平，分析二者是否存在相關(guān)性。結(jié)果 一般正常人體內(nèi)會有少量凝血酶及MMP-9的表達(dá)，經(jīng)EL1SA法測定，腦出血患者凝血酶與MMP-9血漿含量動態(tài)變化的相關(guān)性檢驗，二者的峰值（第5d）呈正相關(guān)（P<0.01），兩者經(jīng)時動態(tài)變化的全過程仍然具有高度相關(guān)性（P<0.01）。結(jié)論 ①正常人血漿存在凝血酶與MMP-9少量表達(dá)。②腦出血患者從發(fā)病24h內(nèi)血漿凝血酶水平即迅速升高，至第5d后達(dá)高峰，第15d下降顯著與24h相比變化不大，已下降至發(fā)病早期水平，但仍高于正常。③腦出血患者于發(fā)病24h內(nèi)血漿MMP-9水平增高，至第5d左右達(dá)高峰，第10d時MMP-9顯著低于高峰期水平，但仍高于24h水平，第15d下降更加顯著，較24h明顯下降，僅輕度高于正常人血漿MMP-9水平。④在整個變化過程中，凝血酶含量越高，MMP-9水平越高。凝血酶水平與MMP-9水平呈正相關(guān)性。后期凝血酶下降速度慢于MMP-9的下降速度。

關(guān)鍵詞：腦出血；凝血酶；基質(zhì)金屬蛋白酶-9

目前國內(nèi)外大量動物實驗證實腦出血后凝血酶參與了腦水腫的發(fā)生與發(fā)展過程，同時凝血酶的活化又使水腫期另一關(guān)鍵致病因素MMP-9的表達(dá)上調(diào)，這兩者相互促進(jìn)，加重腦出血后腦水腫的發(fā)生、發(fā)展過程。

腦出血占腦血管病的10%～15%，血腫周圍水腫是導(dǎo)致腦出血患者病情加重及致殘的重要原因。腦出血后血漿、顱內(nèi)血腫液凝血酶增高機(jī)制為腦出血后激活了外源性凝血途徑，增加血漿凝血酶的含量。凝血酶的激活又啟動了另一種腦水腫致病因子，基質(zhì)金屬蛋白酶類（MMPs）異常表達(dá)與血腦屏障（BBB）被破壞直接相關(guān)，是導(dǎo)致血管源性腦水腫和繼發(fā)性腦組織損傷的另一關(guān)鍵因素。MMP-9是MMPs中的主要明膠酶，可特異性地降解基底膜的主要成分。研究探明凝血酶，MMP-9在腦出血急性期動態(tài)變化規(guī)律。

研究條件：搜集2008年～2009年初在吉林大學(xué)第一醫(yī)院住院的腦出血患者45例，正常對照組15例。

研究方法：45例腦出血患者在24h內(nèi)，第5d，第10d，第15d分別抽取靜脈血，檢測血漿凝血酶及MMP-9的含量，同時正常采集對照組15例健康受試者清晨空腹靜脈血1次。將所有數(shù)據(jù)用統(tǒng)計學(xué)方法進(jìn)行統(tǒng)計分析，討論凝血酶與MMP-9是否具有相關(guān)性。

研究結(jié)果：在整個變化過程中，凝血酶水平與MMP-9水平呈正相關(guān)性。后期凝血酶下降速度慢于MMP-9的下降速度。

1資料與方法

1.1一般資料 45例腦出血組患者符合1995年全國腦血管病會議制定的腦出血診斷標(biāo)準(zhǔn)。對照組15例為本院健康查體者。兩組男女比例為40：20例，平均年齡（54.3±10.8）歲，與年齡、性別構(gòu)成比無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）。

1.2方法

1.2.1觀察時間 血液標(biāo)本收集與測定分別于發(fā)病24h內(nèi)、第5d、第10d、第15d采取空腹肘靜脈血各取3ml，靜置30min，離心（3000r/min）15min，取血清標(biāo)本待測。正常對照組采集清晨空腹靜脈血1次。采用ELISA法原理測定凝血酶及MMP-9的靜脈血含量。

1.2.2凝血酶及MMP-9檢測方法 所有患者于發(fā)病后24h內(nèi)、第5d、第10d、第15d抽取空腹靜脈血3ml，枸櫞酸鈉抗凝，1h內(nèi)離心分離血漿至-40℃冰箱保存待測。凝血酶的測定采用ELISA法。

1.2.3統(tǒng)計方法 所有數(shù)據(jù)均采用SPSS11.5軟件進(jìn)行統(tǒng)計分析，計量資料采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）表示，以P<0.01為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2結(jié)果

2.1腦出血患者血漿凝血酶的動態(tài)變化 經(jīng)ELISA法檢測顯示，第5d與24h相比凝血酶含量增多，第10d時凝血酶含量較第5d顯著減少，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.01），與24h相比，差異無顯著性（P>0.01），見表1。

2.2腦出血患者血漿MMP-9的動態(tài)變化 經(jīng)ELISA法檢測顯示，第5d與24h相比血漿MMP-9水平增高，第5d與第10d相比，第15d下降顯著，與24h比，與第10d比，差異具有顯著性（P<0.01），見表2。

2.3腦出血患者血漿凝血酶與MMP-9變化的相關(guān)性 腦出血患者凝血酶與MMP-9血漿含量動態(tài)變化的相關(guān)性檢驗，兩者的峰值呈正相關(guān)，兩者隨時間動態(tài)變化的全過程仍然具有高度相關(guān)性（P<0.01），見圖1。

3討論

3.1腦出血后凝血酶動態(tài)變化 早期凝血酶升高是由于凝血功能增強(qiáng)，凝血酶參與到凝血機(jī)制中，同時活化的凝血酶經(jīng)過腦脊液以及腦靜脈系統(tǒng)吸收入血，造成凝血酶的表達(dá)上調(diào)。隨著病情發(fā)展，纖溶功能逐漸增強(qiáng)，纖維蛋白溶解，與纖維蛋白交聯(lián)而失活的凝血酶開始逐漸釋放并激活，釋放的凝血酶開始作用于腦組織細(xì)胞，造成腦細(xì)胞水腫，壞死。同時由于凝血酶對BBB的破壞，促進(jìn)血管源性腦水腫的發(fā)生。腦出血急性期凝血酶含量與腦水腫呈正相關(guān)性。

3.2腦出血后MMP-9的動態(tài)變化 因血腫直接壓迫周圍腦組織和小血管，引起局部血流量降低，組織細(xì)胞缺血缺氧，導(dǎo)致細(xì)胞功能發(fā)生改變；缺血-缺氧作為一種信號，刺激炎性細(xì)胞、神經(jīng)元、內(nèi)皮細(xì)胞和膠質(zhì)細(xì)胞，從而激活了MMPs系統(tǒng)導(dǎo)致MMP-9表達(dá)上調(diào)。在腦出血第5d時，血漿MMP-9的水平處于峰值，隨后由于血腫體積縮小，凝血酶的含量下降，MMP-9的水平迅速下降，甚至快于凝血酶。國內(nèi)外的動物試驗發(fā)現(xiàn)腦出血模型組的MMP-9的mRNA與蛋白表達(dá)呈正相關(guān)性。

3.3腦出血后凝血酶與MMP-9表達(dá)相關(guān)性 在整個腦出血的動態(tài)變化過程中，凝血酶含量越高，MMP-9水平越高。凝血酶下降速度慢于MMP-9下降速度，達(dá)峰值后血漿凝血酶在15d水平與其24h內(nèi)含量相比無明顯差異，而MMP-9的水平已較24h內(nèi)含量明顯減少。隨著新生血管對腦供血增強(qiáng)，缺血缺氧等刺激因素減少，腦組織表達(dá)MMP-9的水平迅速下降。

4結(jié)論

4.1正常人血漿存在凝血酶與MMP-9少量表達(dá)。

4.2腦出血患者從發(fā)病24h內(nèi)血漿凝血酶水平迅速升高，至第5d后達(dá)高峰，第15d下降與24h相比變化不大，下降至發(fā)病早期水平。

4.3腦出血患者于發(fā)病24h內(nèi)血漿MMP-9水平增高，至第5d左右達(dá)高峰，第10d時MMP-9顯著低于高峰期水平，但仍高于24h水平，第15d下降更加顯著，較24h明顯下降，僅輕度高于正常人血漿MMP-9水平。

4.4在整個變化過程中，凝血酶含量越高，MMP-9水平越高。凝血酶水平與MMP-9水平呈正相關(guān)性。

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編輯/申磊