膠體金試紙條法和ELISA法在乙肝表面抗原檢測(cè)中的效果分析

摘要：目的 系統(tǒng)評(píng)價(jià)ELISA法和膠體金試紙條法在乙肝表面抗原檢測(cè)中的靈敏度和特異性，探討ELISA法和膠體金試紙條法在乙肝表面抗原檢測(cè)中的應(yīng)用價(jià)值。方法 隨機(jī)選取我院檢驗(yàn)科在2012年5月～2013年2月收集的普通門診或住院病例，以及體檢數(shù)據(jù)，共計(jì)500例血樣標(biāo)準(zhǔn)。標(biāo)本收集后分別采取酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA），以及膠體金試紙條法（GICA），對(duì)兩者的檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行比較和統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。結(jié)果 膠體金試紙條法和酶聯(lián)免疫吸附法檢測(cè)乙型病毒性肝炎表面抗原的靈敏度和特異度不全相等，酶聯(lián)免疫吸附法的靈敏度和特異度高于膠體金法（χ2=6.056，P=0.035；χ2=4.316，P=0.041）。結(jié)論 ELISA法檢測(cè)HBsAg具有靈敏度高，特異性強(qiáng)，重復(fù)性好，可以半定量等優(yōu)點(diǎn)，但ELISA法在操作過(guò)程中有許多影響因素。

關(guān)鍵詞：ELISA法；膠體金試紙條法；靈敏度；特異度

在臨床檢測(cè)過(guò)程中，目前，用于檢測(cè)乙型病毒性肝炎表面抗原的方法主要有酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）、膠體金免疫層析法（GICA）、時(shí)間分辨焚光免疫法（TRFIA），以及微粒子酶免疫分析法（MEIA）和化學(xué)發(fā)光免疫分析法（CLIA）等不同方式和不同作用原理的檢測(cè)方式[1]。本研究通過(guò)對(duì)我院在乙型病毒性肝炎表面抗原檢測(cè)過(guò)程中，通過(guò)采用ELISA和GICA所取得的結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)描述性分析，并且對(duì)兩種不同檢測(cè)方法的優(yōu)勢(shì)及不足進(jìn)行進(jìn)一步的闡述和分析，通過(guò)系統(tǒng)評(píng)估酶聯(lián)免疫吸附法和膠體金試紙條法在檢測(cè)乙型病毒性肝炎表面抗原的效能，并對(duì)其方法進(jìn)行對(duì)比分析，為有關(guān)學(xué)者進(jìn)一步做相關(guān)的研究提供科學(xué)的理論依據(jù)。

1資料與方法

1.1一般資料 本研究的臨床標(biāo)本均來(lái)自我院檢驗(yàn)科在2012年5月～2013年2月收集的普通門診或住院病例，以及體檢數(shù)據(jù)，共計(jì)500例血樣標(biāo)準(zhǔn)。標(biāo)本收集后分別采取酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA），以及膠體金試紙條法（GICA），同時(shí)，在結(jié)果出來(lái)之前，血樣標(biāo)本存放于零下20℃的醫(yī)用冰柜中保存。

1.2主要儀器和試劑：微粒子酶免疫分析儀，酶標(biāo)儀，洗板機(jī)，酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）試劑，由上?？迫A生物技術(shù)有限公司生產(chǎn)的乙型病毒性肝病毒表面抗原檢測(cè)試劑盒，試劑批號(hào)為：20121107；膠體金試紙條法（GICA）試劑，由艾博生物醫(yī)藥有限公司生產(chǎn)的乙型病毒性肝病毒表面抗原檢測(cè)試劑盒，試劑批號(hào)為：20121215。

1.3方法 依據(jù)第三版的《全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》，本研究人員嚴(yán)格按照檢驗(yàn)操作規(guī)程，獲取500例全血標(biāo)本，通過(guò)離心機(jī)離心10min后，吸取適量血清來(lái)進(jìn)行臨床檢驗(yàn)檢測(cè)。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 利用SPSS 18. 0軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，計(jì)量資料采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）表示，采用方差分析的方法比較多組組間均數(shù)兩兩比較。設(shè)定P<0.05為有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2結(jié)果

2.1兩種檢測(cè)方法陽(yáng)性率比較 酶聯(lián)免疫吸附法乙型病毒性肝炎表面抗原的陽(yáng)性率為45.8%，膠體金試紙條法乙型病毒性肝炎表面抗原陽(yáng)性率為43.3%，見表1。

2.2兩種檢測(cè)方法靈敏度和特異度比較 對(duì)500例研究對(duì)象進(jìn)行回訪調(diào)查，其中確診為乙型病毒性肝炎的感染患者為234例。以此為標(biāo)準(zhǔn)計(jì)算膠體金試紙條法和酶聯(lián)免疫吸附法兩種檢測(cè)方法的靈敏度和特異度。這兩種方法測(cè)定乙肝病毒表面抗原的靈敏度和特異度不全相等，再做χ2分割檢驗(yàn)可得出酶聯(lián)免疫吸附法的靈敏度和特異度高于膠體金法（χ2=6.056，P=0.035；χ2=4.316，P=0.041），見表2。

3討論

通過(guò)本研究結(jié)果表明膠體金試紙條法檢測(cè)HBsAg具有簡(jiǎn)便、快速、不需特殊設(shè)備等優(yōu)點(diǎn)，已廣泛應(yīng)用于門診患者快速檢查，血站采血車快速檢測(cè)等[2]。但是，膠體金試紙條在HBsAg檢測(cè)中也有一定的欠缺，由于膠體金顯色需要較高濃度的標(biāo)記物，故其靈敏度會(huì)受到一定限制，在HBsAg濃度較低時(shí)易出現(xiàn)假陰性[3]。因此，盡管該操作簡(jiǎn)便、快速、無(wú)需特殊設(shè)備，肉眼可以直接觀察結(jié)果，但對(duì)于低滴度HBsAg早感染者極易造成漏檢。酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA法）檢測(cè)HBsAg具有靈敏度高，特異性強(qiáng)，重復(fù)性好，可以半定量等優(yōu)點(diǎn)，但ELISA法在操作過(guò)程中有許多影響因素，如血清分離，標(biāo)本保存，試劑在使用前平衡至室溫，加樣有無(wú)氣泡、濺出，加樣加在孔壁部非包被區(qū)，孵育時(shí)間方式，洗板情況等等，每步的操作都會(huì)影響試驗(yàn)的結(jié)果。另外，ELISA法反應(yīng)時(shí)間長(zhǎng)，需要特殊設(shè)備等，不太適合門急診和無(wú)償獻(xiàn)血的HBsAg初篩工作[4]。從本次試驗(yàn)研究可以看出，雖然酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA法）檢測(cè)乙肝表面抗原的陽(yáng)性率、靈敏度和特異度高于膠體金法，但兩種方法具有密切的相關(guān)性，且存在差異性較小，兩者都可以滿足臨床診斷需要，兩種方法各有利弊，應(yīng)當(dāng)根據(jù)實(shí)際工作需要選擇適合的方法。

參考文獻(xiàn)：

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編輯/申磊