乳腺癌中E—cadherin和p53的表達(dá)分析及其意義

摘要：目的 探討乳腺癌組織中E-cadherin和p53的陽(yáng)性表達(dá)與浸潤(rùn)轉(zhuǎn)移的關(guān)系。方法 選取2012年9月～2013年9月永州市中心醫(yī)院乳腺癌標(biāo)本80例，采用免疫組化法檢測(cè)E-cadherin和p53蛋白的陽(yáng)性表達(dá)情況。結(jié)果 ①E-cadherin、p53在80例乳腺癌組織中陽(yáng)性表達(dá)率分別為70%（56/80）、66.2%（53/80）。②E-cadherin陽(yáng)性表達(dá)隨組織學(xué)分級(jí)升高而降低（P<0.05），且有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組E-cadherin的陽(yáng)性表達(dá)率較無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組低（P<0.05）。③p53陽(yáng)性表達(dá)與組織學(xué)分級(jí)有關(guān)，且有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組p53的陽(yáng)性表達(dá)率較無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組高（P<0.05）。結(jié)論 乳腺癌組織中E-cadherin和p53的表達(dá)可作為乳腺癌浸潤(rùn)轉(zhuǎn)移潛能的判斷指標(biāo)之一，具有重要的臨床意義\"

關(guān)鍵詞：乳腺癌；E-cadherin；p53；浸潤(rùn)轉(zhuǎn)移

乳腺癌目前居女性常見(jiàn)惡性腫瘤的首位[1-2]，嚴(yán)重危害女性的健康。乳腺癌導(dǎo)致人死亡的關(guān)鍵在于癌細(xì)胞發(fā)生了轉(zhuǎn)移同時(shí)還侵襲身體的其它器官[3-4]，而淋巴轉(zhuǎn)移是乳腺癌的重要轉(zhuǎn)移途徑。其淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移與否及組織學(xué)分級(jí)常被臨床作為選擇治療方法和判斷治療預(yù)后的重要參考指標(biāo)。E-cadherin基因作為判斷乳腺癌轉(zhuǎn)移的重要標(biāo)志物之一，具有重要臨床意義，p53作為評(píng)估乳腺癌變預(yù)后的另一指標(biāo)，其在乳腺癌的發(fā)生、發(fā)展中也具有重要作用，且乳腺癌的淋巴結(jié)浸潤(rùn)轉(zhuǎn)移的關(guān)系密切。本研究采用免疫組化sp法檢測(cè)80例乳腺癌組織中E-cadherin和p53蛋白的陽(yáng)性表達(dá)情況，旨在探討乳腺癌組織中E-cadherin和p53的陽(yáng)性表達(dá)與組織學(xué)分級(jí)、浸潤(rùn)轉(zhuǎn)移的相關(guān)性分析。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取2012年9月～2013年9月永州市中心醫(yī)院乳腺癌標(biāo)本，均經(jīng)兩名病理醫(yī)師閱片確診且均選取為非特殊性浸潤(rùn)性導(dǎo)管癌80例。年齡32～78歲，平均45.3歲。根據(jù)WHO乳腺腫瘤病理學(xué)和遺傳學(xué)分類（2003）推薦的半定量組織學(xué)分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行組織學(xué)分級(jí)，Ⅰ級(jí)20例，Ⅱ級(jí)32例，Ⅲ級(jí)28例。淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移32例，無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移48例。

1.2主要試劑 E-cadherin單克隆抗體、p53單克隆抗體，sp試劑盒和DAB試劑盒均購(gòu)于福州邁新生物技術(shù)有限公司。

1.3實(shí)驗(yàn)方法 本實(shí)驗(yàn)采用免疫組化sp法檢測(cè)。所有的標(biāo)本均經(jīng)10%中性福爾馬林固定，石蠟包埋，4um厚切片，常規(guī)石蠟切片HE染色，免疫組化采用S-P法。實(shí)驗(yàn)步驟按說(shuō)明書進(jìn)行，檸檬酸緩沖液高溫高壓修復(fù)，DAB顯色，蘇木精復(fù)染。以E-Cadherin和p53陽(yáng)性切片做陽(yáng)性對(duì)照，以PBS液代替一抗做陰性對(duì)照。

1.4結(jié)果判定 E-Cadherin染色陽(yáng)性信號(hào)位于在細(xì)胞膜或者細(xì)胞質(zhì)，呈棕黃色顆粒。采用雙評(píng)分方法評(píng)定結(jié)果，按陽(yáng)性細(xì)胞百分比例：無(wú)陽(yáng)性細(xì)胞或者陽(yáng)性細(xì)胞小于10%為0分，陽(yáng)性細(xì)胞10%～30%為1分，陽(yáng)性細(xì)胞31%～60%為2分，大于61%為3分，細(xì)胞不著色為0分，淡黃色為1分，黃色為2分，棕黃色為3分，兩項(xiàng)評(píng)分乘積小于6分為陰性表達(dá)，大于或等于6分為陽(yáng)性表達(dá)。P53染色陽(yáng)性信號(hào)位于細(xì)胞核，呈棕黃色顆粒，

1.5統(tǒng)計(jì)分析 應(yīng)用SPSS17.0軟件進(jìn)行χ2檢驗(yàn)，若P<0.05差異有顯著性。

2 結(jié)果

2.1 E-cadherin和p53在乳腺癌中陽(yáng)性表達(dá)E-cadherin和p53在80例乳腺癌組織中陽(yáng)性表達(dá)率分別為70%（56/80）、66.2%（53/80），見(jiàn)表1。

2.2 E-cadherin和p53在不同組織學(xué)分級(jí)陽(yáng)性表達(dá)E-cadherin陽(yáng)性表達(dá)率在不同的組織學(xué)分級(jí)為I級(jí)95%（19/20）、Ⅱ級(jí)78.1%（22/32）、Ⅲ級(jí)42.8%（12/28）；p53陽(yáng)性表達(dá)率在不同的組織學(xué)分級(jí)為I級(jí)55.0%（11/20）、Ⅱ級(jí)68.8%（22/32）、Ⅲ級(jí)71.4%（20/28），見(jiàn)表2。

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2.3 E-cadherin和p53在淋巴結(jié)有無(wú)轉(zhuǎn)移的陽(yáng)性表達(dá)E-cadherin陽(yáng)性表達(dá)率在有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組中為46.8%（15/32），無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組中為85.4%（41/48）；p53陽(yáng)性表達(dá)率在有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組中為81.2%（26/32），無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組中為56.2%（27/48），見(jiàn)表2。

3 討論

E-cadherin基因位于人類第16號(hào)染色體第16q22.1位點(diǎn)，一種單次跨膜糖蛋白，屬于細(xì)胞粘附分子蛋白質(zhì)家族，廣泛表于各種組織中，它在維持上皮細(xì)胞之間粘附連接，保持組織結(jié)構(gòu)的完整性起著重要的作用。E-cadherin是調(diào)節(jié)細(xì)胞與細(xì)胞間，細(xì)胞與基質(zhì)間粘附反應(yīng)的重要媒介，可以通過(guò)促進(jìn)同型細(xì)胞間粘附，可以使癌細(xì)胞保持緊密連接，難以脫離原發(fā)灶進(jìn)入脈管和淋巴結(jié)，故被認(rèn)為是一個(gè)重要的腫瘤轉(zhuǎn)移抑制基因[5]。趙衛(wèi)等[6]曾報(bào)道E-cadherin蛋白表達(dá)水平隨著腫瘤脈管浸潤(rùn)和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的發(fā)生，E-cadherin蛋白的表達(dá)明顯降低，隨著乳腺癌的病理學(xué)分級(jí)逐漸升高，E-cadherin蛋白的表達(dá)水平也逐漸降低。本研究中表明，淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的發(fā)生，E-cadherin蛋白的表達(dá)明顯降低，隨著乳腺癌的病理學(xué)分級(jí)逐漸升高，E-cadherin蛋白的表達(dá)水平也逐漸降低，與趙衛(wèi)的報(bào)道較一致。這可能說(shuō)明，E-cadherin過(guò)度表達(dá)時(shí)細(xì)胞粘附力增強(qiáng)，不易發(fā)生轉(zhuǎn)移和浸潤(rùn)，而表達(dá)水平降低時(shí)導(dǎo)致細(xì)胞間的粘附作用力降低，癌細(xì)胞容易脫落，從而發(fā)生浸潤(rùn)和轉(zhuǎn)移。

p53位于人17號(hào)染色體短臂上，分野生型和突變型。野生型作為一種抑癌基因，能抑制多種癌基因的轉(zhuǎn)化活性，而突變型p53可導(dǎo)致所編碼的蛋白功能喪失，可促進(jìn)細(xì)胞的惡性轉(zhuǎn)化和增殖。野生型的p53半衰期短，免疫組化不易檢測(cè)到，突變型p53穩(wěn)定性明顯增強(qiáng)，在細(xì)胞內(nèi)聚集比正常細(xì)胞多很多倍，免疫組化易檢測(cè)到，且突變型p53見(jiàn)于多種惡性腫瘤中。林黎娟等[7]報(bào)道腋窩淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組p53陽(yáng)性表達(dá)率57%；未轉(zhuǎn)移組，p53陽(yáng)性表達(dá)率31%，轉(zhuǎn)移組p53陽(yáng)性表達(dá)較未轉(zhuǎn)移組明顯增高。任秋華[8]報(bào)道p53蛋白表達(dá)與分級(jí)、轉(zhuǎn)移呈正相關(guān)，隨著組織學(xué)分級(jí)增高而陽(yáng)性表達(dá)增高。本文研究表明p53蛋白表達(dá)在組織學(xué)分級(jí)I級(jí)與Ⅱ級(jí)、Ⅲ級(jí)表達(dá)有顯著差異，而在Ⅱ級(jí)和Ⅲ級(jí)之間表達(dá)沒(méi)有差異，與任秋華報(bào)道有不同，可能是由于標(biāo)本數(shù)量有限沒(méi)有體現(xiàn)出之間的差異性。本研究中p53蛋白表達(dá)在淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移中陽(yáng)性表達(dá)率81.2%，無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移中陽(yáng)性表達(dá)率為56.2%，與林黎娟報(bào)道較一致，淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組中p53陽(yáng)性表達(dá)率明顯高于無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組。眾多研究表明，P53蛋白的表達(dá)水平與乳腺癌的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移以及預(yù)后等有明顯關(guān)系，它可作為乳腺癌預(yù)后的一項(xiàng)重要參數(shù)。

惡性腫瘤的分化程度、侵襲力、轉(zhuǎn)移性是極其復(fù)雜的問(wèn)題，不是某一兩個(gè)因素所左右的，惡性腫瘤的預(yù)后及高危因素與腫瘤的組織學(xué)分級(jí)及是否有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移息息相關(guān)。

本研究表明，E-cadherin和p53陽(yáng)性表達(dá)率在淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移中表達(dá)是呈負(fù)相關(guān)的，而在組織學(xué)分級(jí)中E-cadherin陰性表達(dá)率和p53陽(yáng)性表達(dá)率呈正相關(guān)。因此E-cadherin和p53的聯(lián)合檢測(cè)可作為篩選乳腺癌高?；颊叩氖侄沃?。

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編輯/蘇小梅