葡萄糖與肌酐的檢測順序?qū)◆Y(jié)果的影響

摘要：目的 探討用全自動生化分析儀進(jìn)行項目測定時，葡萄糖（GLU）試劑對血清肌酐（CR）測定產(chǎn)生影響，造成的交叉污染及避免的方法。方法 選取健康體檢人員50名的血清標(biāo)本制成混合人血清分成三組做肌酐測定。第1組先單獨(dú)測定CR作為對照組，第2組先測GLU后測CR，第三組在GLU和CR之間穿插ALT（丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶）測定。結(jié)果 第2組與第1組測得肌酐值有顯著性差異（P<0.01），第3組與第1組測得的肌酐值無差異（P>0.05）。結(jié)論 自動生化分析中，用先測GLU后測CR的分析順序時，GLU試劑對CR的測定結(jié)果有影響，可導(dǎo)致CR的測定結(jié)果偏高，葡萄糖試劑對肌酐測定有交叉污染，可導(dǎo)致肌酐的測定結(jié)果偏高。

關(guān)鍵詞：葡萄糖（GLU）；肌酐（CR）；順序；交叉污染

全自動生化分析儀發(fā)展迅速，具有多項目、多樣本的處理能力，其分析技術(shù)提高了臨床生化檢驗質(zhì)量和速度，提高檢測精密度，減少人為誤差，實(shí)現(xiàn)了臨床檢驗標(biāo)準(zhǔn)化，但由于共用吸樣針、試劑針、攪拌棒以及比色杯，還有生化儀長期使用致其清洗能力下降、比色杯老化后引起吸附力增加、生化儀內(nèi)污垢的積聚、檢測順序安排不當(dāng)，且常規(guī)清洗不能有效消除交叉污染時，就會增加試劑間化學(xué)污染的可能性，引起測定結(jié)果偏高或偏低[1-3]。在日常工作中，我們發(fā)現(xiàn)當(dāng)葡萄糖（GLU）測定排在肌酐（CR）測定前面時，可造成肌酐測定結(jié)果偏高，且做了清洗程序，也沒能消除這種影響，考慮可能為試劑之間的交叉污染。為此，我們用科華卓越350全自動生化分析儀進(jìn)行了相關(guān)實(shí)驗，并探討了避免交叉污染的方法。

1 材料與方法

1.1一般資料 隨機(jī)選取黃浦婦幼保健所50名健康體檢人員，年齡20～50歲。所有對象均用無添加劑真空管抽血。

1.2儀器和試劑 儀器采用科華卓越350全自動生化分析儀。葡萄糖（氧化酶法）、肌酐（肌氨酸氧化酶法）、丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（紫外-乳酸脫氫酶法）試劑均為科華配套試劑。

1.3方法 從50份樣本中提取血清混合制作成人混合血清50ml，充分混勻分成3分，作為3個不同的測試順序組的測試樣本。第一份10ml，分成50例，作為第1組單獨(dú)測CR；第二份20ml，分成50例，作為第2組先GLU后CR的測試順序（GLU-CR）的樣本；第3份20ml，分成50例，作為第3組在GLU和CR之間穿插ALT的測試順序（GLU-ALT-CR）的樣本。所有樣本均在儀器狀況良好，質(zhì)控數(shù)據(jù)在控的情況下測試。

1.4統(tǒng)計學(xué)方法 統(tǒng)計學(xué)方法應(yīng)用SPSS19.0軟件處理數(shù)據(jù)。計量資料以x±s表示，采用配對t檢驗，以P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

第2組測得的結(jié)果與第1組測得值作配對t檢驗，P<0.01，有統(tǒng)計學(xué)意義?？梢钥闯?，葡萄糖試劑對肌酐測定結(jié)果存在明顯正干擾，使CR的測定值偏高。第3組和第1組測得的結(jié)果做配對t檢驗，P>0.05，無統(tǒng)計學(xué)意義。由此可見，在GLU和CR測試之間穿插ALT可排除這種試劑間的交叉污染（見表1）。

3 討論

對3次不同的檢測順序得出的結(jié)果作了統(tǒng)計后，發(fā)現(xiàn)葡萄糖試劑對肌酐測試結(jié)果干擾嚴(yán)重，其原因之一應(yīng)該是葡萄糖和肌酐的檢測，它們的最終生成物均是紅色化合物醌亞胺，把葡萄糖測試放在前面時，生成的這種最終產(chǎn)物在隨著全自動生化儀器使用時間的增加，儀器使用多年使其的清洗能力有所下降，從而增加了攜帶污染的影響，產(chǎn)生了疊加作用，使肌酐測定結(jié)果偏高。

根據(jù)幾年使用下來的經(jīng)驗，我們認(rèn)為在隨著生化儀器使用時間的累加，而使儀器狀態(tài)欠佳時，使試劑間的交叉污染、攜帶污染對測定結(jié)果影響變大，這些干擾總結(jié)下來大致有以下3個方面：①試劑中含有高濃度的被干擾項目的待測物；②試劑成分參與反應(yīng)：上一個試劑所要測定的底物有作用，繼而干擾下一個反應(yīng)的測定結(jié)果；③反應(yīng)進(jìn)程相同：上一個試劑所引導(dǎo)的反應(yīng)對下一個項目的反應(yīng)進(jìn)程帶來間接的干擾，下一項目所測定的是前后兩個項目反應(yīng)的綜合作用結(jié)果。

在本實(shí)驗中，使肌酐測定值偏高的另一原因是：葡萄糖反應(yīng)產(chǎn)物均有過氧化氫，而肌酐測定試劑必須使用過氧化氫酶，使用前面的葡萄糖反應(yīng)而產(chǎn)生過氧化氫的測試項目，則會消耗部分過氧化氫酶，導(dǎo)致肌酸和肌氨酸不能有效消除，使測定結(jié)果偏高[4-5]。當(dāng)改變儀器檢測順序，在葡萄糖與肌酐之間任意穿插其他項目進(jìn)行檢測時，所得結(jié)果與對照組比較無顯著性差異。解決以上自動生化分析儀試劑針攜帶污染所致的干擾方法有：①安排項目順序時要求兩個項目間至少要有一個非干擾項目，或?qū)⒈桓蓴_項目放在干擾項目之前測試；②設(shè)定試劑針、樣品針和比色杯的補(bǔ)充清洗程序，從而減低試劑之間的交叉污染；③加強(qiáng)儀器的日常保養(yǎng)和維護(hù)，定期對儀器進(jìn)行清洗和維護(hù)。

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編輯/王敏