新生兒肺炎常見病原體及特征分析

【摘要】目的 探討新生兒肺炎中常見的病原體及其主要特征。方法 選取132例新生兒肺炎的患者，采用巢式PCR法分別檢測(cè)HCMV、HSV-Ⅰ、HSV-Ⅱ、TOX、HBV這五種病毒在新生兒中的陽(yáng)性感染幾率，篩查新生兒患肺炎的概率，并利用軟件分析這些病毒與肺炎感染率的關(guān)系。結(jié)果 在選取的132例新生兒中，HCMV的檢出率為83.3%，HSV-Ⅰ和TOX均為6.1%、HSV-Ⅱ和HBV的分別為16.7%和7.6%。結(jié)論 要加強(qiáng)對(duì)新生兒病原體感染的篩查，做好對(duì)新生兒肺炎的預(yù)防與早期診斷工作。

【關(guān)鍵詞】新生兒;肺炎病原體;檢測(cè)

【中圖分類號(hào)】R-1 " "【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】B " "【文章編號(hào)】1671-8801（2014）11-0356-02

1 資料與方法

1.1 一般資料：

選取的病例為某省婦幼保健院的132例新生兒病例。這132個(gè)新生兒均被檢查確診為肺炎患者，其中男嬰82例，女嬰50例;他們的日齡均在0到28天;經(jīng)過檢查，且無其他嚴(yán)重的器質(zhì)性疾病，如先天性心臟病、神經(jīng)系統(tǒng)疾病等;這些嬰兒在被選作研究病例以前，未做過任何相關(guān)治療。

對(duì)每個(gè)病例抽取1mL的外周靜脈血，室溫保存，防止凝血，以5000轉(zhuǎn)/分鐘的速度進(jìn)行離心，最后分離血清，置于冰箱中，調(diào)至負(fù)80攝氏度進(jìn)行保存。

1.2 方法：

實(shí)驗(yàn)中所用的試劑與儀器包括蛋白酶K，DNA聚合酶，PCR擴(kuò)增儀，HCMV、HSV-Ⅰ及HSV-Ⅱ的病毒標(biāo)準(zhǔn)株，另外還有某研究所提供的TOX和HBV。

取制備好的血清100μL，采用酚-氯仿-異戊醇-蛋白消化法進(jìn)行消化，然后用終質(zhì)量濃度為100g/L的聚乙二醇6000進(jìn)行助沉淀，再用終水平為20mmol/L的氯化氫，pH為8.0，10mmol/L的EDTA，0.1g/L的SDS，0.8g/L的蛋白酶K組成的裂解液對(duì)病毒進(jìn)行裂解，最后用比例為25：24：1的酚-氯仿-異戊醇進(jìn)行抽取，得到上層清液，加入體積比是1：10，pH為5.2的3mol/L的乙酸鈉，還有兩倍體積的冰無水乙醇，置于冰箱中于負(fù)20攝氏度進(jìn)行保存。之后用700mL/L的乙醇洗滌，在室溫下干燥后得到病毒的DNA。

然后分別對(duì)HCMV、HSV-Ⅰ、TOX、HSV-Ⅱ、HBV這幾種病毒進(jìn)行檢測(cè)，獲得結(jié)果。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理：

使用SPSS軟件對(duì)所得數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，采用λ2的檢驗(yàn)，當(dāng)Plt;0.05時(shí)，檢驗(yàn)的結(jié)果具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1弓形蟲巢式PCR與普通PCR靈敏度檢測(cè)結(jié)果的對(duì)比：

取標(biāo)準(zhǔn)病毒株HCMV、HSV-Ⅰ、TOX、HSV-Ⅱ、HBV的DNA，隨機(jī)抽取14例新生兒肺炎患者的血清DNA，使用1μL滅菌蒸餾水，并以HSV-Ⅱ的引物做巢式PCR反應(yīng)，然后在反應(yīng)終產(chǎn)物中加入20g/L的瓊脂糖做電泳反應(yīng)，觀察PCR的特異性。

將1μL的TOX的DNA模板一次進(jìn)行稀釋，稀釋倍數(shù)分別為101、102、103、104、105、106倍，得到檢測(cè)結(jié)果，如下表1所示。

2.2肺炎新生兒118例5種病原體巢式PCR檢測(cè)結(jié)果：

對(duì)五種病毒進(jìn)行PCR檢測(cè)，對(duì)HCMV、HSV-Ⅰ、TOX、HSV-Ⅱ、HBV這五種病毒的結(jié)果進(jìn)行比較，檢測(cè)的結(jié)果Plt;0.05，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。具體結(jié)果如下表2所示。

3 討論

通過對(duì)以上數(shù)據(jù)的分析，可知HCMV感染，即人巨細(xì)胞病毒感染是由人巨細(xì)胞病毒引起的，如果孕婦感染這種病毒后，會(huì)導(dǎo)致胎兒的畸形，胎兒出生后會(huì)引起呼吸道感染。HSV即單純皰疹病毒是新生兒和免疫功能低下的人極易感染的一類病毒，它主要分為HSV-Ⅰ和HSV-Ⅱ兩種，感染HSV-Ⅰ后主要會(huì)導(dǎo)致口腔黏膜、口唇等的熱性皰疹，另外還可能引起眼角膜炎，HSV-Ⅱ的感染主要是對(duì)生殖器和腰部以下進(jìn)行感染，會(huì)導(dǎo)致孕婦流產(chǎn)、死產(chǎn)，出生的嬰兒體質(zhì)低下。TOX即弓形蟲，它是一種寄生蟲，可在人和獸類身上寄生，它的危害非常大，尤其是對(duì)孕婦，孕婦感染之后，會(huì)導(dǎo)致死產(chǎn)、流產(chǎn)或者胎兒的畸形，另外還會(huì)引起兒童的弓形蟲腦病和弓形蟲眼病。HBV是乙肝病毒，它對(duì)人類的危害極大，我國(guó)的乙肝患者所占比例較大，其中大約一半的乙肝患者都是由母嬰傳播導(dǎo)致的，因此要嚴(yán)格控制乙肝病毒的傳播與蔓延。以上病毒都是導(dǎo)致新生兒出生缺陷的病原微生物，如果孕婦感染其中的一種或幾種，就會(huì)導(dǎo)致腹中的胎兒也感染這種病毒。就會(huì)引起新生兒呼吸系統(tǒng)感染、畸形、神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)育障礙等疾病，導(dǎo)致新生兒的體質(zhì)較差，嚴(yán)重的造成新生兒的先天性缺陷，嚴(yán)重的導(dǎo)致新生兒的死亡。這對(duì)新生兒以及孕婦的危害都是很大的，因此，要加強(qiáng)對(duì)新生兒病原體的檢測(cè)，做到早發(fā)現(xiàn)，早治療，讓新生兒原理病原體的危害。

綜上，巢式PCR是一種有效預(yù)防新生兒病原體感染的，比較先進(jìn)且簡(jiǎn)單的技術(shù)，采用此方法是對(duì)新生兒免疫機(jī)制的完善，對(duì)新生兒病原體感染起到了早發(fā)現(xiàn)、早診斷、早治療的作用。同時(shí)對(duì)母親孕期的篩查以及優(yōu)生優(yōu)育做出了重大的貢獻(xiàn)。

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