【摘要】目的 "探討酶聯(lián)免疫吸附試驗應(yīng)用于臨床結(jié)核病診斷研究。方法 " "選取我院2010年1月~2013年11月間收治的肺結(jié)核患者110例,對患者的血清抗結(jié)核抗體采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)技術(shù)進行檢測;同時,取患者痰直接涂片進行檢測,對兩種檢測方法進行對比分析。結(jié)果 "本研究110例肺結(jié)核患者經(jīng)ELISA法檢測,陽性率為83.64%;直接涂片檢測陽性率為26.36%。ELISA法高于痰直接涂片陽性率,且差異顯著(Plt;0.001),具有統(tǒng)計學(xué)意義。結(jié)論 "采用ELISA法檢測血清抗結(jié)核抗體操作簡便、快捷,且特異性好,對肺結(jié)核疾病的臨床診斷提供可靠依據(jù),值得研究。
【關(guān)鍵詞】酶聯(lián)免疫吸附試驗;結(jié)核抗體;痰直接涂片;陽性率
【中圖分類號】R4 " "【文獻標識碼】B " "【文章編號】1671-8801(2014)011- 0124-02
近年來,隨著實驗檢測技術(shù)的快速發(fā)展,酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)檢測技術(shù)在肺結(jié)核鑒別及診斷中得到廣泛應(yīng)用。ELISA檢測可顯示特定抗原或抗體是否存在,并可利用呈色之深淺進行定量分析。[1]因此,ELISA檢測血清抗結(jié)核抗體操作簡捷、特異性高,提高肺結(jié)核疾病的臨床鑒別及診斷水平。本文筆者對我院110例確診肺結(jié)核病患者進行ELISA法和痰直接涂片法檢測痰中結(jié)核桿菌陽性率,對兩種檢測方法結(jié)果進行對比分析,具體情況如下。
1 "資料與方法
1.1 "一般資料
隨機選取2010年1月~2013年11月間我院收治的肺結(jié)核患者110例,其中男63例,女47例,年齡在18~85歲,平均年齡為55.6歲。應(yīng)用ELISA技術(shù)與痰直接涂片法對110例患者進行檢測,同時另選擇80例臨床診斷非結(jié)核患者作為對照,進行實驗數(shù)據(jù)對比分析。
1.2 "儀器及試劑
酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)快速測定試劑盒由上海眾生生命科學(xué)發(fā)展有限公司提供,參考說明書方法操作。應(yīng)用安圖斯PHOMO全自動酶標儀檢測。
1.3 方法
首先,采集患者清晨空腹血清標本和患者口腔清潔后1~2口痰液標本。然后,應(yīng)用上海眾生生命科學(xué)發(fā)展有限公司提供白安圖斯PHOMO全自動酶標儀對患者血清抗結(jié)核抗體(IgG)進行實驗檢測;痰涂片進行顯微鏡檢,在100個視野鏡檢抗酸染色,如果發(fā)現(xiàn)3~9條抗酸桿菌則呈陽性,300個視野鏡檢沒有發(fā)現(xiàn)抗酸桿菌則為陰性。
2 "結(jié)果
本研究110例肺結(jié)核患者經(jīng)ELISA法檢測,血清抗結(jié)核抗體呈陽性者92例,陽性率為83.64%;直接涂片檢測呈陽性患者29例,陽性率為26.36%,且經(jīng)ELISA法檢測均為陽性,另81例陰性患者經(jīng)ELISA法檢測,有63例為陽性。ELISA的陽性率明顯高于直接涂片法,且差異顯著(Plt;0.001),具有統(tǒng)計學(xué)意義。同時,80例非肺結(jié)核疾病患者對照檢測中,ELISA檢測出8例陽性,而痰涂片鏡檢測沒有發(fā)現(xiàn)陽性,說明ELISA檢測精準度高于痰涂片檢測。
3 "討論
肺結(jié)核病是由結(jié)核桿菌感染引起的慢性傳染病,嚴重影響患者的身心健康及生活質(zhì)量。尤其是早期或輕度肺結(jié)核,可無任何癥狀或癥狀輕微而被忽視,無法早期明確診斷及治療。[2]對于肺結(jié)核疾病的精準檢測成為早期確診肺結(jié)核病的重要途徑,而臨床上痰涂片鏡檢抗酸桿菌陰性及陽性,陽性檢出率較低,容易出現(xiàn)漏檢。通過應(yīng)用酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)法檢測肺結(jié)核患者血清抗結(jié)核分枝桿菌抗體,能夠高效檢測出患者抗結(jié)核菌陽性率,為臨床肺結(jié)核疾病的快速診斷和有效治療提供有力保障,其臨床檢測意義重大。
酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)是酶免疫測定技術(shù)中應(yīng)用最廣的技術(shù),具有靈敏、特異、簡單、快速、穩(wěn)定及易于自動化操作等特點,不僅適用于臨床標本的檢查,而且由于一天之內(nèi)可以檢查幾百甚至上千份標本,也適合于血清流行病學(xué)調(diào)查。[3]本法不僅可以用來測定抗體,而且也可用于測定體液中的循環(huán)抗原,所以也是一種早期診斷的良好方法。本研究中,我們采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)檢測肺結(jié)核患者的血清標本,其陽性率達到83.64%,而應(yīng)用痰涂片鏡檢陽性率僅為26.36%,ELISA明顯優(yōu)于直接痰涂鏡檢。同時,痰涂鏡檢出的81例陰性患者再經(jīng)ELISA檢測,陽性者達63例,陽性率達69.23%。說明痰涂鏡檢陽性檢出率較低,ELISA檢測技術(shù)可以減少痰涂片陰性患者的漏診及誤診。[4]因此,肺結(jié)核患者應(yīng)用ELISA法檢測血清中的抗結(jié)核抗體陽性率明顯高于痰涂片和培養(yǎng),尤其在結(jié)核早期感染時細菌量少或化療后細菌變異死亡難于培養(yǎng)時更明顯,ELISA特別適合結(jié)核病的早期診斷和鑒別診斷,是一種既特異又敏感的檢測方法。
另外,值得注意的是由于ELISA具有很高靈敏度,因而在檢測技術(shù)操作中易造成污染而呈假陽性,因此應(yīng)該不斷提高檢驗人員的操作水平,避免實驗污染,確保實驗檢測結(jié)果的精準性??傊嘎?lián)免疫吸附試驗(ELISA)檢測血清抗結(jié)核抗體,陽性檢出率較高,達到快速、敏感、特異,簡便的實驗要求,對肺結(jié)核疾病的確診及早期輔助診斷提供重要參考依據(jù),值得臨床推廣應(yīng)用。
參考文獻:
[1] 吳雪瓊.我國結(jié)核病實驗室診斷研究的主要進展.中華結(jié)核和呼吸雜志,2003,26:477.
[2]中華醫(yī)學(xué)會結(jié)核病分會. 肺結(jié)核病診斷與治療指南. 中華結(jié)核和呼吸雜志,2001,24(3):70.
[3]胡忠義,龐茂銀,靳安佳,等.應(yīng)用噬菌體裂解法快速鑒定結(jié)核分枝桿菌.中華結(jié)核和呼吸雜志,2001,24:611-613.
[4]許林,侯超,王新寧. "抗原特異性T細胞活化試驗對結(jié)核病鑒別診斷的價值[J]. 江蘇醫(yī)藥, "2008, 34(8); 773-774