異嗜性抗體在甲狀腺功能檢測中的影響分析

【摘要】目的：對異嗜性抗體在甲狀腺功能檢測中的影響作用進(jìn)行分析，并探討排除和減少干擾的方法。方法：選取2013年1-12月間我院行促甲狀腺激素檢測并發(fā)病激素水平有不適當(dāng)增高病例180例，取患者空腹靜脈血離心處理獲得血清，血清樣本行聚乙二醇（PEG）沉淀法及標(biāo)記抗體的固相放射免疫分析法（IRMA法）測定促甲狀腺激素（TSH）水平，診斷出異嗜性抗體增多癥6例，納入研究組，其余174例納入對照組。結(jié)果：研究組RIA法測定TSH水平顯著低于IRMA法血清中和前檢測結(jié)果，同時也顯著低于對照組RIA法測定結(jié)果，數(shù)據(jù)間比較具有統(tǒng)計學(xué)差異（Plt;0.01）;IRMA法血清中和后TSH水平顯著低于血清中和前，同時顯著低于對照組血清中和后檢測結(jié)果，數(shù)據(jù)間比較具有統(tǒng)計學(xué)差異（Plt;0.01）。兩組間RIA法測定FT3與FT4的結(jié)果比較無統(tǒng)計學(xué)差異，且血清中和前、后的FT3或FT4水平組內(nèi)比較無統(tǒng)計學(xué)差異（Pgt;0.05）。結(jié)論：對于IRMA法檢測TSH水平有不適當(dāng)增高病例，應(yīng)提高警惕，患者可能存在異嗜性抗體干擾，應(yīng)進(jìn)一步行RIA法測定，如結(jié)果有顯著下降，說明異嗜性抗體的存在風(fēng)險更高，一般可采用FEG法進(jìn)行最終診斷與確定。

【關(guān)鍵詞】異嗜性抗體;甲狀腺功能指標(biāo);固相放射免疫分析法;檢測價值

【中圖分類號】R4 " "【文獻(xiàn)標(biāo)識碼】B " "【文章編號】1671-8801（2014）011- 0119-02

異嗜性抗體為免疫測定中一類嚴(yán)重影響檢測結(jié)果的干擾因素，主要因其與受檢物質(zhì)具有相似活性但化學(xué)結(jié)構(gòu)不同引起[1]。在檢驗過程中，如忽略異嗜性抗體作用，對于檢驗結(jié)果的準(zhǔn)確性與特異性具有極大影響，甚至增大了臨床用藥的風(fēng)險[2]。有報道顯示，飼養(yǎng)寵物兔的受檢人群內(nèi)，約有30%-40%比例能檢測出異嗜性抗體存在，而當(dāng)中約有0.05%-0.5%的免疫測定受到異嗜性抗體干擾[3]。在甲狀腺功能檢測中，異嗜性抗體的干擾易影響檢測結(jié)果，使測定的激素水平與實際情況不符，影響臨床的診治與預(yù)后?，F(xiàn)對異嗜性抗體在甲狀腺功能檢測中的影響作用進(jìn)行分析，并探討排除和減少干擾的方法，希望為提高臨床診斷甲狀腺水平的準(zhǔn)確性提出建議。

1 資料與方法

1.1一般資料

選取2013年1-12月間我院行促甲狀腺激素檢測并發(fā)病激素水平有不適當(dāng)增高病例180例，包括男性102例，女性78例，平均年齡（43.8±12.6）歲，平均病程（9.5±5.2）個月。

1.2方法

1.2.1試劑與儀器

游離T3、T4、TSH試劑盒為美國診斷試劑公司產(chǎn)品;血清甲狀腺球蛋白抗體（TGAb）及血清甲狀腺微粒體抗體（TMAb）放免試劑盒為上海生物制品研究所產(chǎn)品;人血清TSH放免試劑盒為北京東免東雅生物技術(shù)研究所產(chǎn)品。離心機為德國賀利氏公司產(chǎn)品，型號Megafuge2R型;自動蛋白分析儀為美國貝克曼公司產(chǎn)品，型號Array360;放射免疫計數(shù)器為西安利亞公司產(chǎn)品，型號Cap-r16。

1.2.2檢測方法

對臨床患者均抽取空腹靜脈血進(jìn)行離心處理，留取血清部分，置于-20℃下保存待測。采用標(biāo)記抗原的固相放射免疫分析法（RIA法）對各患者血清樣本測定游離三碘甲腺原氨酸（FT3）和游離四碘甲腺原氨酸（FT4）水平，采用標(biāo)記抗體的固相放射免疫分析法（IRMA法）進(jìn)行促甲狀腺激素（TSH）水平的測定。根據(jù)測定結(jié)果，選取TSH不適當(dāng)增高病例重復(fù)實施FT3與FT4水平檢測，以排除隨機誤差樣本。剩余血清樣本應(yīng)用RIA法進(jìn)行TSH水平的測定，如TSH水平有顯著下降，則采用速率散射比濁法檢測，以排除風(fēng)濕因子的干擾。剩余樣本納入本組研究樣本。

取究樣本血清0.5 mL置入試管，加入牛、羊、鼠、豬的非免疫動物混合血清50μL，孵育至聚乙二醇（PEG）沉淀出現(xiàn)，應(yīng)用IRMA法再次進(jìn)行TSH水平的檢測。評價檢測結(jié)果，如TSH≥5 UIU/mL，且與患者臨床表現(xiàn)及RIA測定結(jié)果一致，則診斷為異嗜性抗體增多癥[4]。

1.2.3分組方法

根據(jù)檢測結(jié)果，將診斷為異嗜性抗體增多癥的6例病例納入研究組，包括男性4例，女性2例，平均年齡（43.6±11.8）歲，平均病程（9.2±4.8）個月;其余174例病例納入對照組，包括男性98例，女性76例，平均年齡（44.1±12.3）歲，平均病程（9.6±5.3）個月。兩組病例在年齡、性別及病程方面比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義（Pgt;0.05），具有可比性。

1.3統(tǒng)計學(xué)處理

數(shù)據(jù)處理軟件為SAS12.0，組間數(shù)據(jù)比較采用t檢驗，當(dāng)Plt;0.05時表示數(shù)據(jù)間差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 TSH水平測定結(jié)果比較

如表1所示，研究組RIA法測定TSH水平顯著低于IRMA法血清中和前檢測結(jié)果，同時也顯著低于對照組RIA法測定結(jié)果，數(shù)據(jù)間比較具有統(tǒng)計學(xué)差異（Plt;0.01）;IRMA法血清中和后TSH水平顯著低于血清中和前，同時顯著低于對照組血清中和后檢測結(jié)果，數(shù)據(jù)間比較具有統(tǒng)計學(xué)差異（Plt;0.01）。

2.2 FT3與FT4測定結(jié)果比較

如表2所示，兩組間RIA法測定FT3與FT4的結(jié)果比較無統(tǒng)計學(xué)差異，且血清中和前、后的FT3或FT4水平組內(nèi)比較無統(tǒng)計學(xué)差異（Pgt;0.05）。

3 討論

FT3、FT4和TSH為臨床甲狀腺功能檢測的三項常見指標(biāo)，對甲亢、甲減等甲狀腺功能異常的診斷具有重要的應(yīng)用價值[5]。行甲狀腺功能檢測時，如存在抗體的干擾，很可能影響檢測數(shù)據(jù)，造成診斷結(jié)果的偏差或不真實，影響治療與預(yù)后。在甲狀腺功能檢測中可能起到干擾作用的抗體有多種，包括甲狀腺激素自身抗體、類風(fēng)濕因子和異嗜性抗體。異嗜性抗體的產(chǎn)生機制目前尚不明確，是一種經(jīng)由抗原刺激而產(chǎn)生的足夠滴度的特異性免疫球蛋白。已知異嗜性抗體具有較低的親和力，與多種不同種屬的免疫球蛋白均可發(fā)生弱交叉反應(yīng)，以此來干擾TSH的免疫學(xué)檢測[6]。

異嗜性抗體的來源很多，比如接觸飼養(yǎng)寵物、進(jìn)食污染食品、滅菌不完全的鮮奶、接種動物血清、接受免疫療法等。異嗜性抗體對甲狀腺功能檢測結(jié)果的影響作用主要通過對雙位點免疫分析的干擾而產(chǎn)生。IRMA法為雙位點夾心免疫分析法，由于異嗜性抗體具有與多種種屬動物免疫球蛋白弱結(jié)合的特征，因而此法可利用異嗜性抗體與標(biāo)記抗體及包被抗體的結(jié)合，使TSH的檢測結(jié)果呈現(xiàn)假性增高，進(jìn)而鑒別異嗜性抗體增多癥。對異嗜性抗體增多的血清樣本采用PEG沉淀法觀察抗原抗體復(fù)合物，有利于清除或減少異嗜性抗體在試驗過程中起到的干擾作用，從而提高診斷數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性。本組研究結(jié)果表明，異嗜性抗體血清樣本采用RIA法檢測TSH水平有明顯異常，采用IRMA法血清中和后的檢測結(jié)果有明顯異常，證實FEG法具有一定排除干擾的作用。

由本組研究可見，對于IRMA法檢測TSH水平有不適當(dāng)增高病例，應(yīng)提高警惕，患者可能存在異嗜性抗體干擾，應(yīng)進(jìn)一步行RIA法測定，如結(jié)果有顯著下降，說明異嗜性抗體的存在風(fēng)險更高，一般可采用FEG法進(jìn)行最終診斷與確定。

參考文獻(xiàn)：

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