慢性血吸蟲病血清學(xué)檢測聯(lián)合B超的臨床意義探討

【摘要】目的 通過實(shí)驗(yàn)室應(yīng)用免疫技術(shù)分析法對血吸蟲病開展血清學(xué)檢測并與超聲檢查比對，以探討其臨床意義。

【關(guān)鍵詞】慢性血吸蟲；血清學(xué)檢測；B超檢查；意義探討

【中圖分類號】R4 【文獻(xiàn)標(biāo)識碼】B 【文章編號】1671-8801（2014）02-0104-02

血吸蟲病（schistosomiasis）是一種嚴(yán)重危害我國居民身體健康、影響社會經(jīng)濟(jì)發(fā)展的重大傳染病。據(jù)估計(jì)，全球有78個國家和地區(qū)有血吸蟲病的流行，受威脅人口約5-6億，感染血吸蟲病者2.42億[1]。我國為日本血吸蟲病流行區(qū)，是日本血吸蟲病4個流行國中最嚴(yán)重的國家，也是全球血吸蟲病危害最嚴(yán)重的4個國家之一。

湖南省歷史上是血吸蟲病嚴(yán)重流行區(qū)，上世紀(jì)六、七十年代對血吸蟲病患者進(jìn)行了大規(guī)模的藥物治療，這批患者目前大多年逾花甲。如何診斷這些患者血吸蟲病病情，成為血吸蟲病防治工作的核心[2]。一直以來臨床診斷中將肝臟組織活檢作為判斷肝纖維化程度的“金標(biāo)準(zhǔn)”， 但其具有創(chuàng)傷性， 臨床上難以將其作為常規(guī)檢查[3]。而血清學(xué)檢測工作量小、依從性高等優(yōu)點(diǎn)，廣泛用于血吸蟲病檢查，是我國當(dāng)前血吸蟲病輔助診斷的重要手段之一[4-7]。B超診斷起源于本世紀(jì)40年代，血吸蟲病的超聲診斷發(fā)展史也大致相同。常用于超聲診斷日本血吸蟲病的指標(biāo)有：肝實(shí)質(zhì)回聲的改變、肝脾大小的測定、門靜脈系統(tǒng)的測量。超聲檢查是非損傷性診斷方法，操作簡便，能準(zhǔn)確發(fā)現(xiàn)肝臟血吸蟲病的病理改變并可評估病情的嚴(yán)重程度。在現(xiàn)場短期內(nèi)可檢查大量人群，立即可獲結(jié)果，使用統(tǒng)一標(biāo)準(zhǔn)檢測，具有很強(qiáng)的實(shí)用性[8]。本文旨在通過實(shí)驗(yàn)室血清學(xué)檢測與超聲檢查的比對，以探討其臨床意義。

1 免疫分析學(xué)方法

1.1 皮內(nèi)試驗(yàn)（ID）是一種檢測受試者對血吸蟲抗原的速發(fā)型超敏反應(yīng)實(shí)驗(yàn)。若受試者曾經(jīng)感染過血吸蟲，那么機(jī)體內(nèi)則有相應(yīng)的抗體（皮膚致敏性抗體 IgE），當(dāng)受試者皮內(nèi)注射少量血吸蟲抗原時(shí)，抗原與皮內(nèi)肥大細(xì)胞表面的相應(yīng)抗體結(jié)合，導(dǎo)致宿主局部毛細(xì)血管擴(kuò)張，血管通透性增高，產(chǎn)生局部丘疹現(xiàn)象，即為陽性。若未曾感染過血吸蟲，則注射后不會引起局部紅腫現(xiàn)象，即為陰性。ID便、快速、通常用于現(xiàn)場篩選可疑病例，與糞檢蟲卵陽性的符合率為90%左右，但可出現(xiàn)假陽性或假陰性反應(yīng)，與其他吸蟲病可產(chǎn)生較高的交叉反應(yīng)；并且病人治愈后多年仍可為陽性反應(yīng)[9]。故從20世紀(jì)90年代開始ID已經(jīng)很少現(xiàn)場使用。

1.2 間接凝集實(shí)驗(yàn)（IHA）

是將可溶性抗原（抗體）先吸附于適當(dāng)大小的顆粒性載體（紅細(xì)胞）的表面作為試劑，來檢測標(biāo)本中的相應(yīng)抗體或抗原的一種血清學(xué)方法。將一系列倍比稀釋血清加到血凝板上，并分別加入致敏細(xì)胞懸液，振蕩，靜置。以出現(xiàn)凝集反應(yīng)的最高稀釋度為陽性反應(yīng)終點(diǎn)。IHA大致可分為4類：（1）IHA用抗原致敏紅細(xì)胞以檢測樣品中的相應(yīng)抗原；（2）反向間接凝集試驗(yàn)用特異性抗體致敏紅細(xì)胞，以檢測標(biāo)本中的相應(yīng)抗體；（3）間接血凝抑制試驗(yàn)；（4）反向間接血凝抑制試驗(yàn)。IHA操作簡捷，快速有效，并且具有高度的敏感性和特異性，在臨床檢驗(yàn)中被廣泛應(yīng)用。但其診斷抗原的穩(wěn)定性較差，交叉反應(yīng)率稍高，且致敏紅細(xì)胞存在著批間差異，反應(yīng)易受客觀因素的影響[10] ，故仍待進(jìn)一步研究。

1.3 酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）的基礎(chǔ)是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標(biāo)記。結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學(xué)活性，酶標(biāo)記的抗原或抗體既保留其免疫學(xué)活性，的抗原或抗體仍保持其免疫學(xué)活性，酶標(biāo)記的抗原或抗體既保留其免疫學(xué)活性，又保留酶的活性。在測定時(shí)，受檢標(biāo)本（測定其中的抗體或抗原）與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng)。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復(fù)合物與液體中的其他物質(zhì)分開。再加入酶標(biāo)記的抗原或抗體，也通過反應(yīng)而結(jié)合在固相載體上。此時(shí)固相上的酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量呈一定的比例。加入酶反應(yīng)的底物后，底物被酶催化成為有色產(chǎn)物，產(chǎn)物的量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān)，故可根據(jù)呈色的深淺進(jìn)行定性或定量分析。由于酶的催化效率很高，間接地放大了免疫反應(yīng)的結(jié)果，使測定方法達(dá)到很高的敏感度。?；燮嫉萚11]通過診斷試驗(yàn)Meta分析，綜合評價(jià)間接血凝集試驗(yàn)（IHA）和酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）對日本血吸蟲病的診斷效果。結(jié)果顯示IHA法的綜合靈敏度為0.721，診斷優(yōu)勢比為6.686。ELISA法的綜合靈敏度為0.633，診斷優(yōu)勢比為2.963。結(jié)論兩種血清學(xué)診斷試驗(yàn)（IHA和ELISA）對日本血吸蟲病的診斷準(zhǔn)確度中等，IHA略高于ELISA，但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。兩種診斷方法對日本血吸蟲病均具備一定的診斷價(jià)值。

1.4 膠體染料試紙條法（DDIA）血吸蟲病患者血清中存在的抗血吸蟲抗體（IgG）與膠體染料標(biāo)記的日本血吸蟲可溶性蟲卵抗原（SEA）相結(jié)合，形成染料標(biāo)記的抗原—抗體復(fù)合物，這復(fù)合物通過層析技術(shù)與固定在硝酸纖維膜上的抗人IgG（二抗）相結(jié)合，形成可見的染色帶，即為陽性反應(yīng)。DDIA是近年研制的用染料標(biāo)記的日本血吸蟲可溶性蟲卵抗原檢測日本血吸蟲病人血清抗體的方法，其操作簡單、快速，價(jià)格低廉，不需要專門設(shè)備，并且具有較高的敏感性和特異性，因此，該法適合進(jìn)行大規(guī)模的血吸蟲病人群普查的篩選.[12]

1.5 其他免疫檢測方法 其他諸如免疫印跡技術(shù)、間接熒光抗體試驗(yàn)（IFAT）、環(huán)卵沉淀試驗(yàn)（COPT）等多種針對血吸蟲病患者的血清學(xué)實(shí)驗(yàn)，已日益成為主要的診斷手段[13]。

2 B超診斷

2.1 B超檢查方法 采用超聲顯像儀， 探頭頻率3. 5 MHz， 患者于空腹時(shí)平臥下進(jìn)行肝、膽、脾的常規(guī)檢查。

2.2 B超診斷標(biāo)準(zhǔn)：慢性血吸蟲病參照1990 年10 月開羅召開的由世界衛(wèi)生組織熱病防治司（WHO/ CT D） 和放射醫(yī)學(xué)處（ RAD） 以及瑞士熱帶病研究所、開羅大學(xué)醫(yī)學(xué)院聯(lián)合主辦的TDR 血吸蟲病超聲診斷咨詢會議制定標(biāo)準(zhǔn)[14] 。

2.3 血吸蟲病侵入肝臟的主要途徑是4尾蚴侵入人體。到達(dá)肺臟后.可穿出肺血管壁或穿透肺組織和橫膈而入肝.從而侵入門靜脈系統(tǒng)B另一條途徑可通過肺血管經(jīng)肺靜脈入大循環(huán)經(jīng)腸系膜靜脈到達(dá)門靜脈系統(tǒng)。寄生的血吸蟲卵可隨血流沉著于肝臟，引起肝組織損害。袁平[15] 分析已確診為慢性血吸蟲病的214例患者中。肝脾系統(tǒng)顯示有變化者236例.占總?cè)藬?shù)95.5%。

2.3.1 肝臟表現(xiàn)為肝左葉增大105例，占44.4.%，左右葉增大者37例，占15.6%。222例有肝內(nèi)回聲增粗、不均.呈網(wǎng)絡(luò)狀改變。（圖1）

LPV： 擴(kuò)張門靜脈矢狀部； LL： 肝左葉； ASC： 肝前腹水； KL ： 右肝， 腫大， 門靜脈增寬， 右葉縮小， 進(jìn)肝面光帶不光滑， 呈“鋸齒”狀

圖1 血吸蟲病肝臟超聲表現(xiàn)

2.3.2 脾門處4脾靜脈增寬內(nèi)徑大于0.8cm者29例.占12.2%，門靜脈內(nèi)徑增寬大于1.4cm者29例，占12.2%。（見圖2）

2.3.3 脾臟4顯示脾大者97例.占41.4%，.脾切面內(nèi)徑在4cm以上（見圖2）

SP： 腫大脾臟； SPV： 脾靜脈； ASC： 腹水

圖2 血吸蟲病脾臟超聲表現(xiàn)

圖1.2 見參考文獻(xiàn)[15]

2.4 趙曉貢[16]等對該地區(qū)已確診為慢性血吸蟲病167 例和晚期血吸蟲病（ 晚血） 62 例患者作腹部肝、膽、脾臟B 超檢查，發(fā)現(xiàn)日本血吸蟲病是以肝實(shí)質(zhì)損害為主要特征的改變， 呈現(xiàn)的損傷應(yīng)考慮為肝組織特有的纖維化所致。其圖像表現(xiàn)為光帶、光斑、呈網(wǎng)狀分布，似“魚鱗”、“蛛網(wǎng)”、“龜背”狀特征性圖像； 膽囊壁厚度無明顯變化。

3 探討

近年來，病原學(xué)診斷技術(shù)的改進(jìn)，B型超聲波輔助診斷方法漸趨標(biāo)準(zhǔn)化，核酸探針和PCR技術(shù)的引入，推動了血吸蟲病診斷學(xué)的發(fā)展，但仍難以滿足當(dāng)前血吸蟲病防治的需要。免疫學(xué)診斷技術(shù)因有良好的敏感性，特異性和實(shí)用性，成為當(dāng)前血吸蟲病的常用診斷手段。朱劍君等對晚期血吸蟲病患者的肝組織學(xué)與肝纖維化指標(biāo)進(jìn)行相關(guān)性研究發(fā)現(xiàn)， 晚期血吸蟲病肝組織病理學(xué)纖維化分級與B 超肝纖維化分級基本一致。因此，超聲診斷慢性血吸蟲病具有很好的效果， 值得推廣應(yīng)用。

雖然慢性血吸蟲血清檢測指標(biāo)對診斷血吸蟲病具有較高的診斷價(jià)值，但是每一種批號的檢測試劑的靈敏性和特異性都有一定限度，因此， 在難以開展肝活檢的醫(yī)療機(jī)構(gòu)， 可聯(lián)合開展血清學(xué)指標(biāo)與B 超檢查， 作為診斷歷史血吸蟲病肝纖維化重要的非創(chuàng)傷性檢查手段。以便更客觀、準(zhǔn)確地反映肝纖維化的程度， 提高肝纖維化診斷的準(zhǔn)確性， 更好地指導(dǎo)臨床的預(yù)防和治療。

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