對雞大腸桿菌病治療藥物的篩選試驗(yàn)

摘 要：雞大腸桿菌病是由大腸埃希氏桿菌引起的急性敗血癥、心包炎、肝周炎、卵黃性腹膜炎、關(guān)節(jié)炎等為特征的傳染性疾病。通過藥敏試驗(yàn)篩選出對大腸桿菌不同程度敏感的藥物，即硫酸多粘菌素B、硫酸新霉素、頭孢噻呋、硫酸慶大霉素，對300羽大腸桿菌病雞隨機(jī)分成五組，進(jìn)行飲服治療試驗(yàn)。結(jié)果表明，硫酸多粘菌素B的治療效果最好，治愈率達(dá)91.7 %，頭孢噻呋治愈率為80 %，硫酸新霉素治愈率為76.6 %，硫酸慶大霉素治愈率為53.3 %。

關(guān)鍵詞：大腸桿菌?。涣蛩嵴硹U菌素；頭孢噻呋；硫酸新霉素；硫酸慶大霉素

中圖分類號：S852 文獻(xiàn)標(biāo)識碼：C 文章編號：1001-0769（2014）01-0043-01

雞大腸桿菌病一年四季均可發(fā)生，該病發(fā)病范圍廣，病死率高，各日齡雞均易感。大腸桿菌病可以單獨(dú)感染，但更多的是繼發(fā)感染；近年來與新城疫、傳染性支氣管炎、傳染性法氏囊病以及球蟲病等并發(fā)或繼發(fā)感染的病例明顯增多，從而使得雞因多重感染而迅速衰竭死亡，死亡率大幅增加，疫情難以從根本上得到控制。在生產(chǎn)中用于治療大腸桿菌病的藥物種類繁多，很多養(yǎng)殖戶在雞群發(fā)病后盲目、重復(fù)、超量用藥，造成該菌株產(chǎn)生耐藥性，使藥物治療達(dá)不到預(yù)期的效果。

1 材料和方法

1.1 試驗(yàn)材料

LB培養(yǎng)液；PBS緩沖液；麥康凱瓊脂、普通瓊脂、普通瓊脂斜面均按文獻(xiàn)配制；藥敏試紙購自上海藥物研究所；硫酸慶大霉素：590 IU，批號20090121；硫酸多粘菌素B片：20 000 IU，批號20090219；頭孢噻呋：600 IU，批號20090111；硫酸新霉素：750 IU，批號20090213；某養(yǎng)殖場30日齡發(fā)病羅斯308雞300羽；實(shí)驗(yàn)室常用儀器。

1.2 病原菌的分離培養(yǎng)

無菌采取具有敗血癥、心包炎、肝周炎等病理變化的病死雞肝組織50份，研磨后用PBS液懸浮并進(jìn)行反復(fù)吹打，分別接種于普通瓊脂和麥康凱瓊脂養(yǎng)基上，37 ℃培養(yǎng)24 h，挑選麥康凱瓊脂平板上磚紅色菌落接種普通瓊脂斜面進(jìn)行純培養(yǎng)，培養(yǎng)后膠塞密封，置4 ℃冰箱保存?zhèn)溆谩?/p>

1.3 藥敏試驗(yàn)

將分離純菌株接種于LB液中，經(jīng)37 ℃，230 r/min培養(yǎng)12 h；培養(yǎng)菌液在4 ℃，3 000 r/min離心，棄去上清液，用PBS液稀釋至10 mL，并反復(fù)吹打混勻，吸取100 μL稀釋液均勻涂布營養(yǎng)瓊脂平板，再放入藥敏紙片，置37 ℃培養(yǎng)24 h，觀察測量抑菌圈的大小并記錄結(jié)果。判定標(biāo)準(zhǔn)是抑菌圈直徑小于10 mm為抗藥，直徑在10～15 mm為中度敏感，直徑大于15 mm為高度敏感。

1.4 治療

試驗(yàn)選取30日齡發(fā)病雞300羽 ，隨機(jī)分成5組，每組60羽，各組給藥情況分別采取自由飲水與采食。第I組飲服硫酸新霉素30 mg/L（H2O）；第II組混飼硫酸多粘菌素2 mg/kg（飼料）；第III組混飼頭孢氨芐膠囊20 mg/kg（飼料）；第IV組混飼硫酸慶大霉素片 30 mg/kg（飼料）；第V組為對照組，不做治療。每日投藥1次，連續(xù)用藥5 d。在投藥期間，觀察雞的各種臨床反應(yīng)，記錄其精神狀況、食欲、是否呼吸困難、拉稀、死亡情況；剖檢是否可見心包炎、肝周炎等。并進(jìn)行統(tǒng)計成活率、死亡率評價治療效果。

2 結(jié)果

2.1 藥敏試驗(yàn)

2.2 藥物治療試驗(yàn)

3 討論

通過藥敏試驗(yàn)選擇高敏藥物，發(fā)現(xiàn)新分離的50株大腸桿菌對多粘菌素B的敏感性最高，高敏感株比達(dá)到 96 %，結(jié)合對雞大腸桿菌病進(jìn)行治療，能明顯觀察到病雞精神有所好轉(zhuǎn)，采食量上升，拉黃白稀糞便數(shù)量減少。在連續(xù)給藥5 d后，大多數(shù)雞的食欲恢復(fù)正常，拉黃白稀糞便數(shù)量明顯減輕或消失，根據(jù)治療效果顯示多粘菌素B的療效最好，治愈率達(dá)91 %，沒有出現(xiàn)死亡現(xiàn)象。頭孢噻呋、新霉素對大腸桿菌的藥敏感試驗(yàn)雖然高敏感菌株比相對較高，但在治療中發(fā)現(xiàn)，治愈率相對較低，分別為80 %和76.6 %，死亡率分別是10 %和15 %，這可能與該養(yǎng)殖場長期使用這兩種藥物有關(guān)，從而造成該菌株的耐藥性。硫酸慶大霉素的藥敏試驗(yàn)中敏感株比最低，結(jié)合治療試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)治愈率只有53.3 %，而死亡率達(dá)到31.7 %。說明上述四種藥物的藥敏試驗(yàn)以及對應(yīng)的治療試驗(yàn)相統(tǒng)一，因此在選擇治療雞大腸桿菌病的藥物上要充分考慮本場的實(shí)際用藥情況，對于經(jīng)常用于治療雞病的抗生素應(yīng)該做一些藥敏試驗(yàn)，選擇敏感性較高的藥物進(jìn)行治療，以免造成疫病擴(kuò)散或久治不愈，帶來不必要的經(jīng)濟(jì)損失。