應用TLC法鑒別區(qū)分中藥生品與炮制品的探討

摘要：目的： 探討應用薄層層析（TLC）法鑒別區(qū)分中藥生品與炮制品的可行性。方法：篩選臨床常用5種中藥材（地黃、何首烏、大黃、黃芩、黃精生品、炮制品）作為研究對象，采用TLC法進行鑒別區(qū)分，常規(guī)方法制備試品溶液。對照品選用5-羥甲基糠醛（5-HMF）、硅膠G層析板，展開劑采用石油醚（60～90℃）-乙酸乙酯（1：1），后對試品噴15%α-萘酚乙醇溶液，水浴90℃至斑點完全顯色，于日光下觀察，并對圖譜進行制表分析。結果 地黃、何首烏、大黃、黃精在于對照品色譜相應位置比較中，炮制品存在相同顏色的斑點，生品無相同顏色斑點，黃芩生品炮制品均顯現(xiàn)相同顏色的斑點。結論：應用TLC鑒別法可準確鑒別部分中藥生品與炮制品。

關鍵詞：TLC法；中藥生品；炮制品

【中圖分類號】R943.1 【文獻標識碼】A【文章編號】1002-3763（2014）02-0004-01

中藥的化學成分比較復雜，其經(jīng)過炮制后藥性會發(fā)生改變，部分中藥須經(jīng)炮熟后，才可表現(xiàn)出其特定的藥理效果[1]。通常炮制品可根據(jù)生品的薄層層析（TLC）法進行鑒別，研究發(fā)現(xiàn)，生地黃炮制后可檢測出5-羥甲基糠醛（5-HMF），而單純檢測生地黃中不含5-HMF，在何首烏的生品與炮制品TLC鑒別中也可根據(jù)5-HMF進行鑒別[2]。本次實驗探討應用TLC法以5-HMF為鑒別標準是否可準確區(qū)分中藥生品與炮制品，對臨床常用5種中藥材進行色譜分析，比較其炮制品與生品的色譜斑點區(qū)別。現(xiàn)報道如下：

1資料與方法

1.1 材料與儀器

篩選常用5種中藥地黃、何首烏、大黃、黃芩、黃精作為研究對象，所有中藥材根據(jù)《中華人民共和國藥典》進行炮制[3]。對照品由實驗室提供熟品何首烏中提取純度95%以上的5-HMF，硅膠G層析板、石油醚（60～90℃）、乙酸乙酯、15%α-萘酚乙醇均采用市場標準品（北京化學試劑公司）。應用薄層掃描成像系統(tǒng)（CAMAG）進行色譜分析。

1.2 實驗方法

將5-HMF混合95%乙醇制成50%濃度的5-HMF溶液，作為對照品。取5種中藥的生品與炮制品混合40ml 95% 乙醇超聲處理后進行過濾蒸干，濾渣混合無菌蒸餾水5ml，應用蒸餾水30ml洗脫過聚酰胺柱，采集洗脫液后低溫低壓蒸干（40℃以下），結晶再次混合95%乙醇溶解作為試品。將對照品與試品滴加至硅膠G層析板，展開劑石油醚（60～90℃）-乙酸乙酯（1：1）進行標本展開，干燥后噴以15%α-萘酚乙醇溶液進行加熱直至斑點完全顯色，日光下進行觀察色譜。每種藥材進行多次TLC鑒別，用以組內(nèi)比較消除誤差。

2結果

生地黃與熟地黃的TLC圖譜比較見圖1。通過圖1可發(fā)現(xiàn)生地黃與熟地黃檢測結果存在差異，熟地黃與對照品具有相同顏色斑點，生地黃不具有相同顏色斑點。

3 討論

薄層層析法（TLC）是一種分離混合物的技術，將被檢溶液滴加在具有吸附作用固定相的硅膠G層析板上，溶劑或流動相因毛細現(xiàn)象而發(fā)生向上移動，溶劑中不同的成分、分析物其在TLC硅膠G層析板上的移動速度不同，可達到對被檢溶劑的分離比較目的[3]。中藥成分極為復雜，而且中藥材需經(jīng)過炮生為熟才可發(fā)揮其不同的藥理作用，其生品與炮制品的藥效差異較為顯著，如生地黃可用于熱病舌絳煩渴，而熟地黃卻具有增強涼血止血功效。故準確的評價中藥方劑中的藥材生熟將直接影響中藥的治療效果。

文獻報道，部分中藥材炮制后可在其炮制品中檢測到5-羥甲基糠醛（5-HMF），為曼拉德反應產(chǎn)物之一，曼拉德反應是氨基化合物與還原糖化合物發(fā)生復雜的化合反應中，其廣泛存在于中藥的煎煮、炮制加熱中，特別是含糖中藥材[4]。而通過對本次實驗解果分析可知，地黃、何首烏、大黃、黃精在于對照品色譜相應位置比較中，炮制品存在相同顏色的斑點，生品無相同顏色斑點，黃芩生品炮制品均顯現(xiàn)相同顏色的斑點。在本次實驗中，黃芩的炮制品中未發(fā)現(xiàn)5-HMF，但并不能確定此標本為黃芩生品，因曼拉德反應主要受氨基酸種類、糖、溶液、PH、溫度等影像，并且中藥的炮制手法較多，炮制時間不一，可能對5-HMF檢測結果存在影響，在實驗中針對同一種藥材組內(nèi)進行檢測5-HMF可發(fā)現(xiàn)，炮制時間、溶液濃度、溫度的不同，雖結果均可檢測到相同顏色的斑點，但斑點大小存在差異，提示藥材炮制后的5-HMF濃度可與炮制手法、時間及其他影像因素有關。因此，TLC可初步鑒別區(qū)分部分中藥的生品與炮制品，而對于不能夠準確區(qū)分的藥材可應用多種方法綜合檢測，區(qū)分其生品與炮制品，以提高治療效果。

參考文獻：

[1]單學健.常用中藥生品、炮制品功效差異探討[J]. 中醫(yī)藥導報， 2012，18（7）：87-88.

[2]劉振麗，宋志前， 巢志茂， 等.何首烏生品與炮制品薄層層析鑒別方法研究[J].中國中醫(yī)藥信息雜志， 2009，16（3）：41-42.

[3]劉振麗， 陳其鋒， 宋志前， 等.TLC鑒別方法區(qū)別部分中藥生品與炮制品的研究[J]. 中藥材， 2008， 31（9）：1313-1314.

[4]黎進平.中藥TLC法鑒別檢驗中的幾點體會[J].中國藥師，2006，9（3）：276-277.