氨氯地平抗食餌性兔動脈粥樣硬化氧化損傷研究

郭翠艷

【摘 要】目的：觀察氨氯地平對食餌性兔動脈粥樣硬化氧化損傷的影響，探求氨氯地平抗動脈粥樣硬化（AS）機(jī)制。方法：在高膽固醇飲食基礎(chǔ)上建立兔AS模型，隨機(jī)分組，檢測各組兔主動脈AS面積、全血超氧化物歧化酶（SOD）活力、血清丙二醛含量及血清脂質(zhì)濃度。結(jié)果：氨氯地平組兔主動脈AS面積顯著降低（P<0.01），SOD活力明顯升高（P<0.01），丙二醛含量減少（P<0.01）。結(jié)論：氨氯地平通過改善抗氧化系統(tǒng)而延緩動脈粥樣硬化的進(jìn)程。

【關(guān)鍵詞】氨氯地平；動脈粥樣硬化；氧化損傷；辛伐他汀

【文章編號】1004-7484（2014）02-0717-02

氨氯地平是廣泛用于臨床的第三代新型長效l，4-二氫吡啶類鈣通道阻滯劑（calcium channel blockers，CCB）。近年來，許多研究資料提出氨氯地平在不降低血脂及血壓的條件下，可能通過抗氧化、減少炎性因子及細(xì)胞因子的生成，延緩AS進(jìn)程，但確切機(jī)制仍不清楚。本文通過動物試驗(yàn)觀察食餌性兔SOD-MDA系統(tǒng)的變化及氨氯地平對SOD-MDA系統(tǒng)的影響。

1 材料和方法

1.1 實(shí)驗(yàn)分組及造模 健康雄性純種新西蘭白兔24只，體重2.25±0.33kg，3個月齡。實(shí)驗(yàn)前適應(yīng)性飼養(yǎng)10天。隨機(jī)分為4組：⑴正常對照組（n=6）：基礎(chǔ)顆粒飼料120～150g/天；⑵AS模型組（n=6）：造膜飼料（基礎(chǔ)顆粒飼料+2%豬油+1%膽固醇）；⑶氨氯地平組（n=6）：造模飼料+氨氯地平；⑷辛伐他汀組（n=6）：造模飼料+辛伐他汀。各組動物分別在實(shí)驗(yàn)前經(jīng)耳中央動脈和24周實(shí)驗(yàn)結(jié)束時經(jīng)心腔采血檢驗(yàn)。

1.2血清總膽固醇（TC），甘油三酯（TG），高密度脂蛋白膽固醇（HDL-C），低密度脂蛋白膽固醇（LDL-C）測定 采血后立即分離血清，采用酶比色法檢測。

1.3血清丙二醛（MDA）測定 采用南京建成生物工程研究所提供的試劑盒通過硫代巴比妥酸法檢測。

1.4 全血超氧化物歧化酶（superoxide dismutase，SOD）活力測定 羥胺法檢測。每毫升反應(yīng)液中SOD抑制率達(dá)50%時所對應(yīng)的SOD量為一個活力單位。

1.5 兔主動脈AS面積測定 于實(shí)驗(yàn)24周末，在10%水合氯醛麻醉下，取各組動物主動脈標(biāo)本（由主動脈弓至腹主動脈分叉處），剝?nèi)ネ饽ぶ炯敖Y(jié)締組織，縱向剖開，生理鹽水沖洗后置于10%中性福爾馬林中固定。標(biāo)本經(jīng)蘇丹IV染色后應(yīng)用圖象分析儀測定主動脈內(nèi)膜脂質(zhì)斑塊面積百分比。

1.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理：采用SPSS11.5統(tǒng)計(jì)軟件分析數(shù)據(jù)。全部數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（ ）表示，用one-way ANOVA進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，組間比較用Student-Newman-Keuls法檢驗(yàn)，P <0.05為有顯著性差異。

2 結(jié)果

2.1 血脂水平測定結(jié)果 氨氯地平組較對照組血清TC、LDL-C、TG明顯升高（P <0.01）；氨氯地平組TC、LDL-C、TG與模型組無明顯差異（P >0.05）；氨氯地平組TC、LDL-C、TG水平高于辛伐他汀組（P <0.01）；（表1）

2.2 全血SOD活性和血清MDA含量的變化（表2） 與對照組相比，各組SOD活力下降，MDA含量升高（P <0.01）；氨氯地平、辛伐他汀組SOD活力較模型組升高有顯著性差異（P <0.01），而MDA則顯著低于模型組（P <0.01）。

2.3主動脈斑塊面積變化 正常對照組各實(shí)驗(yàn)兔斑塊面積為零。實(shí)驗(yàn)組均出現(xiàn)面積大小不等的不規(guī)則著色區(qū)。氨氯地平組和他汀組AS斑塊面積明顯低于模型組（P <0.01）（表2）。

3 討論

動脈粥樣硬化（Atherosclerosis，AS）是多種危險因素引發(fā)的一種慢性、進(jìn)行性的疾病過程。大量研究顯示氧化損傷在AS發(fā)生、發(fā)展中起重要作用。高膽固醇血癥時，自由基釋放系統(tǒng)激活，超氧陰離子（O2-）等活性氧大量生成[1]，引起局部脂質(zhì)過氧化損傷，大量的LDL被氧化，同時細(xì)胞內(nèi)氧化應(yīng)激信號選擇性誘導(dǎo)炎癥相關(guān)基因表達(dá)，推動AS發(fā)展[2]?？梢?，改善血管壁的氧化狀態(tài)，抗氧化損傷是防治AS的重要環(huán)節(jié)。

氨氯地平是二氫吡啶類鈣通道阻滯劑，近年來大量研究顯示氨氯地平可能通過抗炎、改善內(nèi)皮功能、穩(wěn)定斑塊等多種機(jī)制發(fā)揮抗AS作用。其獨(dú)特的化學(xué)結(jié)構(gòu)和鈣通道阻滯作用，被認(rèn)為具有抗氧化性質(zhì)[3]。超氧化物歧化酶（SOD）是體內(nèi)抗氧化系統(tǒng)中重要的酶，可以歧化氧離子，并進(jìn)一步轉(zhuǎn)化為水和氧氣，維持機(jī)體正常的生理功能，免受自由基損傷。丙二醛（MDA）則是脂質(zhì)過氧化產(chǎn)物之一，常用來反映機(jī)體的脂質(zhì)過氧化程度，一定情況下代表了體內(nèi)過氧化損傷的程度。本研究顯示，模型組SOD活力明顯降低，MDA含量顯著升高，表明高膽固醇血癥損傷了動脈壁的抗氧化機(jī)能，抗氧化系統(tǒng)酶活性下降，導(dǎo)致脂質(zhì)過氧化物清除障礙，其分解代謝產(chǎn)物MDA含量增加，加重局部的損傷[4]。氨氯地平組SOD活力較模型組顯著升高（P <0.01），而MDA含量明顯下降（P <0.01）。同時辛伐他汀組SOD活力升高和MDA水平下降，這一結(jié)果與Chen L研究結(jié)果一致[5]。表明氨氯地平與辛伐他汀改善動脈壁的抗氧化能力，具有抗氧化損傷的作用。通過血脂檢測顯示辛伐他汀組TC、TG、LDL-C水平下降，而氨氯地平組TC、LDL-C、TG水平與模型組比較無明顯差異（P >0.05），說明其抗氧化損傷作用與血脂水平無關(guān)。

本研究同時觀察了藥物對AS斑塊面積的影響，發(fā)現(xiàn)藥物組斑塊面積較模型組明顯減少（P<0.01），提示氨氯地平延緩AS進(jìn)程。其抗AS作用并非經(jīng)降血脂起作用，抗氧化損傷可能是其抗AS重要機(jī)制。

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