河川沙塘鱧雌雄親魚肌肉中脂肪酸含量的比較研究

楊崴等

摘要 [目的] 對河川沙塘鱧雌、雄魚親魚肌肉中脂肪酸含量進行比較。[方法] 以不同生殖時期（III、IV和V期）的河川沙塘鱧雌、雄魚親魚為研究對象，采用氯仿-甲醇溶液抽提法和氣相色譜法分析其肌肉脂肪酸組成的變化。[結(jié)果] 在雌、雄親魚肌肉中檢測到27種脂肪酸，不飽和脂肪酸含量豐富。在河川沙塘鱧雌魚肌肉中n-3系列脂肪酸含量基本保持不變，n-6系列脂肪酸含量在III期達到最高值，在V期達到最低值，n-6系列脂肪酸主要被用于卵巢的發(fā)育。在河川沙塘鱧雄魚肌肉中，在IV期n-6系列脂肪酸含量達到最大值，為精巢的發(fā)育儲存能源。雌、雄親魚肌肉中n-3系列脂肪酸含量大于n-6系列脂肪酸。[結(jié)論] 該研究為開展河川沙塘鱧的人工增養(yǎng)殖提供理論指導。

關鍵詞 河川沙塘鱧；脂肪酸含量；雌、雄親魚；比較

中圖分類號 S965.199 文獻標識碼

A 文章編號 0517-6611（2014）03-00798-03

Abstract [Objective] The research aimed to compare the content of fatty acid in the muscles of female and male Odontobutis potamophila. [Method] Taking female and male ontobutis potamophila in different reproductive stages（III，IV and V stages） as the research objects， the changes of fatty acid composition in the muscles were analyzed by using chloroform-methanol extraction method and gas chromatography.[Result] 27 kinds of fatty acids were detected in the muscles of male and female O. potamophila and there was rich unsaturated fatty acids in the muscles. The content of n-3 fatty acids remained unchanged in the muscles of female O. potamophila. The content of n-6 fatty acids reached the maximum at III stage and the minimum at V stage. n-6 fatty acids were mainly used the development of ovaries. In the muscles of male O. potamophila， the content of n-6 fatty acids reached the maximum at IV stage， which stored energy for the development of testis. The content of n-3 fatty acids in the muscles of female . potamophila was higher than that of n-6 fatty acids. [Conclusion] The research provided theoretical guide for the artificial culture of O. potamophila.

Key words Odontobutis potamophila；Fatty acid content；Male and female fish；Comparison

河川沙塘鱧（Odontobutis potamophila），隸屬鱸形目（Perciformes）沙塘鱧科（Odontobutidae），分布在我國長江中下游及其支流、錢塘江水系、閩江水系等，是我國江蘇太湖地區(qū)最為常見的底棲肉食性經(jīng)濟魚類，深受沿海地區(qū)人們的喜愛[1-2]。大力發(fā)展河川沙塘鱧的人工增養(yǎng)殖具有重要的經(jīng)濟意義。目前，有關河川沙塘鱧的研究主要集中在早期發(fā)育[3-6]，其中脂類含量及脂肪酸組成的研究主要集中在胚胎和仔魚時期[7]，而對親魚的脂類含量及脂肪酸組成的研究較少。筆者以不同生殖時期的河川沙塘鱧雌、雄魚親魚為研究對象，分析其肌肉的脂肪酸組成的變化，旨為開展河川沙塘鱧的人工增養(yǎng)殖提供理論指導。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

試驗材料為河川沙塘鱧雌、雄親魚，2012 年 4 月自上海市銅川路水產(chǎn)品集貿(mào)市場購買。根據(jù)性腺發(fā)育周期，分別在III、IV和V期各取樣 8 尾，取其背部肌肉保存于-80 ℃低溫冰箱中，待測。

1.2 試驗方法

1.2.1 脂肪酸組分的測定。參照國家標準GB/T22223-2008，采用水解提取-氣相色譜法測定。

1.2.1.1 脂肪酸的提取。準確稱取均勻搗碎的樣品1 g，置于玻璃離心管內(nèi)，依次加氯仿 20 ml、甲醇10 ml、水 2 ～ 3 ml，蓋上蓋子，超聲 10 min 后再振蕩 2 h。靜置 22 h 后，3 500 r/min 離心 10 min，分層后取下層氯仿層，過濾紙 （濾紙上放 20 g 烘干過的無水硫酸鈉） ，濾液置于干燥的燒瓶中，在真空干燥箱內(nèi)烘干。

1.2.1.2 脂肪酸的甲酯化。在盛有脂肪提取物的燒瓶 （250 ml） 中加入2%氫氧化鈉溶液8 ml，接連回流冷凝器于 80 ℃水浴回流，直至油滴消失； 從回流冷凝器上端加入 15% 三氟化硼甲醇溶液 7 ml，在80 ℃ 水浴中繼續(xù)回流 2 min； 用去離子水沖洗回流冷凝器。停止加熱，從水浴鍋上取下燒瓶，迅速冷卻至室溫，準確加入正庚烷10 ～30 ml，振搖2 min，再加入飽和氯化鈉水溶液，靜置分層。吸取上層正庚烷提取溶液 5 ml，轉(zhuǎn)移至小型試管 （30 ml） 中，加入無水硫酸鈉 3 ～5 g，振搖 1 min，靜置 5 min，吸取上層溶液到進樣瓶中，待測。

1.2.1.3 色譜測定。取脂肪酸甲酯標準溶液 1.0 μl和各單個脂肪酸甲酯標準溶液注入氣相色譜儀，測定標準溶液的響應值 （峰高或峰面積），得到每個脂肪酸甲酯的相對保留時間和氣相色譜圖。取1.0 μl樣液注入氣相色譜儀，測定試樣的響應值（峰高或鋒面積），經(jīng)過與標準溶液譜圖比較響應值得到試樣中脂肪酸甲酯的含量。

1.2.2 數(shù)據(jù)處理。利用 Excel 2003軟件對試驗數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計與分析，文中描述性統(tǒng)計值用平均值±標準差表示。

2 結(jié)果與分析

由表1可知，

在生殖期河川沙塘鱧雌、雄親魚的肌肉中共檢測到27種脂肪酸，其中，飽和脂肪酸8種，單不飽和脂肪酸7種，多不飽和脂肪酸12種[8]。在河川沙塘鱧雌魚親魚肌肉中飽和脂肪酸含量占總脂肪酸含量的33.37%～35.26%，含量較高的種類是C16∶0和C18∶0；單不飽和脂肪酸含量占總脂肪含量的20.71%～23.95%，含量較高的種類是C16∶1和C18∶1n9c；多不飽和脂肪酸含量占總脂肪含量的42.68%～45.09%，含量較高的種類是C22∶6n3和C20∶4n6；其中n-3、n-6系列脂肪酸含量分別占總脂肪酸含量的21.99%～22.61%和18.67%～20.91%，n-3系列脂肪酸含量與n-6系列脂肪酸含量的比值均大于1。在河川沙塘鱧雄魚親魚肌肉中飽和脂肪酸含量占總脂肪酸含量的33.50%～34.59%，單不飽和脂肪酸含量占總脂肪酸含量的22.82%～23.35%，多不飽和脂肪酸含量占總脂肪酸含量的42.59%～43.15%，其中n-3、n-6系列脂肪酸含量分別占總脂肪酸含量的23.38%～26.68%和14.04%～16.91%，n-3系列脂肪酸含量與n-6系列脂肪酸含量的比值均大于1。

在河川沙塘鱧雌、雄親魚肌肉中，河川沙塘鱧雌魚親魚飽和脂肪酸含量占總脂肪酸含量的比例整體上呈先降低后上升的趨勢，其中C20∶0和C24∶0的含量在III期為0。河川沙塘鱧雄魚親魚飽和脂肪酸含量占總脂肪酸含量的比例在III期最低，進入IV期明顯增加，V期沒有顯著變化，其中C14：0、C15∶0和C16∶0含量呈上升趨勢。河川沙塘鱧雌魚單不飽和脂肪酸含量占總脂肪酸含量的比例整體上呈上升趨勢，其中C16∶1含量呈先下降后上升趨勢，C20∶1n9含量呈先上升后下降的趨勢，C22∶1n9只存在于V期中。河川沙塘鱧雄魚單不飽和脂肪酸含量占總脂肪酸含量的比例整體上呈先下降后上升的趨勢，其中C16∶1和C24∶1n9含量呈先上升后下降趨勢，C17∶1含量呈上升趨勢，C18∶1n9t之存在于III期中。河川沙塘鱧雌魚多不飽和脂肪酸含量占總脂肪酸含量呈下降趨勢，其中C18∶3n6只存在于V期，Ⅲ期C22∶2的含量為0。河川沙塘鱧雄魚親魚飽和脂肪酸含量在III期占總脂肪酸含量最低，在IV期有所增加，V期沒有明顯變化。

3 討論

與大多數(shù)魚類一樣，在河川沙塘鱧雌、雄親魚肌肉飽和脂肪酸中C16∶0含量最高[9-11]，約為20%，C16∶0是一種基礎脂肪酸，能提供能量和轉(zhuǎn)化為其他脂肪酸。各發(fā)育時期河川沙塘鱧雌、雄親魚肌肉中的不飽和脂肪酸含量極為豐富[1，12]，其中河川沙塘鱧雌魚親魚肌肉中III～V期不飽和脂肪酸含量分別為65.8%、64.74%和66.63%；河川沙塘鱧雄魚親魚肌肉中III～V期不飽和脂肪酸含量分別為66.5%、65.41%和65.51%。在河川沙塘鱧雌、雄親魚肌肉中不飽和脂肪酸含量最高的是C18∶1n9c，河川沙塘鱧雌魚在V期達到最高值（15.73%）；河川沙塘鱧雄魚在III期達到最高值（17.74%）。當食物中PUFA缺乏時，C18∶1n9通過去飽和并加長碳鏈而合成C20∶3n3，C20∶3n3可以作為體內(nèi)PUFA缺乏的判斷指標[13]。在河川沙塘鱧雌魚III～V期肌肉中，C20∶3n3的含量均為0，河川沙塘鱧雄魚IV期肌肉中，C20∶3n3含量為0，III期和V期分別為0.2%和0.29%，且C18∶1n9含量高，說明在河川沙塘鱧雌、雄親魚肌肉中，PUFA含量充足[14]。

絕大數(shù)淡水魚都具有一定的生物轉(zhuǎn)化能力，發(fā)育過程中的必需脂肪酸是n-3系列和n-6系列的多不飽和脂肪酸[15]，最主要是C18∶3n3和C18∶2n6[16]。在河川沙塘鱧雌魚肌肉中，C18∶3n3和EPA含量呈先下降后上升的趨勢，DHA呈先上升后下降的趨勢；在河川沙塘鱧雄魚肌肉中C18∶3n3呈先下降后上升的趨勢，EPA和DHA呈先上升后下降的趨勢。很有可能是在河川沙塘鱧雌魚IV期肌肉中，C18∶3n3和EPA被用于合成和轉(zhuǎn)化為DHA[17]，在V期DHA被消耗，含量降低；河川沙塘鱧雄魚IV期肌肉中，C18∶3n3被用于合成EPA和DHA，含量降低，在V期，EPA和DHA被消耗，含量降低。

河川沙塘鱧雌魚肌肉中，n-3系列脂肪酸含量基本保持不變，n-6系列的脂肪酸含量在III期最高，達到20.91%，在V期最低，只有18.67%，有可能是因為n-6系列的脂肪酸被用于卵巢的發(fā)育。在河川沙塘鱧雄魚肌肉中，n-3系列脂肪酸含量在IV期急劇降低，可能是因為n-3系列的脂肪酸被用于主要的能源物質(zhì)被消耗掉，而n-6系列的脂肪酸含量達到最大值，為精巢的發(fā)育儲存能源。河川沙塘鱧雌、雄親魚肌肉中，n-3/n-6值在1.08～1.9范圍內(nèi)變動，這符合淡水魚類的n-3/n-6多不飽和脂肪酸的比例關系[18]。

參考文獻

[1] 伍漢霖，吳小清，解玉浩.中國沙塘鱧屬魚類的整理和一新種的敘述 [J].上海水產(chǎn)大學學報，1993，2（1）：52-58.

[2] 孫幗英，郭學彥.太湖河川沙塘鱧的生物學研究 [J].水產(chǎn)學報，1996（3）：193-201.

[3] 胡先成.河川沙塘鱧早期發(fā)育過程中的器官發(fā)生、營養(yǎng)代謝及其能量收支的研究[D].上海：華東師范大學，2007：1-123.

[4] 胡先成，周忠良，趙云龍，等.河川沙塘鱧孵化腺的發(fā)生及孵化酶的分泌[J].動物學報，2007，53 （3）：511-518.

[5] 胡先成，趙云龍 .河川沙塘鱧視覺器官的發(fā)育及其與攝食的關系[J].動物學雜志，2007，42 （5）：41-48.

[6] 翁敏嬋，郭莎園，胡先成 .河川沙塘鱧早期發(fā)育過程中耗氧率及 NH3-N 排泄率的變化[J].重慶師范大學學報，2010（5）：14-18.

[7] 胡先成，趙云龍 .河川沙塘鱧胚胎、仔魚發(fā)育過程中脂類含量及脂肪酸組成的變化[J].淡水漁業(yè)，2008（3）：46-50.

[8] 朱嘉潔，胡先成.生殖季節(jié)河川沙塘鱧雌魚親魚卵巢的脂類含量及脂肪酸組成變化[J].湖北農(nóng)業(yè)科學，2012，16（8）：47-50.

[9] WATANABE T，ARAKWA T，KITAJIMA C，et al.Effect of nutri-tional quality of broodstock diets on reproduction of red seabream[J].Nippon Saisan Gakkaishi，1984，50： 495-501.

[10] JOHN SARGENT，LESLEY MCEVOY，ALICIA ESTEVEZ，et al.Lipid nutrition of marine fish during early development：current status and future directions[J].Aquaculture，1999，179： 217-229.

[11] 姚俊杰，趙云龍，李川，等.黃顙魚胚胎發(fā)育早期脂肪酸變化的研究[J].水產(chǎn)科學，2009，（11）： 644-647.

[12] 陳 濤，于丹，趙鑫，等.繁殖期雌性江黃顙魚的脂肪酸組成分析[J].廣西農(nóng)業(yè)科學，2010，41（3）： 66-69.

[13] DESVILETTES C，BOURDIER G，BRETON J C.Changes in lipid class and fatty acid composition during development in pike（Esox lucius L.） eggs and larvae[J].Fish Physiol Biochem，1997，16：381～393.

[14] 謝仰杰，孫幗英.河川沙塘鱧的胚胎和胚后發(fā)育以及溫度對胚胎發(fā)育的影響[J].廈門水產(chǎn)學院學報，1996，18（1）：55-62.

[15] SARGENT J R，BELL J G，BELL M V，et al.Requirement criteria for essential[J].Appl Ichthyol，1995，11：183-189.

[16] GUNASEKERA R M，DE SILVA S S，INGRAM B A.Early ontogeny-re-lated changes of the fatty acid composition in the Percichthyid fi-shes trout cod，Maccullochellamacquariensis and Murray cod，M.peelii peelii [J].AquatLiving Resour，1999，12（3）： 219-227.

[17] HENDERSONR J，PARKM T，SARGENT J R.The desaturation and e-longation of14C-labelled polyunsaturated acids by pike（Esox lucius L.）in vivo[J].Fish Physiol Biochem，1995，14： 223-235.

[18] HENDERSON R J，TOCHER D R.The lipid composition and biochem-istry of freshwater fish[J].Prog Lipid Res，1987，26： 281-347.