血清高爾基體蛋白73檢測在肝細(xì)胞癌診斷中的應(yīng)用

孫學(xué)青 朱新興 殷立奎 李志城

【摘 要】目的：檢測血清高爾基體蛋白73（GP73）的含量，并比對血清甲胎蛋白（AFP），以探討GP73在肝細(xì)胞癌（HCC）診斷中的應(yīng)用價值。 方法：收集HCC患者65例、肝炎或 肝硬化（CH/LC）患者54例、正常健康人員（正常對照組）48例血清樣本，分別采用酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）定量檢測GP73及電化學(xué)發(fā)光法檢測AFP。 結(jié)果：正常對照組、CH/LC組、HCC組血清GP73濃度分別為（20.3±7.6）ng/ml、（79.6±51.4）ng/ml、（268.5±199.2）ng/ml，HCC組GP73水平明顯高于CH/LC組（p<0.001）。HCC標(biāo)本中GP73的陽性率為66.2%、AFP的陽性率為30.8%，兩者差異有統(tǒng)計學(xué)意義（p<0.01）。在非HCC患者中GP73的診斷特異性為92.2%（94/102），AFP的診斷特異性為77.4%（79/102）， 兩者差異有統(tǒng)計學(xué)意義（p<0.05）。 結(jié)論：GP73作為HCC診斷的良好血清標(biāo)志物，明顯提高了HCC診斷的靈敏度特異性， GP73的檢測受肝部炎癥影響很小且不受AFP濃度的影響。

【關(guān)鍵詞】肝細(xì)胞癌（HCC）；高爾基體蛋白73（GP73）；甲胎蛋白（AFP）

【文章編號】1004-7484（2014）04-1896-01

Detection of serum Golgi protein 73 in hepatocellular carcinoma diagnosis Exploration

Sun Xueqing， Zhu Xinxing， Yin Likui， Li Zhicheng

（Dongying City， Shandong Province People's Hospital， 257091）

【Abstract】Objective：serum Golgi protein 73 （GP73） content and ratio of serum alpha-fetoprotein （AFP）， to explore the GP73 in hepatocellular carcinoma （HCC） diagnosis value. Methods：65 patients with HCC， hepatitis or cirrhosis （CH / LC） 54 patients， normal healthy people （control group） 48 cases of serum samples were used enzyme-linked immunosorbent assay （ELISA） and quantitative detection of GP73 electrochemiluminescence detection of AFP. Results：normal control group， CH / LC group， HCC GP73 serum concentrations were （20.3 ± 7.6） ng / ml， （79.6 ± 51.4） ng / ml， （268.5 ± 199.2） ng / ml， HCC group were significantly higher levels of GP73 in CH / LC group （p <0.001）. HCC specimens GP73 positive rate of 66.2%， AFP positive rate of 30.8%， the difference was statistically significant （p <0.01）. In the non-HCC patients GP73 diagnostic specificity was 92.2% （94/102）， AFP diagnostic specificity was 77.4% （79/102）， the difference was statistically significant （p <0.05）. Conclusion GP73 good as diagnosis of HCC serum markers， significantly improved the sensitivity and specificity of diagnosis of HCC， GP73 detection by inflammation of the liver has little effect and is not AFP concentration.

【Key words】hepatocellular carcinoma （HCC）； Golgi protein 73 （GP73）； alpha-fetoprotein （AFP）

肝細(xì)胞癌（HCC）的增長速度之快已成為一個世界性難題，其發(fā)病率在全球位居第4位，總發(fā)病患者約56.4萬[1]。在我國由于乙型肝炎病毒（HBV）攜帶者數(shù)量之龐大，與此相關(guān)的HCC患者已占世界的55%左右，其死亡率在惡性腫瘤中排第2位。在過去相當(dāng)長的時間里，早期HCC主要依靠影像學(xué)手段及血清甲胎蛋白（AFP），但影像學(xué)檢查對腫瘤體積較小者不易被發(fā)現(xiàn)；臨床上最常用的AFP也因其敏感性（39%-64%）不高并不令人滿意[2]。近年來研究發(fā)現(xiàn)多種物質(zhì)如AFP-L3、磷脂酰肌醇蛋白聚糖3（GPC3）及腫瘤生長因子（TGF）等可用于早期診斷HCC，其中高爾基體蛋白 73（GP3）被認(rèn)為是最具潛力的診斷HCC的血清標(biāo)志物之一。

1 資料與方法

1.1 一般資料 167例血清標(biāo)本來自我院2011年2月至2012年6月門診或住院患者及體檢人員，其中肝細(xì)胞癌（HCC）患者65例，肝炎或肝硬化（CH/LC）患者54例，正常健康人員（正常對照組）48例，男性116例，女性51例，年齡18-79歲。肝病診斷標(biāo)準(zhǔn)及腫瘤診斷標(biāo)準(zhǔn)符合2000年中華醫(yī)學(xué)會傳染病與寄生蟲病學(xué)分會、肝病學(xué)分會聯(lián)合修訂的“病毒性肝炎防治方案”中病毒性肝炎診斷標(biāo)準(zhǔn)及中華人民共和國衛(wèi)生院部醫(yī)政司組織并由全國腫瘤防治辦公室與中國抗癌協(xié)會合編的《新編常見惡性腫瘤診治規(guī)范》中有關(guān)原發(fā)性肝癌等腫瘤疾病的診斷標(biāo)準(zhǔn)，其中影像學(xué)為B超檢查結(jié)果。正常健康人員病毒學(xué)檢測、肝功能檢測項目均為陰性。采集血液標(biāo)本4ml以3000r/min離心30min，分離血清，-80℃冰箱保存集中檢測。

1.2 方法 GP73檢測采用雙抗體夾心酶聯(lián)吸附法定量檢測，ELISA試劑盒由北京熱景生物技術(shù)有限公司提供，肝細(xì)胞癌判定值為≥150ng/ml；AFP檢測采用cobas601羅氏電化學(xué)發(fā)光免疫分析系統(tǒng)（瑞士Roche公司），肝細(xì)胞癌判定值為≥400 ng/ml。

1.3 統(tǒng)計學(xué)方法 應(yīng)用SPSS13.0軟件系統(tǒng)進(jìn)行統(tǒng)計分析，均數(shù)比較用t檢驗，檢出率比較用X2檢驗，以P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 血清GP73表達(dá)水平

GP73在所有標(biāo)本中均有表達(dá)。正常對照組GP73水平最低（20.3±7.6）ng/ml；CH/LC組GP73水平為（79.6±51.4）ng/ml；兩者差異有統(tǒng)計學(xué)意義（p<0.01）。HCC組GP73水平為（268.5±199.2 ）ng/ml，與正常對照組和CH/LC組比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（p<0.01）。2.2 HCC和非HCC血清中GP73和AFP檢出率比較

在65例HCC患者血清中GP73檢出陽性43例，陽性率為66.2%；AFP檢出陽性20例，陽性率為30.8%，兩者差異有統(tǒng)計學(xué)意義（p<0.01）。在共計102例非HCC血清標(biāo)本中GP73檢出陽性8例，陽性率為7.8%；AFP檢出陽性23例，陽性率為22.5%，兩者差異有統(tǒng)計學(xué)意義（p<0.01）。

2.3 CH/LC組、正常對照組血清中GP73和AFP檢出率比較

在54例 CH/LC患者中GP73檢出陽性6例，陽性率為11.1%；AFP檢出陽性15例陽性率為27.8%，兩者差異有統(tǒng)計學(xué)意義（p<0.05）。在48例正常對照組中GP73檢出2例，AFP檢出例。3。在非HCC患者中GP73的診斷特異性為92.2%（94/102），AFP的診斷特異性為77.4%（79/102）， 兩者差異有統(tǒng)計學(xué)意義（p<0.05）。

3 討論

GP73在多種組織中均有表達(dá)，但強(qiáng)弱不等。在小腸、結(jié)腸以及胃中呈高表達(dá)，而在心臟中表達(dá)很少，在肝、腎、脾、肺、子宮及睪丸表達(dá)很弱但能檢出。在正常肝臟組織GP73主要表達(dá)于膽管上皮細(xì)胞，而在肝細(xì)胞則無表達(dá)或表達(dá)很少，但是在有HBV及腺病毒感染的肝組織中，膽管細(xì)胞表達(dá)GP73改變不明顯，而在肝細(xì)胞則呈高表達(dá)。GP73的異常表達(dá)與肝細(xì)胞癌密切相關(guān)。Block等科研小組首先用HBV感染土撥鼠建立HCC模型，應(yīng)用糖蛋白組學(xué)手段分析了患有HCC組和正常組血清中的蛋白表達(dá)差異，結(jié)果發(fā)現(xiàn)HCC組血清中出現(xiàn)一個明顯增強(qiáng)的FcA2G2組分，進(jìn)一步分析發(fā)現(xiàn)其代表了GP73組分，從而推測其可能是HCC的重要腫瘤標(biāo)志物，并在HCC患者中得到證實。此后，國外多項研究也證實了HCC患者血清中GP73含量較其他疾病高，并且在HCC患者其敏感性較AFP高。HCC患者一旦發(fā)現(xiàn)基本上為晚期，被公認(rèn)為“金標(biāo)準(zhǔn)”的血清學(xué)指標(biāo)AFP已在全球范圍內(nèi)廣泛用于普查、診斷、療效判斷及復(fù)發(fā)監(jiān)測但其敏感性不高，且有報道認(rèn)為在其他疾病中亦有升高。GP73作為早期診斷HCC的潛在血清腫瘤標(biāo)志物和我國肝癌高危人群的龐大基數(shù)，使GP73研究對降低我國肝癌病死率有著尤為重要意義，多項研究證實其在HCC患者血清中升高[3]。本研究中，GP73在所有標(biāo)本中均有表達(dá)，在HCC患者中GP73的陽性率為66.2%高于AFP的陽性率30.8%，兩者差異有統(tǒng)計學(xué)意義（p<0.01）。在非HCC患者中GP73的診斷特異性為92.2%，AFP的診斷特異性為77.4%。 GP73用于診斷HCC的靈敏度和特異性均優(yōu)于AFP。AFP在CH/LC患者中檢出陽性率為27.8%；而GP73在CH/LC患者中檢出陽性率為11.1%，兩者差異有統(tǒng)計學(xué)意義（p<0.05）。結(jié)果顯示AFP診斷HCC容易受到肝部炎癥的影響，而 GP73診斷HCC則受肝部炎癥影響很小且不受AFP濃度的影響?？傊珿P73是診斷HCC的良好血清標(biāo)志物。

參考文獻(xiàn)

[1] Jemal A，Siegel k，Ward E，Hao Y，Xu J，Murray T，Thun MJ.cancer statistics.2008.CA Cancer J clin.2008；58：71—98

[2] 徐海峰，楊華渝，張宏冰，毛一雷.改變肝癌早期診斷和治療現(xiàn)狀的新肝癌血清標(biāo)志物.基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)與臨床[J].2008；28：103—109

[3] 李淑群，陳謙. GP73與肝臟疾病關(guān)系的研究進(jìn)展. 世界華人消化雜志[J].2010；18（20）：2117—2120