鹽酸嗎啉胍的藥理活性及其檢測(cè)方法的研究進(jìn)展

（浙江大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬第一醫(yī)院，浙江 杭州 310003）

鹽酸嗎啉胍的藥理活性及其檢測(cè)方法的研究進(jìn)展

方艷艷

（浙江大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬第一醫(yī)院，浙江 杭州 310003）

鹽酸嗎啉胍為抗病毒藥，主要用于流感病毒及皰疹病毒感染，不良反應(yīng)較少，效果明顯。本文綜述了鹽酸嗎啉胍的藥理活性和檢測(cè)方法的最新研究進(jìn)展，以期對(duì)鹽酸嗎啉胍的開發(fā)提供參考。

鹽酸嗎啉胍；藥理活性；檢測(cè)方法

鹽酸嗎啉胍（ABOB，又名病毒靈），能抑制病毒的DNA和RNA聚合酶的活性及蛋白質(zhì)的合成，從而抑制病毒繁殖[1]?？捎糜谥委熈鞲?、出血性結(jié)膜角膜炎、流行性腮腺炎、皰疹、流行性出血熱、扁平疣、早期的咽結(jié)膜熱等。因此，建立快速、簡便、準(zhǔn)確的分析方法對(duì)藥物分析、藥理研究等具有重要意義。本文綜述了鹽酸嗎啉胍的檢測(cè)方法，使用儀器包括滴定管、紫外可見分光光度計(jì)、高效液相色譜儀等，并且探討了其藥理活性，以期為鹽酸嗎啉胍在醫(yī)藥領(lǐng)域的深入開發(fā)提供依據(jù)和思路。

1 鹽酸嗎啉胍結(jié)構(gòu)特點(diǎn)及藥理活性研究

1.1 鹽酸嗎啉胍的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)

圖1為鹽酸嗎啉胍的結(jié)構(gòu)式，對(duì)應(yīng)的分子式C6H13N5O·HCl，相對(duì)分子質(zhì)量為207.66。鹽酸嗎啉胍特殊的分子結(jié)構(gòu)決定了它的性質(zhì)，一方面，鹽酸嗎啉胍分子直接與蛋白質(zhì)的官能團(tuán)結(jié)合，另一方面通過改變水的結(jié)構(gòu)，間接引起蛋白質(zhì)疏水基團(tuán)周圍水氫鍵結(jié)構(gòu)的變化，二者協(xié)同作用下，使得蛋白質(zhì)變性而達(dá)到抗病毒的效果[2]。

圖1 鹽酸嗎啉胍的結(jié)構(gòu)式

1.2 鹽酸嗎啉胍的藥理活性研究

20世紀(jì)70年代，德國首先將鹽酸嗎啉胍用作植物殺蟲劑。隨著科技的不斷進(jìn)步，人們逐漸發(fā)現(xiàn)鹽酸嗎啉胍在抗病毒方面獨(dú)特的作用，鹽酸嗎啉胍的用途正在逐漸擴(kuò)大，用量也在逐漸增大。

鹽酸嗎啉胍系病毒抑制劑，主要用于各種流感病毒及皰疹病毒的感染。其能夠抑制病毒的DNA和RNA聚合酶，從而抑制病毒繁殖。國外曾有人用于治療和預(yù)防甲型流感，其能阻礙流感病毒DNA合成；國內(nèi)研究者對(duì)鹽酸嗎啉胍的抗病毒藥理活性也進(jìn)行了一系列研究[3,4]。上海市松江醫(yī)院針對(duì)5例流行性腮腺炎，利用鹽酸嗎啉胍進(jìn)行治療，效果顯著；嚴(yán)紹明等利用對(duì)照分析法對(duì)102例秋季腹瀉患兒用鹽酸嗎啉胍進(jìn)行常規(guī)治療，對(duì)鹽酸嗎啉胍老藥新用，治療患兒秋季腹瀉取得一定療效；李人范等針對(duì)60例咽結(jié)膜熱腺病毒感染患者，用鹽酸嗎啉胍進(jìn)行了對(duì)照治療，對(duì)鹽酸嗎啉胍有效治療早期病毒感染進(jìn)行了肯定。

2 鹽酸嗎啉胍的檢測(cè)方法

2.1 非水滴定法

非水滴定法即在非水溶劑中進(jìn)行的滴定分析方法。楊懷鏡等[5]分別通過直接取樣品進(jìn)行非水滴定和樣品提純后進(jìn)行非水滴定實(shí)驗(yàn)，經(jīng)檢測(cè)后發(fā)現(xiàn)，雜質(zhì)的存在對(duì)滴定的結(jié)果有明顯的影響，且影響程度隨雜質(zhì)在樣品中的量增加而增大。說明利用非水滴定法檢測(cè)時(shí)，鹽酸嗎啉胍對(duì)共存的物質(zhì)較為敏感；另一方面非水滴定的操作較為繁瑣，不利于鹽酸嗎啉胍的快速檢測(cè)。

2.2 紫外可見分光光度（UV）法

目前，紫外分光光度計(jì)是檢測(cè)行業(yè)最普及的分析儀器。①普通紫外分光光度法：馮影[6]、劉文華[7]等采用紫外分光光度法檢測(cè)鹽酸嗎啉胍的濃度。首先配制一系列不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液用以繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，其2～12 mg/L范圍內(nèi)，濃度與吸光度線性相關(guān)度良好；然后稱取鹽酸嗎啉胍片劑若干，用以配制待測(cè)溶液；新置溶液經(jīng)過提純處理后（包括過濾、稀釋等），進(jìn)行吸收度的測(cè)定。因此，相對(duì)于非水滴定法測(cè)定鹽酸嗎啉胍片的含量，使用分光光度法其操作更加簡便、快速，測(cè)定結(jié)果能客觀地反映該藥品的含量。②雙波長分光光度法：雙波長分光光度法是指在單位時(shí)間內(nèi)有兩束波長不同的光交替照射被測(cè)溶液，由檢測(cè)器檢測(cè)得到的吸收度A為兩個(gè)波長下吸收度的差值ΔA，而ΔA是與被測(cè)物質(zhì)的濃度成正比的。張傳津等[8]利用雙波長分光光度法測(cè)定菌毒清可溶性粉中鹽酸嗎啉胍的含量，線性相關(guān)度r=0.9999，而平均回收達(dá)率99.6%。眾所周知，菌毒清可溶性粉為鹽酸環(huán)丙沙星、鹽酸嗎啉胍和葡萄糖組成的復(fù)方制劑，而該方法能在不用提純的條件下直接得到鹽酸嗎啉胍的含量，顯示在復(fù)雜試樣時(shí)具有很大的優(yōu)越性，另外其靈敏度、選擇性、測(cè)量精密度等方面都比單波長法有所提高。

2.3 單掃描示波極譜法

極譜法（polarography）通過測(cè)定電解過程中所得到的極化電極的電流-電位（或電位-時(shí)間）曲線來確定溶液中被測(cè)物質(zhì)濃度的一類電化學(xué)分析方法，其準(zhǔn)確度高，重現(xiàn)性、選擇性好，可實(shí)現(xiàn)連續(xù)測(cè)定。孟召輝等[9]首次利用單掃描示波極譜法測(cè)定了測(cè)定鹽酸嗎啉胍的含量，其在0.05～1.10 mg/L范圍內(nèi)有極好的線性關(guān)系，且下限為0.025 mg/L。

2.4 高效液相色譜法

高效液相色譜（HPLC）是最為常用的分離和檢測(cè)手段，具有分離效能高、選擇性高、檢測(cè)靈敏度高、分析速度快等優(yōu)點(diǎn)，同時(shí)其色譜柱可反復(fù)使用、樣品不被破壞且易回收等特性使得該方法在有機(jī)化學(xué)、生物化學(xué)、醫(yī)學(xué)、藥物開發(fā)與檢測(cè)、化工、食品科學(xué)、環(huán)境監(jiān)測(cè)等方面都有廣泛的應(yīng)用。張樹強(qiáng)等[10]采用Agilent Extend C18色譜柱，以乙腈-磷酸溶液為流動(dòng)相，設(shè)定檢測(cè)波長為283 nm，流速為1.0 mL/min，結(jié)果顯示鹽酸嗎啉胍質(zhì)量濃度在4.03～40.27 mg/L范圍內(nèi)與峰面積呈良好線性關(guān)系（r=0.9999）?？弟姷萚11]采用Diamonsil C18色譜柱，以甲醇-乙腈-磷酸鹽緩沖液為流動(dòng)相，設(shè)置檢測(cè)波長為237 nm，流速1.0 mL/min，結(jié)果表明鹽酸嗎啉胍在20～70 mg/L 范圍內(nèi)與峰面積呈良好的線性關(guān)系（r=0.9992），平均回收率為99.90%。實(shí)驗(yàn)研究表明，高效液相色譜重現(xiàn)性好，專屬性強(qiáng)，檢測(cè)成分不受其他藥物的干擾。

2.5 流動(dòng)注射化學(xué)發(fā)光法

方盧秋等[12]以二氯熒光素作為能量轉(zhuǎn)移劑，十六烷基三甲基氯化銨為增敏劑，通過N-溴代丁二酰亞胺將鹽酸嗎啉胍氧化產(chǎn)生化學(xué)發(fā)光，然后使用流動(dòng)注射化學(xué)發(fā)光分析儀進(jìn)行濃度檢測(cè)，此方法對(duì)鹽酸嗎啉胍響應(yīng)的線性范圍為10 μg/L～0.1 g/L，檢出下限為3.0 μg/L。因此相比于上述檢測(cè)方法，流動(dòng)注射化學(xué)發(fā)光法具有相對(duì)較寬的檢測(cè)范圍及較低的檢測(cè)下線，使該檢測(cè)方法在藥物分析、藥理研究、農(nóng)藥殘留及植物保護(hù)等方面具有重要意義。

3 展 望

鹽酸嗎啉胍是一類廣譜抗病毒藥物，對(duì)DNA和RNA病毒有明顯的抑制作用。對(duì)鹽酸嗎啉胍的藥理活性和檢測(cè)方法進(jìn)行研究探討，一方面有利于掌握其治療效果，另一方面為探索一條快速、有效的鹽酸嗎啉胍檢測(cè)手段提供科學(xué)依據(jù)，使該藥在臨床方面更具有廣泛的應(yīng)用前景。

[1] 趙克健.中國化學(xué)藥品大全[M].北京:新時(shí)代出版社,1990:247.

[2] Zou Q,Habermann-Rottinghaus SM,Murphy KP.Urea effects on protein stability: Hydrogen bonding and hydrophobic effect[J]. Proteins,1998,31(2): 107-115.

[3] 嚴(yán)紹明.鹽酸嗎啉胍治療秋季腹瀉的療效觀察[J].中國中西醫(yī)結(jié)合兒科學(xué),2011,3(1): 81-82.

[4] 李人范.咽結(jié)膜熱60例臨床分析[J].吉首大學(xué)學(xué)報(bào),1981,30(1): 17-19.

[5] 楊懷鏡,李雪梅,張玲.鹽酸嗎啉胍片含量測(cè)定方法的比較[J].中國藥事,2001,15(2): 123-124.

[6] 馮影,王欣.紫外分光光度法測(cè)定鹽酸嗎啉胍片的含量[J].沈陽藥科大學(xué)學(xué)報(bào),1995,12(2): 141-143.

[7] 劉文華,陳紅.鹽酸嗎啉胍的紫外分光光度測(cè)定[J].中國醫(yī)藥工業(yè)雜志,1994,25(11): 512-513.

[8] 張傳津.雙波長分光光度法快速測(cè)定菌毒清可溶性粉中鹽酸嗎啉胍的含量[J].中國獸藥雜志,2001,35(2): 22-23.

[9] 孟召輝,董文舉,汪振輝,等.單掃描示波極譜法測(cè)定鹽酸嗎啉胍[J].藥物分析雜志,1995, 15(5): 25-27.

[10] 張樹強(qiáng).高效液相色譜法測(cè)定鹽酸嗎啉胍注射液的含量[J].中國藥業(yè),2011,20(22): 46-47.

[11] 康軍,李征.HPLC 法測(cè)定鹽酸嗎啉胍片含量的考察[J].中國醫(yī)藥導(dǎo)報(bào),2011,8(3): 58-60.

[12] 方盧秋.流動(dòng)注射化學(xué)發(fā)光法測(cè)定鹽酸嗎啉胍[J].分析化學(xué)研究簡報(bào),2005,1(33): 66-68.

R927.2

：A

：1671-8194（2014）30-0063-02