TS和DPD mRNA對替吉奧治療晚期胃癌的療效預(yù)測

鄭積華

早期胃癌的臨床癥狀不明顯，確診時往往已是晚期。替吉奧作為1種口服的氟尿嘧啶類藥物具有毒副作用小，療效可靠等優(yōu)點(diǎn)，但是由于其臨床治療效果有較大的個體差異，因此，探尋1種對替吉奧敏感的預(yù)測因子，對指導(dǎo)臨床用藥以及提高化療效果有非常重要的意義[1]。我們通過對晚期胃癌患者外周血中的TS mRNA以及DPD mRNA的表達(dá)情況進(jìn)行檢測，以探索其與替吉奧治療晚期胃癌臨床療效之間的關(guān)系，現(xiàn)將結(jié)果總結(jié)報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2011年7月至2013年7月期間我院初治并應(yīng)用口服替吉奧進(jìn)行化療的晚期轉(zhuǎn)移性胃癌患者34例，所有患者均經(jīng)病理學(xué)檢查確診為胃癌，影像學(xué)檢查可見轉(zhuǎn)移病灶。34例中男性15例，女性19例，年齡46～80歲，平均年齡(62.2±6.7)歲。所有患者ECOG評分≤2，之前并未接受過放化療治療，血常規(guī)、肝腎功能在化療允許范圍，無化療禁忌，且預(yù)計(jì)生存時間為3個月以上。

1.2 方法

使用Ficoll-Hypaque法將抗凝血有核細(xì)胞分離，并將經(jīng)焦磷酸二乙酯處理后的磷酸鹽緩沖液洗滌2次后，按照TIANGEN公司RNA提取試劑盒上的說明書提取總RNA，并以此總RNA為RT-PCR循環(huán)的模板。具體方法參照RevertAid逆轉(zhuǎn)錄試劑盒上的說明書，引物序列：TS Forward primer:5'-AATCCGTCGAGCAGCGTT，Reverse primer:5'-CCCTTA CCCTTACCCTTACCCTAA;PDP Forward primer:5'-CTCCGGCTGTCACTTGGCTCTCT，Reverse primer:5'-AAGCAGTTCTTATCAGGATTTCTTTTCC。實(shí)驗(yàn)反應(yīng)的條件為：總RNA模板在94 ℃的條件下持續(xù)30 s使其變性，退火1 min，在68 ℃的條件下延伸2 min，一共進(jìn)行35個循環(huán)，循環(huán)后的產(chǎn)物經(jīng)過1.5%的瓊脂凝膠電泳進(jìn)行分析。所有患者給予口服替吉奧膠囊進(jìn)行治療，每天80 mg/m2,早晚飯后各1次，連續(xù)使用14天，間隔7天，每21天為1個治療周期，連續(xù)使用2個周期。在化療期間，所有患者均接受相應(yīng)護(hù)肝、止吐，并根據(jù)患者血細(xì)胞計(jì)數(shù)情況進(jìn)行糾正貧血等治療。于第2個周期化療結(jié)束1周后行CT檢查，對患者的病變部位進(jìn)行測量，進(jìn)行療效分析。

1.3 療效評定標(biāo)準(zhǔn)

采用實(shí)體瘤療效評價RICIST標(biāo)準(zhǔn)[2]進(jìn)行療效評價：CR(完全緩解)：CT顯示原有病變組織完全消失超過1個月；PR(部分緩解)：原有可測量病灶最長徑之和縮小≥30%超過1個月；SD(病情穩(wěn)定)：原有可測量病灶最長徑之和縮小<30%或者增大<20%；PD(病情進(jìn)展)：出現(xiàn)新病灶或原有可測量病灶最長徑之和增大≥20%。以CR+PR統(tǒng)計(jì)有效率(RR)；無效為SD+PD。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

2 結(jié)果

2.1 替吉奧治療的效果

34例患者經(jīng)過替吉奧治療后CR 6例，PR 10例，SD 11例，PD 7例，有效率為47.06%。

2.2 替吉奧療效與TS mRNA表達(dá)水平間的關(guān)系

按照所有患者檢測出的TS mRNA的平均值2.61為標(biāo)準(zhǔn)，本研究規(guī)定：TS mRNA值≥2.61為TS mRNA高表達(dá)，<2.61為TS mRNA低表達(dá)，治療有效患者的TS mRNA值為(1.57±0.31)，無效患者的TS mRNA值為(2.83±0.43)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=4.378，P=0.034)。

2.3 替吉奧治療效果與DPD mRNA表達(dá)水平之間的關(guān)系

按照所有患者檢測出的DPD mRNA的平均值1.55為標(biāo)準(zhǔn)，本研究規(guī)定：DPD mRNA值≥1.55為DPD mRNA高表達(dá)，<1.55為DPD mRNA低表達(dá)，治療有效患者的DPD mRNA值為(1.15±0.37)，無效患者的DPD mRNA值為(0.98±0.22)，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=3.637,P=0.055)。

3 討論

胃癌在我國各種消化道腫瘤中的發(fā)病率較高，早期診斷以及行根治性手術(shù)具有良好的臨床效果，但是早期胃癌的臨床癥狀不明顯，少數(shù)患者僅有惡心、嘔吐等類似胃潰瘍的消化道癥狀，部分患者在出現(xiàn)體重減輕與疼痛癥狀前來就診時已經(jīng)是晚期。替吉奧是一種胃癌晚期患者化療所用到的口服氟尿嘧啶類藥物，由氟嗪酸鉀、吉莫斯特以及替加氟按照物質(zhì)量1∶0.4∶1的比例組合而成[3]，其中，替加氟是5-氟尿嘧啶的前體藥物，在體內(nèi)轉(zhuǎn)化成5-氟尿嘧啶后可以抗腫瘤；氟嗪酸鉀可以影響5-氟尿嘧啶在腸道內(nèi)的分布情況，進(jìn)而降低消化道的毒副作用；吉莫斯特則抑制5-氟尿嘧啶的分解，提高其抗腫瘤活性[4-5]。陳靜等[6]通過研究發(fā)現(xiàn)替吉奧治療晚期胃癌的療效肯定，而且毒副作用較輕，患者的耐受情況較好。TS 作為催化5-氟尿嘧啶的活性代謝產(chǎn)物dUMP的必要DNA聚合酶，它可以影響DNA的合成，但也可以使5-氟尿嘧啶的治療效果下降，TS高水平表達(dá)的患者預(yù)后往往較差。相關(guān)研究表明[7]，TS mRNA以及TS蛋白水平與5-氟尿嘧啶的治療效果呈負(fù)相關(guān)。日本學(xué)者M(jìn)iyazaki等[8]的研究也證實(shí)了TS mRNA的表達(dá)水平可以作為替吉奧化療效果的預(yù)測因子。DPD是人體內(nèi)分解代謝5-氟尿嘧啶的限速酶，人體中僅有1%～3%的5-氟尿嘧啶進(jìn)行了合成代謝并參與抗腫瘤反應(yīng)，這是由于大量的5-氟尿嘧啶被DPD所滅活，因此，DPD的合成與分解與5-氟尿嘧啶的抗腫瘤效應(yīng)密切相關(guān)。大量的研究結(jié)果顯示[9-10]，DPD的生物活性與5-氟尿嘧啶的治療效果呈負(fù)相關(guān)，但是吉莫斯特則抑制DPD作用下的5-氟尿嘧啶分解，因此，DPD能否作為替吉奧化療效果的預(yù)測因子目前還沒有明確的報道。在本研究中，替吉奧治療有效患者的TS mRNA表達(dá)水平與平均值相比呈一種低表達(dá)的狀態(tài)，無效患者的TS mRNA的表達(dá)水平則較高；替吉奧治療有效與無效患者的DPD mRNA值與均值相比均較低，且無顯著差別。因此，外周血中TS mRNA低表達(dá)的患者對口服替吉奧化療的敏感性高，療效較好，其表達(dá)水平可以作為替吉奧化療效果的預(yù)測因子，但口服替吉奧化療的療效與外周血中DPD mRNA的表達(dá)情況無顯著相關(guān)。

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