草烏毒性及“減毒存效”實(shí)驗研究進(jìn)展

王聿成等

[摘要] 通過檢索文獻(xiàn)并整理分析，總結(jié)了1988～2013年間有關(guān)草烏毒性及“減毒存效”的實(shí)驗研究進(jìn)展。主要包括3方面：（1）草烏毒性及其機(jī)制的實(shí)驗室研究進(jìn)展；（2）草烏“減毒存效”實(shí)驗研究進(jìn)展；（3）訶子對草烏“減毒存效”機(jī)制的實(shí)驗研究進(jìn)展。

[關(guān)鍵詞] 草烏；毒性；減毒；存效

[中圖分類號] R932 [文獻(xiàn)標(biāo)識碼] A [文章編號] 2095-0616（2014）01-41-03

草烏為毛茛科多年生野生植物北烏頭的干燥塊根，其味辛、苦，性熱，有大毒，具有祛風(fēng)除濕，溫經(jīng)止痛的功效。草烏在臨床上治療一些疑難疾病取得了較好療效，但因其有毒性在一定程度上制約了草烏的使用，為此，本文通過檢索CNKI數(shù)據(jù)庫和萬方數(shù)據(jù)庫，合并“草烏”“毒性”“解毒”等關(guān)鍵詞，獲取了近1988～2013年間的研究文獻(xiàn)，對草烏在毒性及其“減毒存效”方面的實(shí)驗室研究進(jìn)展綜述如下，為研究草烏“減毒存效”方法提供參考。

1 草烏毒性實(shí)驗室研究進(jìn)展

現(xiàn)代研究表明，草烏的主要毒性成分為雙酯型生物堿，包括烏頭堿、次烏頭堿和中烏頭堿等，其毒性主要是損害循環(huán)系統(tǒng)及中樞神經(jīng)系統(tǒng)，刺激神經(jīng)系統(tǒng)，特別是迷走神經(jīng)系統(tǒng)和感覺神經(jīng)系統(tǒng)，先興奮后抑制，對心肌尚有直接作用，可因呼吸或心肌麻痹而死亡[1]。

1.1 心臟毒性實(shí)驗室研究進(jìn)展

王衍堂[2]對生草烏的心臟毒性進(jìn)行了心肌細(xì)胞體外實(shí)驗研究，結(jié)果表明其毒性與給藥濃度密切

相關(guān)，低劑量組心肌細(xì)胞無明顯毒性損害，高劑量組則出現(xiàn)大量細(xì)胞形態(tài)改變甚至凋亡、細(xì)胞搏動特征丟失、細(xì)胞活力下降、氧化損傷作用明顯等強(qiáng)心肌細(xì)胞毒性。劉剛等[3]對草烏急性中毒時組織病理學(xué)改變及血漿中毒性成分的研究結(jié)果表明：兔在灌胃草烏乙醇提取物后，迅速出現(xiàn)心律失常、血壓下降并呈進(jìn)行性加重趨勢，心肌、肝、腦組織均可見水腫、充血、細(xì)胞浸潤等病理學(xué)改變，且毒性程度與血漿中的雙酯型生物堿濃度呈正相關(guān)性。

對于草烏中雙酯型生物堿致心肌毒性的機(jī)制研究，主要有以下幾個觀點(diǎn)：致心肌細(xì)胞線粒體能量代謝障礙，誘導(dǎo)心肌細(xì)胞凋亡，Na+通道異常致Na+內(nèi)流[4]。其中線粒體能量代謝障礙方面研究較多，李宏等[5]研究顯示，烏頭堿抑制琥珀酸脫氫酶（SDH）活性，導(dǎo)致線粒體有氧代謝障礙，并通過研究線粒體細(xì)胞色素C氧化酶（CCO）發(fā)現(xiàn)，烏頭堿干擾呼吸鏈的跨膜電子傳遞，失去單方向傳遞的特點(diǎn)，使跨膜質(zhì)子不能形成，ATP合成發(fā)生障礙。梁強(qiáng)榮等[6]研究顯示，烏頭堿干預(yù)后的30min、2h、4h，還原型尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸脫氫酶（NADHD）活性明顯降低，而NADHD是NADH氧化呼吸鏈的第一個酶環(huán)節(jié)。梁強(qiáng)榮等[7]研究發(fā)現(xiàn)，烏頭堿干預(yù)后大鼠心肌乳酸脫氫酶（LDH）活性增強(qiáng)，LDH是無氧氧化標(biāo)志酶，其活性增強(qiáng)為有氧氧化途徑能量生成障礙的繼發(fā)表現(xiàn)。

1.2 草烏神經(jīng)毒性實(shí)驗室研究進(jìn)展

韓屾等[8]通過體內(nèi)和體外研究發(fā)現(xiàn)，草烏在大鼠整體動物實(shí)驗中未見神經(jīng)毒性，而在體外培養(yǎng)的海馬神經(jīng)元模型表現(xiàn)出神經(jīng)毒性，認(rèn)為可能與血腦屏障及體內(nèi)代謝有關(guān)。何曉娟等[9]從自發(fā)活動、肌肉耐力和學(xué)習(xí)記憶3方面了解生草烏對小鼠神經(jīng)系統(tǒng)的毒性作用，結(jié)果顯示其高、中、低劑量組均對小鼠精神神經(jīng)系統(tǒng)無毒性作用。

2 草烏“減毒存效”實(shí)驗室研究進(jìn)展

2.1 中醫(yī)藥對草烏“減毒存效”實(shí)驗室研究進(jìn)展

中醫(yī)臨床使用草烏主要采取的減毒方法為炮制減毒，即長時間煎煮，以切開內(nèi)無白心、口嘗微有麻舌感為標(biāo)準(zhǔn)[10]。其主要原理是雙酯型生物堿受熱后C8位上的乙酰基和C14位上的苯甲?；群笏庾罱K生成毒性較小的苯甲酰單酯型烏頭堿和烏頭原堿[11]。

劉瑤等[12]通過研究草烏煎煮時間及給藥劑量與其毒性的相關(guān)性得出結(jié)論，草烏在煎煮30min，給藥劑量為臨床用量120倍時，草烏水煎液對痹證動物產(chǎn)生的毒性最大，但此時藥效也最佳。張宏[13]研究草烏煎煮時間及給藥劑量對抗炎藥效的影響，認(rèn)為草烏抗炎作用的最佳煎煮時間為6h，最佳給藥劑量為2.4g/kg。柴玉爽等[14]研究了草烏及其炮制品的毒效情況，結(jié)果顯示草烏以2005版《中華人民共和國藥典》方法炮制后毒性和藥效同時降低。

2.2 藏、蒙醫(yī)藥對草烏“減毒存效”的實(shí)驗室研究進(jìn)展

在藏醫(yī)藥和蒙醫(yī)藥中，臨床應(yīng)用草烏時多采取訶子湯制草烏、甘草制草烏、酸奶制草烏、童便制草烏等炮制方法以及配伍訶子的配伍減毒方法。侯敏等[15]通過急性毒性試驗，研究不同炮制方法的草烏毒性由低到高依次為：高壓蒸制草烏、訶子制草烏、清水制草烏、甘草制草烏、酒炙草烏、去尖刮皮制草烏、酸奶制草烏、鹽水制草烏、童便制草烏。楊暢等[16]通過測定并比較訶子配伍草烏、訶子制草烏與生草烏各水煎液中生物堿的含量認(rèn)為，訶子可以通過使草烏中雙酯型生物堿緩慢水解而起到解毒作用，且訶子制草烏較訶子與草烏配伍后草烏毒性小。李福全等[17]通過比較訶子湯制草烏與生草烏中總生物堿對體外大鼠乳鼠心肌細(xì)胞的毒性作用，得出結(jié)論：訶子湯制能有效的降低草烏的心肌毒性。烏蘭其其格等[18]對草烏及其炮制品的藥理毒理及藥效學(xué)進(jìn)行了實(shí)驗研究，結(jié)果顯示烘制能顯著降低草烏毒性，童便炮制也能降低草烏毒性，而訶子湯炮制不能降低草烏毒性；炮制品的體外抗菌作用均較生品提高，其中訶子制的抑菌作用最好；實(shí)驗僅就草烏烘制品進(jìn)行了抗炎、鎮(zhèn)痛和抑制毛細(xì)血管通透性的研究，結(jié)果顯示烘制品在減毒的同時均保證了原有的療效。

3 訶子對草烏“減毒存效”機(jī)制的實(shí)驗室研究進(jìn)展

潘燕等[19]認(rèn)為訶子可以通過影響心肌酶的變化而起到解草烏毒的作用，結(jié)果提示訶子對烏頭堿引起的心肌細(xì)胞內(nèi)Ca2+增多有恢復(fù)作用，可促進(jìn)鈣泵（Ca2+-ATPase）活性的恢復(fù)，且有一定劑量依賴關(guān)系。其主要依據(jù)是烏頭堿心肌毒性與其使細(xì)胞膜上鈉通道開放，鈉泵（Na+-K+-ATPase）受抑，細(xì)胞內(nèi)Na+增多有關(guān)，Na+/Ca2+交換使細(xì)胞內(nèi)Ca2+增多，心肌收縮加強(qiáng)導(dǎo)致心律失常[20]。訶子的丁酮和正丁醇提取物具有強(qiáng)心作用（直接作用于心臟，而不通過β1受體），訶子中的訶子素具有罌粟堿樣的緩解平滑肌痙攣?zhàn)饔肹21]，這可能是訶子對抗草烏心臟毒性的依據(jù)。辛楊[22]利用電噴霧質(zhì)譜技術(shù)對生草烏與訶子藥對的不同極性提取物中雙酯型生物堿成分進(jìn)行了檢測，發(fā)現(xiàn)在低極性條件下，訶子會減緩雙酯型生物堿的釋放，由于人體小腸屬低極性環(huán)境，且酯型生物堿的主要吸收發(fā)生在小腸，當(dāng)含有酯型生物堿的藥物到達(dá)小腸時，訶子的存在可以使雙酯型生物堿在小腸內(nèi)的吸收減緩，從而起到緩釋和減毒作用。endprint

4 展望

實(shí)驗室研究表明，在體內(nèi)外實(shí)驗中草烏具有明顯的心臟毒性，其主要毒性成分為雙酯型生物堿，作用機(jī)制涉及心肌細(xì)胞線粒體能量代謝障礙，誘導(dǎo)心肌細(xì)胞凋亡，Na+通道異常致Na+內(nèi)流等方面；其神經(jīng)毒性僅體現(xiàn)在體外實(shí)驗中上。煎煮、烘制以及訶子制或與訶子配伍等均可有效降低草烏的心臟毒性，烘制方法既能減草烏毒，又能保證草烏抗菌、抗炎和鎮(zhèn)痛方面的療效；其中訶子對草烏的減毒作用基本得到證實(shí)，但也有其不能減毒或減毒作用弱的實(shí)驗結(jié)果，且訶子能否在降低草烏毒性的同時保證草烏的藥效仍需要進(jìn)一步研究。

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（收稿日期：2013-11-06）endprint