N-乙酰基轉(zhuǎn)移酶2及谷胱甘肽S轉(zhuǎn)移酶M1基因多態(tài)性與抗結(jié)核藥物性肝損傷的關(guān)系研究

安慧茹 吳雪瓊 王仲元

結(jié)核病是一種全球性的公共健康問題，異煙肼(H)、利福平(R)、吡嗪酰胺(Z)是治療結(jié)核病的主要藥物。然而，它們均具有肝毒性，且三者聯(lián)用可以導(dǎo)致肝損傷的可能性增加[1]。而藥物性肝損傷的發(fā)生常常使患者被迫中斷甚至終止治療，導(dǎo)致治療效果差、結(jié)核病復(fù)發(fā)和產(chǎn)生耐藥，給結(jié)核病的控制帶來不利影響。了解這些藥物引發(fā)肝損傷的危險(xiǎn)因素和機(jī)制，對(duì)降低抗結(jié)核藥物性肝損傷的發(fā)生率和控制結(jié)核病疫情都非常必要。藥物性肝損傷應(yīng)與該藥在肝中代謝毒物產(chǎn)生及排除有關(guān)，因此，藥物代謝酶的多態(tài)性應(yīng)與抗結(jié)核藥物的肝損傷密切相關(guān)。

N-乙?；D(zhuǎn)移酶2(N-acetyltransferase 2，NAT2)在肝臟中參與包括H、R在內(nèi)的一線抗結(jié)核藥物的代謝。NAT2的編碼基因位于第8對(duì)常染色體的短臂2區(qū)2帶，該基因多態(tài)性與NAT2酶活性密切相關(guān)。H通過NAT2的乙?；饔蒙梢阴．悷熾?后者水解為異煙酸和乙酰肼，乙酰肼一部分進(jìn)一步水解為肼，一部分在NAT2酶的作用下生成無(wú)毒物質(zhì)排出體外。肼及乙酰肼已被認(rèn)定是肝毒性物質(zhì)，可以導(dǎo)致藥物性肝損傷的發(fā)生[2-3]。因此，NAT2活性可能影響乙酰肼乙?；蔁o(wú)毒物質(zhì)的比例。R具有誘導(dǎo)肝臟多種代謝酶的作用[4],其不僅在肝中去乙?；癁楫悷熾乱阴；峁┮阴；?，且可誘導(dǎo)肝藥酶活性，加速乙酰異煙肼代謝為乙酰肼，從而增加異煙肼的肝毒性。這些過程均與NAT2酶活性相關(guān)。

谷胱甘肽S-轉(zhuǎn)移酶(GST)是1種多功能的參與體內(nèi)生物轉(zhuǎn)化的Ⅱ相解毒代謝酶,在很多外源性化合物和藥物的解毒代謝中起重要作用。編碼GST的人類GST基因是1個(gè)超基因家族,已分離出Alpha(A，GSTA)、Mu(M，GSTM)、Theta(T，GSTT)和pi(P，GSTP)4個(gè)亞家族。人類GST基因決定谷胱甘肽S-轉(zhuǎn)移酶活性，能催化還原型的谷胱苷肽(GSH)的巰基(-SH)結(jié)合到疏水的化合物上,使親電子的化合物變成親水的物質(zhì),易于從膽汁或尿液中排泄,通過這種方式將體內(nèi)各種致癌物和斷裂劑產(chǎn)生的親電子試劑、有潛在毒性的物質(zhì)及親脂性化合物降解排出,因此GST在機(jī)體代謝有毒化合物、保護(hù)細(xì)胞免受急性毒性化學(xué)物質(zhì)攻擊和抑制細(xì)胞癌變中起著重要的作用[5]。Strange等[6]研究報(bào)道GSTM1、GSTT1基因缺失可導(dǎo)致酶活性喪失。Watanabe等[7]研究發(fā)現(xiàn)GSTM1、GSTT1聯(lián)合缺失可導(dǎo)致曲格列酮的肝毒性明顯增加。以上研究表明，NAT2、GSTM1的基因多態(tài)性的研究，對(duì)于闡明抗結(jié)核藥物性肝損傷的分子機(jī)制具有一定的意義。

本研究擬通過聚合酶鏈反應(yīng)-直接測(cè)序(PCR-DS)及多重PCR的方法研究中國(guó)人群NAT2、GSTM1、GSTT1基因多態(tài)性與抗結(jié)核藥物誘導(dǎo)肝損傷關(guān)系的相關(guān)性，以進(jìn)一步闡明抗結(jié)核藥物肝損傷的分子機(jī)制。

材料和方法

一、患者來源

1.患者的選擇標(biāo)準(zhǔn)：所有進(jìn)入本研究的患者應(yīng)滿足以下條件：(1)均接受一線抗結(jié)核藥物H、R、Z、乙胺丁醇(E)的治療，方案如下： 2HRZE/4HR，藥物劑量按照體質(zhì)量(kg)計(jì)算，如有藥物性肝損傷的發(fā)生，方案根據(jù)情況隨時(shí)調(diào)整，同時(shí)該例患者歸為肝損傷組。(2)無(wú)營(yíng)養(yǎng)不良、HIV感染、嗜酒、乙型或丙型等病毒性肝炎、肝病、嚴(yán)重結(jié)核病、心功能不全、合并其他藥物的使用等可以導(dǎo)致肝功能損害的因素的存在。(3)治療前肝功能正常，治療過程中即治療6個(gè)月內(nèi)能密切監(jiān)測(cè)肝功能的變化。(4)肝功能損害符合藥物性肝損傷診斷標(biāo)準(zhǔn)[8]，即血清丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶(ALT)或天冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶(AST)高于正常水平的2倍以上，和(或)堿性磷酸酶(ALP)高于正常1.5倍以上；和(或)膽紅素升高伴有惡心、嘔吐等消化道癥狀者。符合藥物性肝損傷的診斷標(biāo)準(zhǔn)，同時(shí)除外使用其他藥物和疾病引起肝功能異常的情況，因此，只要以上條件滿足即可診斷為抗結(jié)核藥物性肝損傷。

2.患者分組：經(jīng)解放軍第三〇九醫(yī)院倫理委員會(huì)審核通過，研究對(duì)象知情，并簽署知情同意書，采用病例-對(duì)照研究方法，選擇2008—2009年度滿足上述條件的我院初治住院結(jié)核病患者208例，選取本科明確抗結(jié)核藥物性肝損傷發(fā)生的所有患者為肝損傷組(共101例)，選取無(wú)抗結(jié)核藥物性肝損傷發(fā)生的患者為對(duì)照組(共107例)，所有患者治療的前2個(gè)月每周檢測(cè)患者ALT、AST、直接膽紅素(DBIL)、總膽紅素(TBIL),之后每月檢測(cè)1次，當(dāng)有惡心、嘔吐、厭食等消化道癥狀時(shí)隨時(shí)檢測(cè)患者肝功能指標(biāo)。ALT,AST檢測(cè)采用IFCC(International Federation of Clinical Chemistry)速率法，單位IU/L,DBIL，TBIL檢測(cè)采用釩酸氧化法,單位μmol/L。

肝損傷組，男56例，女45例；對(duì)照組，男75例，女32例。肝損傷組，年齡15～64歲，平均年齡(36.00±15.72)歲；對(duì)照組，年齡18～61歲，平均年齡(33.36±16.71)歲，兩者比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=1.172，P>0.05)。用藥前肝損傷組患者血清ALT(21.47±14.29)IU/L、AST(21.56±10.93)IU/L、DBIL(4.31±1.99)μmol/L、TBIL(11.65±4.71)μmol/L；對(duì)照組ALT(23.95±12.91)IU/L、AST(19.72±9.81)IU/L、DBIL(3.87±2.33)μmol/L、TBIL(11.84±4.83)μmol/L，兩組比較t值分別為1.314、1.278、1.475、0.281，P值均>0.05，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。用藥后,肝損傷組ALT(292.85±141.43)IU/L、AST(219.82±162.13)IU/L、DBIL(16.95±29.41)μmol/L、TBIL(26.82±26.19)μmol/L；對(duì)照組ALT(32.26±18.17)IU/L、AST(24.09±15.39)IU/L、DBIL(4.48±2.55)μmol/L、TBIL(11.88±4.96)μmol/L，兩組比較t值分別為4.835、7.492、4.250、5.637，P值均<0.001，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

二、操作方法和步驟

1.基因組DNA的提?。翰杉鲜鰞山M患者晨起空腹靜脈血2 ml于含有檸檬酸抗凝劑的試管中，置于-40 ℃儲(chǔ)存?zhèn)溆?。常溫溶解凍存血液，使用全血基因組DNA提取試劑盒(北京天根生化科技有限公司，DP304試劑盒)，按照說明書提取1 ml靜脈血中的基因組DNA，溶解于0.1×TE緩沖液，置于-20 ℃儲(chǔ)存?zhèn)溆谩?/p>

2.NAT2基因檢測(cè)：(1) 引物的設(shè)計(jì)與合成：從www.ncbi.nlm.nih.gov數(shù)據(jù)庫(kù)中獲得NAT2基因序列，利用Oligo 6.0軟件設(shè)計(jì)上游引物5′-TGAA AGAATTGGCTATAAGA-3′；下游引物5′-CAA AATAACGTGAGGGTAGAG-3′，上海生工生物技術(shù)有限公司合成，該對(duì)引物可擴(kuò)增NAT2基因編碼區(qū)及其下游基因共951 bp片段。(2) PCR擴(kuò)增：在50 μl 反應(yīng)體系中,4 種dNTP的終濃度為0.2 mmol/L,引物的終濃度各為0.3 mmol/L，DNA 模板10～100 ng,Taq DNA聚合酶1 U。擴(kuò)增參數(shù)為94 ℃變性1 min, 52 ℃退火1 min,72 ℃延伸1 min,35個(gè)循環(huán)后72 ℃延伸7 min。用2%瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)擴(kuò)增產(chǎn)物。

3.NAT2基因測(cè)序與基因型分析：上述擴(kuò)增產(chǎn)物50 μl送上海生工生物技術(shù)有限公司測(cè)序。利用http://blast.ncbi.nlm.nih.gov/Blast.cgi進(jìn)行測(cè)序結(jié)果的序列比對(duì)，并根據(jù)http://nat.mbg.duth.gr/Human%20NAT2%20alleles_2013.htm提供的信息及參照Huang等[2]、Cho等[9]進(jìn)行測(cè)序結(jié)果的NAT2基因型分析。

4.GSTM1、GSTT1基因檢測(cè)及基因型分析：(1)GSTM1、GSTT1引物來源：參照文獻(xiàn)[10]的報(bào)道,GSTM1上游引物：5′-GAACTCCCTGAAAA GCTAAAGC-3′，GSTM1下游引物：5′-CTTGGGCTCAAATATACGGTGG-3′，該對(duì)引物擴(kuò)增產(chǎn)生219 bp片段。GSTT1上游引物：5′-TTCCTTACTGGTCCTCACATCTC-3′，GSTT1下游引物：5′-TCACCGGATCATGGCCAGCA-3′，擴(kuò)增產(chǎn)物459 bp。β-球蛋白上游引物：5′-CAACTTCATCCACGTTCACC-3′，β-球蛋白下游引物：5′-GAAGA GCCAAGGACAGGTAC-3′，擴(kuò)增產(chǎn)物268 bp。(2)PCR擴(kuò)增：在50 μl 反應(yīng)體系中,4 種dNTP的終濃度為0.2 mmol/L,引物的終濃度各為0. 3 mmol/L，DNA 模板10～100 ng,Taq DNA聚合酶1 U。擴(kuò)增參數(shù)為94 ℃變性40 s, 52 ℃退火1 s,72 ℃延伸1 min,35個(gè)循環(huán)后72 ℃延伸7 min。用2%瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)擴(kuò)增產(chǎn)物。(3)GSTM1、GSTT1基因擴(kuò)增產(chǎn)物分析：用2%瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)擴(kuò)增產(chǎn)物。以β-球蛋白上下游引物擴(kuò)增陽(yáng)性為參照，若產(chǎn)生219 bp片斷說明GSTM1為非缺失基因型，否則為缺失基因型；若產(chǎn)生459 bp片斷說明GSTT1為非缺失基因型，否則為GSTT1缺失基因型。

三、統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

結(jié) 果

一、NAT2基因多態(tài)性

本研究共發(fā)現(xiàn)8個(gè)基因多態(tài)性位點(diǎn)，包括基因編碼區(qū)190 C→T，282 C→T，341 T→C，481 C→T，499 G→A，590 G→A，803 A→G，857 G→A，除282多態(tài)性位點(diǎn)不導(dǎo)致氨基酸改變外，其余均引起氨基酸替換。各個(gè)位點(diǎn)堿基分布均符合Hardy-Weinberg遺傳平衡，表明樣本來自遺傳平衡群體，有較好的代表性。

二、NAT2乙?；蛐团c抗結(jié)核藥物性肝損傷的關(guān)系

依據(jù)藥代動(dòng)力學(xué)乙?；俾实牟煌蓪⑷巳篘AT2基因分為快乙酰化基因型、中乙酰化基因型和慢乙酰化基因型。本研究根據(jù)http://nat.mbg.duth.gr/Human%20NAT2%20alleles_2013.htm提供的信息(部分信息見表1)對(duì)NAT2基因測(cè)序結(jié)果進(jìn)行基因型分析，發(fā)現(xiàn)肝損傷組101例患者中，61例(60.4%)為NAT2快、中乙酰化基因型，40例(39.6%)為NAT2慢乙?；蛐?；對(duì)照組107例患者中，94例(87.9%)為NAT2快、中乙?；蛐?，13例(12.1%)為NAT2慢乙?；蛐?，兩者比較，基因型分布差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=20.62，P<0.05)。尤其NAT2*5B/7B、NAT2*6A/7B、NAT2*6A/6A慢乙酰化基因型在兩組中分布差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2值分別為4.32、14.90、6.40，P值均<0.05)。NAT2*5B/7B基因型患者4例均發(fā)生了抗結(jié)核藥物肝損傷。NAT2*6A/7B、NAT2*6A/6A基因型患者發(fā)生抗結(jié)核藥物肝損傷OR值分別達(dá)到8.40(95%CI=2.85～24.73)、4.67(95%CI=1.42～15.44)(表2)。

表1 NAT2基因型與堿基改變及氨基酸變化之間的對(duì)應(yīng)關(guān)系

表2 各乙?；蛐头植己桶l(fā)生抗結(jié)核藥物性肝損傷的關(guān)系

三、GSTM1、GSTT1基因多態(tài)性

GSTM1缺失基因型占57.7%(120/208)，GSTT1缺失基因型占46.6%(97/208)。部分PCR產(chǎn)物2%瓊脂糖電泳圖譜見圖1。

M：DNA相對(duì)分子質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)(1100,1000,900,800,700,600,500, 400,300,200,100 bp)；陰：陰性對(duì)照，樣本編號(hào)1～23為部分患者DNA的擴(kuò)增產(chǎn)物

四、GSTM1及GSTT1基因型與抗結(jié)核藥物性肝損傷關(guān)系

肝損傷組GSTM1缺失基因型占63.4%(64/101)，GSTM1非缺失基因型占36.6%(37/101)；對(duì)照組GSTM1缺失基因型占51.4%(55/107)，GSTM1非缺失基因型占48.6%(52/107)，利用χ2檢驗(yàn)處理，兩組比較GSTM1缺失基因型發(fā)生藥物性肝損傷OR值偏高，為1.64(95%CI=0.94～2.84，P>0.05)。肝損傷組GSTT1缺失基因型占47.5%(48/101)，GSTT1非缺失基因型占52.5%(53/101)，對(duì)照組GSTT1缺失基因型占45.8%(49/107)，GSTT1非缺失基因型占54.2%(58/107), 利用χ2檢驗(yàn)處理，兩組比較OR值接近(P>0.05)(表3)。

五、NAT2基因型與GSTM1基因型聯(lián)合作用與抗結(jié)核藥物性肝損傷關(guān)系

同時(shí)具有NAT2慢乙?；蛐图癎STM1缺失基因型的患者發(fā)生抗結(jié)核藥物性肝損傷的OR值高達(dá)10.21(95%CI=3.87～26.96，P<0.05),高于只具有NAT2慢乙?；蛐?OR=4.74；95%CI=2.42～9.28,P<0.01)或GSTM1缺失基因型(OR=1.64；95%CI=0.94～2.84,P>0.05)的患者(表4)。

討 論

藥物代謝酶在藥物代謝過程中起著非常關(guān)鍵的作用，這些酶的基因多態(tài)性影響著酶的活性，與藥物性肝損傷密切相關(guān)[3，11]。

早期有報(bào)道，認(rèn)為NAT2快乙酰化型患者更容易發(fā)生抗結(jié)核藥物性肝損傷[12]。之后，較多報(bào)道認(rèn)為慢乙?；蛐突颊咭子诎l(fā)生抗結(jié)核藥物性肝損傷[12-13]，但近來也有學(xué)者認(rèn)為NAT2乙酰化基因型與抗結(jié)核藥物性肝損傷的發(fā)生無(wú)關(guān)[14]。鑒于上述報(bào)道的不同，有必要進(jìn)一步研究國(guó)人NAT2乙酰化基因型及其基因多態(tài)性與抗結(jié)核藥物性肝損傷之間的關(guān)系。

本研究發(fā)現(xiàn)，NAT2慢乙?；蛐团c抗結(jié)核藥物性肝損傷密切相關(guān)，其中NAT2*6A/7B、NAT2*6A/6A基因型者在兩組中分布差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，發(fā)生抗結(jié)核藥物性肝損傷的OR值分別為8.40、4.67,這與國(guó)外許多學(xué)者的報(bào)道一致[2,13-14]。Huang等[2]通過對(duì)224例接受抗結(jié)核藥物治療的結(jié)核病患者的研究發(fā)現(xiàn)，與快乙?；蛐突颊呦啾龋阴；蛐突颊咧械腘AT2*6/6、NAT2*6/7基因型發(fā)生藥物性肝損傷的OR值為4.02，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。Possuelo等[13]也報(bào)道NAT2*6/6，基因型者在使用抗結(jié)核藥物后，肝損傷組和無(wú)肝損傷組的分布差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，其發(fā)生抗結(jié)核藥物性肝損傷的OR值為5.7。Higuchi等[14]也發(fā)現(xiàn)NAT2*6A/7B基因型者易于發(fā)生抗結(jié)核藥物性肝損傷。Wang等[15]對(duì)14篇中外文獻(xiàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行總結(jié)，對(duì)照分析了474例抗結(jié)核藥物性肝損傷患者及1446例未發(fā)生藥物性肝損傷的患者，發(fā)現(xiàn)與NAT2快乙酰化基因型比較，NAT2慢乙?；蛐桶l(fā)生抗結(jié)核藥物性肝損傷的OR值為4.697，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；通過亞群分析發(fā)現(xiàn)，在亞洲人群和非亞洲人群中，NAT2慢乙酰化基因型更易于發(fā)生抗結(jié)核藥物性肝損傷。這也更加證實(shí)了NAT2慢乙?；蛐团c抗結(jié)核藥物性肝損傷密切相關(guān)。

表3 GSTM1及GSTT1基因型與抗結(jié)核藥物性肝損傷關(guān)系

表4 結(jié)核病患者NAT2及GSTM1基因型聯(lián)合作用與抗結(jié)核藥物性肝損傷的關(guān)系

Huang等[10]對(duì)中國(guó)臺(tái)北人群有、無(wú)抗結(jié)核藥物性肝損傷的各115例患者進(jìn)行對(duì)照研究發(fā)現(xiàn)：GSTM1缺失基因型發(fā)生抗結(jié)核藥物性肝損傷的OR值為2.23(P=0.033)，與抗結(jié)核藥物性肝損傷密切相關(guān)。Leiro等[16]對(duì)西班牙35例抗結(jié)核藥物性肝損傷及60例無(wú)肝損傷患者的GSTM1及GSTT1基因型的多態(tài)性進(jìn)行研究發(fā)現(xiàn)：GSTT1缺失基因型發(fā)生抗結(jié)核藥物性肝損傷的OR值為2.60(P=0.03),GSTM1缺失基因型發(fā)生抗結(jié)核藥物性肝損傷的OR值為0.73(P=0.48)。本研究發(fā)現(xiàn)GSTT1、GSTM1缺失基因型與抗結(jié)核藥物性肝損傷無(wú)關(guān)，這與Monteiro等[17]、Tang等[18]的研究一致。Monteiro等[17]對(duì)117例接受抗結(jié)核藥物治療的結(jié)核病患者的研究發(fā)現(xiàn)，藥物性肝損傷的發(fā)生率為33.3%；GSTT1、GSTM1缺失基因型與抗結(jié)核藥物性肝損傷無(wú)關(guān),但與GSTM1非缺失基因型相比，具有GSTM1缺失基因型的患者服用抗結(jié)核藥物后發(fā)生肝損傷更嚴(yán)重。Tang等[18]對(duì)89例發(fā)生藥物性肝損傷的涂陽(yáng)肺結(jié)核患者和未發(fā)生抗結(jié)核藥物性肝損傷的涂陽(yáng)肺結(jié)核患者的對(duì)照研究發(fā)現(xiàn)，GSTT1、GSTM1缺失基因型與抗結(jié)核藥物性肝損傷無(wú)關(guān)。上述研究關(guān)于GSTM1、GSTT1基因多態(tài)性與抗結(jié)核藥物性肝損傷的關(guān)系的不一致性，可能與GSTM1、GSTT1基因型分布存在人群及種族的差異或抗結(jié)核藥物肝損傷與多基因共同作用或基因與環(huán)境共同作用有關(guān)。本研究雖未發(fā)現(xiàn)它們與抗結(jié)核藥物性肝損傷的直接關(guān)系，但發(fā)現(xiàn)GSTM1缺失基因型發(fā)生抗結(jié)核藥物性肝損傷的風(fēng)險(xiǎn)偏高，是否存在關(guān)聯(lián)，將進(jìn)一步擴(kuò)大樣本量加以證實(shí)。

本研究首次對(duì)NAT2基因多態(tài)性與GSTM1基因多態(tài)性聯(lián)合作用與抗結(jié)核藥物性肝損傷的關(guān)系進(jìn)行研究，發(fā)現(xiàn)與單純具有NAT2慢乙酰化基因型(OR=4.74,P<0.05)、GSTM1缺失基因型(OR=1.64，P>0.05)患者相比，同時(shí)具有NAT2慢乙?；蛐图癎STM1缺失基因型患者發(fā)生抗結(jié)核藥物肝損傷OR值高達(dá)10.21(P<0.05)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

總之，NAT2乙?；蛐团c抗結(jié)核藥物性肝損傷密切相關(guān)，而慢乙?；蛐突颊吒装l(fā)生抗結(jié)核藥物性肝損傷。同時(shí)具有NAT2慢乙?；蛐团cGSTM1缺失基因型的患者發(fā)生抗結(jié)核藥物肝損傷的風(fēng)險(xiǎn)增高。通過對(duì)NAT2及GSTM1基因的進(jìn)一步研究，有望深入了解抗結(jié)核藥物性肝損傷的發(fā)生機(jī)制、建立抗結(jié)核藥物致肝損傷易感基因型的分子生物學(xué)檢測(cè)方法，以指導(dǎo)臨床抗結(jié)核藥物和保肝藥物的應(yīng)用。這對(duì)于減少肝損傷的發(fā)生、控制結(jié)核病疫情具有重要意義。

[1] Steele MA, Burk RF, Desprez RM.Toxic hepatitis with iso-niazid and rifampin—a meta analysis. Chest, 1991, 99(2):465-471.

[2] Huang YS, Chern HD, Su WJ,et al. Polymorphism of the N-acetyltransferase 2 gene as a susceptibility risk factor for antituberculosis drug-induced hepatitis.Hepatology,2002,35(4):883-889.

[3] Huang YS.Genetic polymorphisms of drug-metabolizing enzymes and the susceptibility to antituberculosis drug-induced liver injury.Expert Opin Drug Metab Toxicol,2007,3(1):1-8.

[4] Rae JM, Johnson MD, Lippman ME, et al. Rifampin is a selective, pleiotropic inducer of drug metabolism genes in human hepatocytes: studies with cDNA and oligonucleotide expression arrays. J Pharmacol Exp Ther,2001,299(3):849-857.

[5] Pearson WR, Vorachek WR, Xu SJ， et al. Identification of class-mu glutathione transferase genesGSTM1-GSTM5 on human chromosome 1p13.Am J Hum Ganet,1993,53(1): 220-230.

[6] Strange RC, Jones PW, Fryer AA. Glutathione S-transferase: genetics and role in toxicology. Toxicol Lett,2000,112-113:357-363.

[7] Watanabe I, Tomita A, Shimizu M, et al. A study to survey susceptible genetic factors responsible for troglitazone-associa-ted hepatotoxicity in Japanese patients with type 2 diabetes mellitus. Clin Pharmacol Ther,2003,73(5):435-455.

[8] 中華醫(yī)學(xué)會(huì)消化病學(xué)分肝膽疾病協(xié)作組.急性藥物性肝損傷診治建議(草案).中華消化雜志,2007，27(11):765-767.

[9] Cho HJ, Koh WJ, Ryu YJ, et al. Genetic polymorphisms ofNAT2 andCYP2E1 associated with antituberculosis drug induced hepatotoxicity in Korean patients with pulmonary tuberculosis. Tuberculosis，2007，87(6): 551-556.

[10] Huang YS, Su WJ,Huang YH, et al. Genetic polymorphisms of manganese superoxide dismutase, NAD(P)H: quinone oxidoreductase, glutathione S-transferase M1 and T1, and the susceptibility to drug-induced liver injury.J Hepatol,2007,47(1):128-134.

[11] Huang YS, Chern HD, Su WJ,et al. Cytochrome P450 2E1 genotype and the susceptibility to antituberculosis drug-induced hepatitis. Hepatology, 2003,37(4):924-930.

[12] Yamamoto T, Suou T, Hirayama C. Elevated serum amino-transferase induced by isoniazid in relation to isoniazid acetylator phenotype. Hepatology,1986, 6(2): 295-298.

[13] Possuelo LG,Castelan JA,de Brito TC,et al.Association of slow N-acetyltransferase 2 profile and anti-TB drug-induced hepatotoxicity in patients from Southern Brazil.Eur J Clin Pharmacol,2008,64(7):673-681.

[14] Higuchi N,Tahara N,Yanagihara K,et al.NAT2*6A, a haplotype of the N-acetyltransferase 2 gene, is an important biomarker for risk of anti-tuberculosis drug-induced hepatotoxicity in Japanese patients with tuberculosis. World J Gastroenterol,2007, 13(45):6003-6008.

[15] Wang PY, Xie SY, Hao Q, et al.NAT2 polymorphisms and susceptibility to anti-tuberculosis drug-induced liver injury: a meta-analysis. Int J Tuberc Lung Dis, 2012,16(5):589-595.

[16] Leiro V, Fernandez-Villar A, Valverde D,et al. Influence of glutathione S-transferase M1 and T1 homozygous null mutations on the risk of antituberculosis drug-induced hepatotoxicity in a Caucasian population.Liver International,2008,28(6):835-839.

[17] Monteiro TP, El-Jaick KB, Jeovanio-Silva AL, et al. The roles of GSTM1 and GSTT1 null genotypes and other predictors in anti-tuberculosis drug-induced liver injury.J Clin Pharm Ther,2012,37(6):712-718.

[18] Tang SW, Lv XZ, Zhang Y, et al.CYP2E1,GSTM1 andGSTT1 genetic polymorphisms and susceptibility to antituberculosis drug-induced hepatotoxicity: a nested case-control study. J Clin Pharm Ther, 2012,37(5):588-593.