黃曲霉毒素對(duì)家禽的危害與脫毒技術(shù)

謝 慶 常文環(huán) 劉國(guó)華 蔡輝益 王金全 呂春生

(1.中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院飼料研究所，農(nóng)業(yè)部飼料生物技術(shù)重點(diǎn)開(kāi)放實(shí)驗(yàn)室，北京 100081;2.東北農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科學(xué)技術(shù)學(xué)院，哈爾濱 150030)

據(jù)聯(lián)合國(guó)糧農(nóng)組織(FAO)估計(jì)，全世界每年有25%的谷物受到霉菌毒素的污染，平均有2%不能食用。由此導(dǎo)致大量的動(dòng)物中毒、發(fā)病甚至死亡，給糧食工業(yè)和畜牧業(yè)造成巨大的經(jīng)濟(jì)損失。其中，黃曲霉毒素(aflatoxin，AF)的污染最為嚴(yán)重。AF是由黃曲霉(Aspergillus flavus)、寄生曲霉(A.parasiticus)、特異曲霉(A.nomius)和假溜曲霉(A.pseudotamarii)這4種曲霉屬真菌產(chǎn)生的次級(jí)代謝產(chǎn)物，目前已經(jīng)分離和鑒定的有20多種，具有極強(qiáng)的毒性、高誘變性和強(qiáng)致癌性，是被公認(rèn)的危害最大的霉菌毒素。其中黃曲霉毒素B1(aflatoxin B1，AFB1)在飼料中最為常見(jiàn)，毒性也最強(qiáng)，1993年被世界衛(wèi)生組織(WHO)劃定為Ⅰ類致癌物，其毒性比氰化鉀強(qiáng)10倍，比砒霜強(qiáng)68倍，食入后能夠引起畜禽的急慢性中毒，迅速破壞肝臟、腎臟、脾臟等解毒器官，抑制生長(zhǎng)，降低免疫力，并在肝臟、腎臟、肌肉等組織中蓄積，嚴(yán)重危害動(dòng)物健康和人類食品安全。因此，研究AF的脫毒技術(shù)變得尤為重要。

1 AF對(duì)家禽的危害

AF不僅具有強(qiáng)烈的肝毒性和致癌性，而且對(duì)家禽機(jī)體消化機(jī)能和免疫系統(tǒng)產(chǎn)生不良影響，導(dǎo)致生長(zhǎng)受阻、飼料轉(zhuǎn)化率降低、免疫力下降、繁殖能力降低、實(shí)質(zhì)器官損傷等病變。

1.1 抑制生長(zhǎng)發(fā)育

AF能夠降低家禽的采食量、日增重和飼料轉(zhuǎn)化率，其影響程度與家禽品種、日齡，接觸AF的劑量、時(shí)間長(zhǎng)短及環(huán)境因素有關(guān)。尹遜慧等［1］研究發(fā)現(xiàn)，向黃羽肉雞的基礎(chǔ)飼糧中添加AFB10.1 mg/kg，42 d 后平均日增重顯著降低了 5.09%，料重比顯著升高了4.42%，平均日采食量降低了0.85%(差異不顯著)。石達(dá)友等［2］報(bào)道，給我國(guó) 1日齡三水白鴨商品代肉用雛鴨按體重0、0.05、0.10、0.20 mg/kg 口服 AFB1，能明顯延緩雛鴨生長(zhǎng)。口服AFB1劑量越高，投藥時(shí)間越長(zhǎng)，其延緩作用越顯著，甚至?xí)?dǎo)致雛鴨死亡。

1.2 損害繁殖性能

禽類繁殖性能受AF的影響非常顯著。給肉用種禽飼喂AFB1或被AF污染的飼糧，會(huì)引起公禽睪丸生殖上皮發(fā)生病變［3］，睪丸萎縮、重量降低，精子生成量減少，繁殖力和受精率下降［4］等;引發(fā)母禽種蛋產(chǎn)量和孵化率降低、卵巢囊腫、雌激素分泌量下降等。Qureshi等［5］報(bào)道，飼喂高劑量AF時(shí)，母雞血清和蛋中AF及其代謝產(chǎn)物的含量都增加，飼喂污染飼糧4 d內(nèi)就觀察到受精率和孵化率下降。

1.3 降低免疫力

研究表明，AFB1能夠抑制體液免疫和細(xì)胞免疫機(jī)能，降低吞噬細(xì)胞的吞噬能力，使機(jī)體對(duì)細(xì)菌、病毒和寄生蟲(chóng)等引起的疾病的易感性增加，導(dǎo)致疫苗接種失敗。試驗(yàn)證明，肉雞飼養(yǎng)過(guò)程中新城疫病毒的爆發(fā)與飼糧中AF的污染情況之間存在較高的相關(guān)性［5-6］。AFB1對(duì)家禽免疫系統(tǒng)的抑制作用主要表現(xiàn)在:1)能夠降低肝臟中白細(xì)胞介素-2(IL-2)和 γ-干擾素(IFN-γ)基因的表達(dá)，改變機(jī)體的免疫水平［7］;2)抑制蛋白質(zhì)的合成代謝，降低疫苗接種后產(chǎn)生抗體的能力［8］;3)引起免疫器官增生性病變，顯著提高脾臟和法氏囊指數(shù)，導(dǎo)致免疫功能受損［9］。研究發(fā)現(xiàn)，當(dāng)飼糧中AFB1含量達(dá)到200μg/kg，會(huì)顯著抑制商品肉雞的新城疫病毒疫苗免疫抗體的產(chǎn)生［10］;商品肉雞傳染性法氏囊病病毒酶聯(lián)免疫吸附測(cè)試(ELISA)的抗體效價(jià)極顯著下降，免疫抑制明顯［11］。

1.4 損害內(nèi)臟器官

肝臟是AFB1的主要靶器官，AFB1顯著地引起肝細(xì)胞膽管炎癥和空泡性病變［12］，膽管內(nèi)細(xì)胞沉積及其周圍炎癥細(xì)胞異噬性滲出，肝細(xì)胞不規(guī)則沉積回縮，肝臟出現(xiàn)壞疽點(diǎn)等［13］。剖檢發(fā)現(xiàn)肝臟和腎臟腫大［14］、色淡，腎臟和心臟有出血點(diǎn);病理學(xué)檢驗(yàn)發(fā)現(xiàn)肝臟和腎臟嚴(yán)重顆粒變性、膽管組織增生、脾紅髓淤血、腦膜水腫、十二指腸黏膜上皮脫落、胰腺外分泌腺上皮細(xì)胞顆粒性變性等癥狀［15］。

2 AF脫毒技術(shù)及原理

Bata等［16］認(rèn)為有效的AF脫毒方法應(yīng)滿足以下幾點(diǎn)要求:1)毒素被破壞或者轉(zhuǎn)化為無(wú)毒化合物;2)真菌孢子或菌絲體被破壞，沒(méi)有新的毒素產(chǎn)生;3)保持飼糧原有的營(yíng)養(yǎng)水平和風(fēng)味，原料的物理性狀不明顯改變;4)脫毒工藝經(jīng)濟(jì)可行。去除AF的方法除了傳統(tǒng)的的物理法和化學(xué)法外，目前研究較多的是吸附劑法和生物法脫毒。

2.1 物理脫毒法

2.1.1 加熱法

AF雖然對(duì)熱比較穩(wěn)定，但在高溫(如267℃)條件下也會(huì)發(fā)生分解反應(yīng)。熱處理對(duì)AF的破壞作用不僅與AF的種類、飼料原料的種類、水分含量等有關(guān)，還與飼料原料中毒素初始含量、加熱溫度和時(shí)間有密切關(guān)系［17］。Zhang 等［18］對(duì)熱處理后玉米、大米和花生中AFB1的轉(zhuǎn)化和穩(wěn)定性進(jìn)行了研究，建立了動(dòng)態(tài)模型，較好的反映出溫度與轉(zhuǎn)化率的關(guān)系。微波加熱可以促進(jìn)AF的降解，肖麗霞等［19］研究發(fā)現(xiàn)紫玉米經(jīng)微波處理12 min后能夠去除90%以上的毒素。進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)，玉米經(jīng)微波處理15 min后98%的AF被去除，此時(shí)內(nèi)部溫度達(dá)到200℃［20］。但加熱法耗能高而且對(duì)飼糧中營(yíng)養(yǎng)成分破壞較大，實(shí)際應(yīng)用很少。

2.1.2 輻照法

輻照法主要包括X-射線、γ-射線和紫外線等電離輻照以及微波、紅外線和可見(jiàn)光等非電離輻照2種。AF經(jīng)過(guò)輻照后，可以發(fā)生分解，轉(zhuǎn)變成為無(wú)毒或低毒的中間產(chǎn)物，從而達(dá)到脫毒的目的。研究表明，用60Coγ-射線處理 0.1 mg/L的 AFB1溶液，在4 kGy時(shí)降解率可達(dá)到80%以上，6 kGy時(shí)能達(dá)到96%［21］。高能電子束輻照技術(shù)是一種先進(jìn)的氧化技術(shù)，利用電子加速器所產(chǎn)生的高能電子束能夠直接或間接地與污染物反應(yīng)達(dá)到脫毒目的。Rogovschi等［22］在2009年大西洋核技術(shù)國(guó)際會(huì)議上發(fā)表了應(yīng)用電子束輻照降解椰子瓊脂中的AFB1的研究報(bào)告。結(jié)果表明，在32.96μg/kg污染水平下，進(jìn)行5 kGy劑量的輻照，AFB1能達(dá)到75.49%的降解率。試驗(yàn)表明，同等劑量輻照情況下，電子束擁有優(yōu)于γ-射線的脫毒效果，而且電子束設(shè)備操作性強(qiáng)，系統(tǒng)安全可靠;較傳統(tǒng)的60Coγ-射線和X-射線輻照效率更高，具有方向、能量范圍廣，處理時(shí)間短，無(wú)放射性、毒性和化學(xué)殘留［23］。

2.1.3 溶劑萃取法

溶劑萃取法多用于花生和棉籽等油料作物種子中的AF，萃取溶劑主要包括95%乙醇、90%水溶性丙酮、甲醇-水、乙腈-水、乙烷-甲醇、乙烷-甲醇-水、丙酮-乙烷-水等溶液［24］，此方法可以有效去除油料作物中的痕量毒素，去除率達(dá)98%以上，且無(wú)有毒副產(chǎn)物產(chǎn)生，不會(huì)破壞蛋白質(zhì)的含量與質(zhì)量，但成本高，溶劑回收困難，而且存在安全性問(wèn)題。

2.1.4 吸附劑法

目前常見(jiàn)的AF吸附劑主要有鋁硅酸鹽類、酵母細(xì)胞壁提取物、活性炭等。

鋁硅酸鹽類吸附劑，主要是通過(guò)不飽和負(fù)電荷和陽(yáng)離子交換能力捕獲、吸附和固定毒素。天然鋁硅酸鹽吸附力小、效率低，且對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)有一定吸附，直接用于飼糧效果不好。對(duì)其進(jìn)行改性或重提后可改善其對(duì)AF的選擇吸附能力，例如提取自沸石的水合硅鋁酸鹽鈉鈣(HSCAS)對(duì)AF具有良好的吸附效果。研究表明，HSCAS能有效提高肉雞的體增重，降低組織中毒素殘留;而黏土類吸附劑能緩解AFB1對(duì)肉鴨的毒害作用［25-28］。但因HSCAS能夠非選擇性的吸附維生素C和維生素E，被維生素所飽和，而喪失對(duì)毒素的吸附能力［29］。

勝利油田的SWOT分析與戰(zhàn)略選擇…………………………………………………………………………………姜亦波（4.82）

甘露聚糖(GM)是酵母及酵母提取物吸附劑的主要活性成分，對(duì)AF具有很強(qiáng)的吸附作用。GM經(jīng)過(guò)酯化后形成的酯化葡甘露聚糖(EGM)能夠減輕或消除AF對(duì)肝臟的損傷［30］，與HSCAS相比，在AF含量較高時(shí)，酵母細(xì)胞壁對(duì)AFB1的吸附作用明顯減弱［31］。

活性炭具有高比表面積，且多孔。在體外試驗(yàn)中活性炭對(duì)AF的吸附脫毒效果較好，但在體內(nèi)試驗(yàn)中，活性炭的吸附效果差異比較大，可能是由于活性炭的選擇吸附能力較差，被飼糧中的某些營(yíng)養(yǎng)成分所飽和而失去對(duì)毒素的吸附力。

2.2 化學(xué)脫毒法

AF的化學(xué)處理方法主要包括堿處理法和氧化法。其中，堿處理法主要包括氫氧化鈉處理法和氨處理法。氫氧化鈉處理法主要是利用AF能在氫氧化鈉溶液中迅速水解成鄰位香豆素鈉鹽來(lái)去除AF，而且這種鈉鹽易溶于水，可以在堿處理后的水洗過(guò)程中去除。蓋云霞等［32］利用pH為10的弱堿在121℃高溫條件下處理花生粕，60 min后，AF降解率達(dá)84.5%。其中，氨能夠使AFB1發(fā)生脫羥基作用。梁俊平［33］利用7%的氨氣熏蒸含水量25%的花生，在40℃下處理48 h時(shí)，AFB1的降解率可達(dá)到83.5%。脫毒效率較低和飼糧中氨的殘留是堿處理法的2個(gè)主要缺陷。

氧化法處理AF是基于AF遇次氯酸鈉、臭氧、過(guò)氧化氫、氯氣等氧化劑時(shí)可以能迅速分解。AFB1的毒性主要是由于其分子結(jié)構(gòu)中的呋喃環(huán)和內(nèi)酯環(huán)，特別是呋喃環(huán)中C8～C9之間的雙鍵，而臭氧由于其極高的氧化性，可以高效快速地破壞 AFB1的分子結(jié)構(gòu)［34-35］。Luo 等［36］用臭氧處理AFB1、黃曲霉毒素 G1(AFG1)、黃曲霉毒素 B2(AFB2)含量分別為 53.60、12.08 和 2.42 μg/kg 玉米淀粉 60 min，結(jié)果 AFB1、AFG1、AFB2分別降低至 11.38、3.37、和 0.71 μg/kg，同時(shí)水分含量越低效果越好。

2.3 生物脫毒法

根據(jù)生物脫毒的原理，處理毒素的方法一般有:微生物吸附脫毒、微生物降解脫毒以及植物提取物脫毒等。這些脫毒方法主要是通過(guò)破壞、修飾或吸附AF，從而達(dá)到減少或消除毒素的目的。

2.3.1 微生物吸附脫毒

微生物吸附脫毒受到菌體濃度和溫度、pH等的影響，而且在實(shí)際應(yīng)用過(guò)程中還會(huì)受到菌株安全性以及在動(dòng)物腸道內(nèi)能否存活等的限制。也有研究表明，微生物吸附AF的過(guò)程是可逆的，菌體-AF復(fù)合體隨著時(shí)間的延長(zhǎng)，部分AF分子會(huì)被重新釋放。所以微生物吸附脫毒并不是很理想的AF去毒方法。

2.3.2 生物降解脫毒

很多微生物，例如細(xì)菌、霉菌和酵母菌均能夠產(chǎn)生降解AF的酶，因此可用相應(yīng)的微生物及其酶制劑來(lái)脫除AF。AF的生物降解反應(yīng)包括乙?；⑻腔?、環(huán)破裂、水解、脫氨基和脫羧反應(yīng)。早在20世紀(jì)70年代末，Huynh等［40］就發(fā)現(xiàn)了寄生曲霉(A.parasiticus)能夠產(chǎn)生降解AFB1的過(guò)氧化物酶，并證實(shí)過(guò)氧化物酶的量與毒素被降解的量之間存在正相關(guān)。劉大嶺等［41-42］和張騫等［43］研究小組從假密環(huán)菌(Armillariella tabescens)中提取的粗酶液可以使樣品中的AFB1含量減少80%，并確定該酶為胞內(nèi)酶，隨后運(yùn)用分子生物學(xué)技術(shù)對(duì)解毒酶的基因進(jìn)行克隆表達(dá)，并運(yùn)用定向化-易錯(cuò)PCR法，提高其活性及穩(wěn)定性，取得了顯著的成果。研究小組 Guan 等［44］和 Zhao等［45］通過(guò)從不同來(lái)源樣品中篩選，得到解毒酶活性最高的橙紅色黏球菌(Myxococcus fulvus)并對(duì)其培養(yǎng)基和最佳發(fā)酵產(chǎn)酶條件進(jìn)行優(yōu)化，使得在最佳發(fā)酵條件下對(duì)AFB1的降解率達(dá)到80.7%，進(jìn)一步運(yùn)用蛋白質(zhì)分離純化得到分子質(zhì)量約為32 ku的純酶。另外Fan等［46］也從魚腸道中篩選出了一株枯草芽孢桿菌(Bacillus subtilis)ANSB060，研究發(fā)現(xiàn)，該菌對(duì)飼喂受AF污染飼糧的肉仔雞的生長(zhǎng)性能和肉品質(zhì)具有明顯的保護(hù)作用，并能顯著降低AF在肝臟中的殘留。Elsanhoty等［47］研究發(fā)現(xiàn)，嗜熱鏈球菌(Streptococcus thermophilus)、保加利亞乳桿菌(Lactobacillus bulgaricus)和植物乳桿菌(Lactobacillus plantrium)混合發(fā)酵，能夠最大程度地降低酸奶中黃曲霉毒素M1(AFM1)的含量，說(shuō)明某些乳酸菌和雙歧桿菌具有AFM1的解毒功效。Samuel等［48］研究發(fā)現(xiàn)，惡臭假單胞菌(Pseudomonas putida)對(duì)AFB1具有很高的降解效率，且經(jīng)過(guò)海拉細(xì)胞驗(yàn)證后其降解產(chǎn)物的毒性遠(yuǎn)遠(yuǎn)低于AFB1。

生物法降解AF用到的AF降解酶絕大部分來(lái)源于細(xì)胞內(nèi)提取物，由于操作過(guò)程需要破碎細(xì)胞，程序繁瑣，限制了實(shí)際應(yīng)用。AF降解酶的理想反應(yīng)條件是中性pH且高水分的體外反應(yīng)體系，在籽實(shí)、餅粕等低水分的飼料原料中的應(yīng)用需要特殊的工藝進(jìn)行處理。

2.3.3 植物提取物脫毒

近幾年，有研究發(fā)現(xiàn)，天然的植物提取物也可以作為AF的脫毒物質(zhì)。有些抗微生物感染的藥用植物已經(jīng)被證實(shí)有AF解毒或緩解AF毒性的潛力［49-50］。Brinda 等［51］研究發(fā)現(xiàn)，按照 500 mg/kg BW給大鼠預(yù)飼7 d噴霧干燥的鴨嘴花(Adhatoda vasica Nees)葉提取物后，可以緩解由AFB1引發(fā)的大鼠肝功能缺陷，進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)，鴨嘴花堿在37℃條件下，24 h，AFB1的降解率可達(dá)到98%［52］。Solcan 等［53］研究發(fā)現(xiàn)，沙棘(Hippophae rhamnoides Linn.)油具有保肝的活性，能降低肝臟中AF含量并且能緩解AF對(duì)肉仔雞的毒害作用。

3 小結(jié)

飼糧中AF對(duì)家禽生產(chǎn)危害巨大，在其脫毒方法中，吸附劑法由于其使用方便、高效、易于廣泛應(yīng)用等的特點(diǎn)顯示出較強(qiáng)的優(yōu)勢(shì)。但是，市場(chǎng)上的許多吸附劑存在著吸附效率低、單一吸附劑不能廣譜吸收多種霉菌毒素、吸附效果不穩(wěn)定等問(wèn)題，需要根據(jù)霉菌毒素的種類和分布，選取優(yōu)勢(shì)的吸附劑進(jìn)行合理的改造與配伍，以提高其脫毒效果。生物脫毒法迅速、安全、高效，存在巨大的潛力和廣闊的應(yīng)用前景。但是，目前具有高效降解能力的微生物菌種稀缺，對(duì)其代謝機(jī)理及菌種本身毒性評(píng)估的資料缺乏，對(duì)其解毒酶純化及其性質(zhì)的研究不多。因此，篩選出高效產(chǎn)酶菌株，并通過(guò)多種分子生物學(xué)手段結(jié)合先進(jìn)的生物技術(shù)獲得脫毒作用條件寬的解毒菌種或解毒酶，是有效降低AF危害、保障食品安全的重要途徑，也是微生物科研工作者要克服的難題之一。

［1］ 尹遜慧，陳善林，曹紅，等.日糧添加黃曲霉毒素解毒酶制劑對(duì)黃羽肉雞生產(chǎn)性能、血清生化指標(biāo)和毒素殘留的影響［J］.中國(guó)家禽，2010，32(2):29-33.

［2］ 石達(dá)友，廖申權(quán)，郭劍英，等.硒與中藥對(duì)黃曲霉毒素B1所致雛鴨生長(zhǎng)性能下降的影響［J］.中國(guó)家禽，2010，32(20):16-18.

［3］ MOHAN K，JAYAKUMAR K，NARAYANA SH D，et al.Hepatotoxicity of acetaminophen in chickens［J］.Journal of Veterinary Pharmacology and Toxicology，2008，7(1/2):48-49.

［4］ YUNUS A W，NASIR M K，F(xiàn)AROOQ U，et al.Prevalence of poultry diseases in district Chakwal and their interaction with mycotoxicosis:1.Effects of age and flock size［J］.The Journal of Animal ＆ Plant Sciences，2008，18(4):107-113.

［5］ QURESHI M A，BRAKE J，HAMILTON P B，et al.Dietary exposure of broiler breeders to aflatoxin results in immune dysfunction in progeny chicks［J］.Poultry Science，1998，77(6):812-819.

［6］ YUNUSA W，NASIR M K，AZIZ T，et al.Prevalence of poultry diseases in district Chakwal and their interaction with mycotoxicosis:2.Effects of season and feed［J］.The Journal of Animal ＆ Plant Sciences，2009，19(1):1-5.

［7］ 呂武興，賀建華，宋洪國(guó)，等.黃曲霉毒素B1對(duì)肉鴨生長(zhǎng)、肝組織結(jié)構(gòu)及免疫相關(guān)基因表達(dá)的影響［J］.動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)學(xué)報(bào)，2013，25(4):812-818.

［8］ 呂武興，汪前紅，賀建華，等.黃曲霉毒素B1與吸附劑對(duì)肉鴨生長(zhǎng)及禽流感疫苗免疫的影響［J］.動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)學(xué)報(bào)，2010，22(2):431-436.

［9］ 何健，張克英，陳代文，等.自然霉變玉米對(duì)肉鴨生產(chǎn)性能及免疫功能的影響［J］.中國(guó)畜牧雜志，2011，47(19):25-30.

［10］ 王剛，楊漢春.黃曲霉毒素B1和赭曲霉毒素A對(duì)商品肉雞ND疫苗免疫的影響［J］.中國(guó)獸醫(yī)雜志，2008，44(11):30-32.

［11］ 王剛，楊漢春，甘孟侯.黃曲霉毒素B1和赭曲霉毒素A對(duì)商品肉雞IBD疫苗免疫的影響［J］.中國(guó)家禽，2008，30(23):22-24.

［12］ DENLI M，BLANDON J C，GUYNOT M E，et al.Effects of dietary AflaDetox on performance，serum biochemistry，histopathological changes，and aflatoxin residues in broilers exposed to aflatoxin B1［J］.Poultry Science，2009，88(7):1444-1451.

［13］ TESSARI E N C，OLIVEIRA C A F，CARDOSO A L S P，et al.Effects of aflatoxin B1 and fumonisin B1on body weight，antibody titers and histology of broiler chicks［J］.British Poultry Science，2006，47(3):357-364.

［14］ 溫子瑜，鄭萍，張克英，等.黃曲霉毒素污染的玉米及吸附劑對(duì)櫻桃谷肉鴨生產(chǎn)性能、血清生化指標(biāo)及器官指數(shù)的影響［J］.中國(guó)畜牧雜志，2013，49(3):49-55.

［15］ YUNUS A W，RAZZAZI-FAZELI E，BOHM J.Aflatoxin B1in affecting broiler’s performance，immunity，and gastrointestinal tract:a review of history and contemporary issues［J］.Toxins，2011，3(6):566-590.

［16］ BATA á，LáSZTITY R.Detoxification of mycotoxin contaminated food and feed by microorganism［J］.Trends in Food Science ＆ Technology，1999，10(6):223-229.

［17］ 王瑞琦，劉睿杰，常明，等.糧油食品中黃曲霉毒素物理脫毒方法的研究進(jìn)展［J］.糧食與飼料工業(yè)，2013(7):56-59.

［18］ ZHANG C，MA Y，ZHAO X Y，et al.Kinetic modelling of aflatoxins B1conversion and validation in corn，rice，and peanut during thermal treatments［J］.Food Chemistry，2011，129(3):1114-1119.

［19］ 肖麗霞，汪芬，于洪濤，等.紫玉米中黃曲霉毒素 B1和富馬毒素B1的脫毒研究［J］.食品科學(xué)，2011，32(9):114-117.

［20］ FARAG R S，RASHED M M，HGGER A A A A.Aflatoxin destruction by microwave heating［J］.International Journal of Food Sciences and Nutrition，1996，47(3):197-208.

［21］ 楊靜.農(nóng)產(chǎn)品中真菌毒素污染輻射降解效應(yīng)研究［D］.碩士學(xué)位論文.北京:中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院，2009.

［22］ ROGOVSCHI V D，AQUINO S，NUNES T C F，et al.Use of electron beam on aflatoxins degradation in coconut agar［R］.International Nuclear Atlantic Conference，2009.

［23］ 黃佳佳，徐振林，羅翠紅，等.電子束輻照在食品中獸藥殘留降解的應(yīng)用［J］.食品工業(yè)科技，2011，32(1):313-317.

［24］ COLE R J，DORNER J W.Extraction of aflatoxins from naturally contaminated peanuts with different solvents and solvent/peanut ratios［J］.Journal of AOAC International，1993，77(6):1509-1511.

［25］ CHEN X，HORN N，APPLEGATE T J.Efficiency of hydrated sodium calcium aluminosilicate to ameliorate the adverse effects of graded levels of aflatoxin B1in broiler chicks［J］.Poultry Science，2014，93(8):2037-2047.

［26］ WAN X L，YANG Z B，YANG W R，et al.Toxicity of increasing aflatoxin B1concentrations from contaminated corn with or without clay adsorbent supplementation in ducklings［J］.Poultry Science，2013，92(5):1244-1253.

［27］ NEEFF D V，LEDOUX D R，ROTTINGHANS G E，et al.In vitro and in vivo efficacy of a hydrated sodium calcium aluminosilicate to bind and reduce aflatoxin residues in tissues of broiler chicks fed aflatoxin B1［J］.Poultry Science，2013，92(1):131-137.

［28］ MAGNOLI A P，TEXEIRA M，ROSS C A R，et al.Sodium bentonite and monensin under chronic aflatoxicosis in broiler chickens［J］.Poultry Science，2011，90(2):352-357.

［29］ 陳峰，盧永紅，王小花.霉菌毒素吸附劑對(duì)維生素的非選擇性吸附研究［J］.中國(guó)畜牧雜志，2008，44(18):8-10.

［30］ 侯然然，謝鵬，張敏紅，等.葡甘露聚糖對(duì)飼喂黃曲霉毒素B1日糧的肉仔雞肝生化指標(biāo)和組織的影響［J］.動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)學(xué)報(bào)，2008，20(2):152-157.

［31］ ZHAO J，SHIRLEY R B，DIBNER JD，et al.Comparison of hydrated sodium calcium aluminosilicate and yeast cell wall on counteracting aflatoxicosis in broiler chicks［J］.Poultry Science，2010，89(10):2147-2156.

［32］ 蓋云霞，趙謀明，崔春，等.不同前處理方法對(duì)花生粕酶解液中黃曲霉毒素含量的影響［J］.食品與發(fā)酵工業(yè)，2007，33(11):18-21.

［33］ 梁俊平.氨氣熏蒸法降解花生及花生粕中黃曲霉毒素方法的研究［D］.碩士學(xué)位論文.雅安:四川農(nóng)業(yè)大學(xué)，2009.

［34］ FREITAS-SILVA O，VEN?NCIO A.Ozone applications to prevent and degrade mycotoxins:a review［J］.Drug Metabolism Reviews，2010，42(4):612-620.

［35］ KARACA H，VELIOGLU Y S，NAS S.Mycotoxins:contamination of dried fruits and degradation by ozone［J］.Toxin Reviews，2010，29(2):51-59.

［36］ LUO X H，WANG R，WANG L，et al.Detoxification of aflatoxin in corn flour by ozone［J］.Journal of the Science of Food and Agriculture，2014，94(11):2253-2258.

［37］ HERNANDEZ-MENDOZA A，GUZMA-DE-PE?A D，GONZáLEZ-CóRDOVA A F，et al.In vivo assessment of the potential protective effect of Lactobacillus casei Shirota against aflatoxin B1［J］.Dairy Science ＆Technology，2010，90(6):729-740.

［38］ PIZZOLITTO R P，ARMANDO M R，SALVANO M A，et al.Evaluation of Saccharomyces cerevisiae as an antiaflatoxicogenic agent in broiler feedstuffs［J］.Poultry Science，2013，92(6):1655-1663.

［39］ HALTTUNEN T，COLLADO M C，EL-NEZAMI H，et al.Combining strains of lactic acid bacteria may reduce their toxin and heavy metal removal efficiency from aqueous solution［J］.Letters in Applied Microbiology，2008，46(2):160-165.

［40］ HUYNH V L，LLOYD A B.Synthesis and Degradation of aflatoxin by Aspergillus parasiticus.Ⅰ.synthesis of aflatoxin B1by young mycelium and its subsequent degradation in aging mycelium［J］.Australian journal of biological sciences，1984，37(2):37-44.

［41］ 劉大嶺，姚冬生，陳敏峰.真菌提取液對(duì)黃曲霉毒素解毒作用的研究［J］.廣東藥學(xué)院學(xué)報(bào)，1995，11(2):93-94.

［42］ 劉大嶺，姚冬生，黃炳賀，等.黃曲霉毒素解毒酶的固定化及其性質(zhì)的研究［J］.生物工程學(xué)報(bào)，2003，19(5):603-607.

［43］ 張騫，刑克克，胡亞?wèn)|，等.基于易錯(cuò)PCR的黃曲霉毒素解毒酶體外分子定向進(jìn)化［J］.生物工程學(xué)報(bào)，2011，27(7):1100-1108.

［44］ GUAN S，ZHAO L H，MA Q G，et al.In vitro efficacy of Myxococcus fulvus ANSM068 to biotransform aflatoxin B1［J］.International Journal of Molecular Sciences，2010，11(10):4063-4079.

［45］ ZHAO L H，GUAN S，GAO X，et al.Preparation，purification and characteristics of an aflatoxin degradation enzyme from Myxococcus fulvus ANSM068［J］.Journal of Applied Microbiology，2011，110(1):147-155.

［46］ FAN Y，ZHAO L H，MA Q G，et al.Effects of Bacillus subtilis ANSB060 on growth performance，meat quality and aflatoxin residues in broilers fed moldy peanut meal naturally contaminated with aflatoxins［J］.Food and Chemical Toxicology，2013，59:748-753.

［47］ ELSANHOTY R M，SALAM SA，RAMADAN M F，et al.Detoxification of aflatoxin M1in yoghurt using probiotics and lactic acid bacteria［J］.Food Control，2014，43:129-134.

［48］ SAMUEL M S，SIVARAMAKRISHNA A，MEHTA A.Degradation and detoxification of aflatoxin B1by Pseudomonas putida［J］.International Biodeterioration＆ Biodegradation，2014，86:202-209.

［49］ SANDOSSKUMAR R， KARTHIKEYAN M，MATHIYAZHAGAN S，et al.Inhibition of Aspergillus flavus growth and detoxification of aflatoxin B1by the medicinal plant zimmu(Allium sativum L.× Allium cepa L.)［J］.World Journal of Microbiology and Biotechnology，2007，23(7):1007-1014.

［50］ VELAZHAHAN R，VIJAYANANDRAJ S，VIJAYASAMUNDEESWARI A，et al.Detoxification of aflatoxins by seed extracts of the medicinal plant，Trachyspermum ammi(L.)Sprague ex Turrill-structural analysis and biological toxicity of degradation product of aflatoxin G1［J］.Food Control，2010，21(5):719-725.

［51］ BRINDA R，VIJAYANANDRAJ S，UMA D，et al.Role of Adhatoda vasica(L.)Nees leaf extract in the prevention of aflatoxin-induced toxicity in Wistar rats［J］.Journal of the Science of Food and Agriculture，2013，93(11):2743-2748.

［52］ VIJAYANANDRAJ S，BRINDA R，KANNAN K，et al.Detoxification of aflatoxin B1by an aqueous extract from leaves of Adhatoda vasica Nees［J］.Microbiological Research，2014，169(4):294-300.

［53］ SOLCAN C，GOGU M，F(xiàn)LORISTEAN V，et al.The hepatoprotective effect of sea buckthorn(Hippophae rhamnoides)berries on induced aflatoxin B1poisoning in chickens［J］.Poultry Science，2013，92(4):966-974.