西南獐牙菜化學(xué)成分研究Ⅱ

黃飛燕，李干鵬，吳健君，張應(yīng)紅，唐榮平

（1. 臨滄師范高等?？茖W(xué)校 數(shù)理系，云南 臨滄 677000；2. 云南民族大學(xué) 化學(xué)與生物技術(shù)學(xué)院 民族藥資源化學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，云南 昆明 650500；3. 臨滄市鎮(zhèn)康縣忙丙中學(xué)，云南 臨滄 677000）

西南獐牙菜化學(xué)成分研究Ⅱ

黃飛燕1，李干鵬2，吳健君3，張應(yīng)紅1，唐榮平1

（1. 臨滄師范高等專科學(xué)校 數(shù)理系，云南 臨滄 677000；2. 云南民族大學(xué) 化學(xué)與生物技術(shù)學(xué)院 民族藥資源化學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，云南 昆明 650500；3. 臨滄市鎮(zhèn)康縣忙丙中學(xué)，云南 臨滄 677000）

西南獐牙菜為龍膽科獐牙菜屬植物，具有清熱解毒，利膽退黃的功效。采用現(xiàn)代分離分析技術(shù)從西南獐牙菜80%甲醇提取物的水溶部分中分離得到3個(gè)化合物，分別為異牡荊素、異紅草素、6''-阿拉伯糖基-異牡荊素，3種化合物均為首次從該屬植物中分離得到。

西南獐牙菜；黃酮類；HPLC；

西南獐牙菜系龍膽科、獐牙菜屬植物［1］。在云貴地區(qū)常用于治療肝炎、黃疸型肝炎、肝膽類疾?。?］。國外對于西南獐牙菜的化學(xué)成分及藥理研究報(bào)道較少。Goutam Brahmachari［3］，引用高光躍等［4］的研究證實(shí)西南獐牙菜中存在獐牙菜苷、龍膽苦苷和獐牙菜苦苷；RIOS J L［5］的綜述中提及西南獐牙菜提取物有抗炎及抗?jié)B出的作用；薛春迎、何廷農(nóng)、李德銖［6］報(bào)道了西南獐牙菜的大、小孢子發(fā)生及雌、雄配子體發(fā)育過程, 同時(shí)討論了獐牙菜屬寬絲組和多枝組的分類等級和系統(tǒng)演化關(guān)系；張俊巍、茅青［7］較早對其化學(xué)成分進(jìn)行了研究，從中分離得到5個(gè)化合物，分別為谷甾醇、齊墩果酸、山植酸、1,3，7,8-四羥基口山酮及獐牙菜皂甙（swericinctoside)，同時(shí)通過反相高效液相色譜法進(jìn)一步證實(shí)西南獐牙菜中含有龍膽苦苷、獐牙菜苷、獐牙菜苦苷；紀(jì)蘭菊、保怡、孫洪發(fā)等［8］研究結(jié)果中表明西南獐牙菜中存在大量的口山酮（xanthones）和裂環(huán)烯醚萜（secoiridoids）；耿家玲、耿長安、陳紀(jì)軍［9］的研究中，報(bào)道了15個(gè)化合物，首次分離得到(-)龍膽內(nèi)酯、angelone、3-表-蒲公英賽醇、間羥基苯甲醇、鄰苯二甲酸二甲酯、鄰苯二甲酸二異丁酯、3,4-二羥基苯甲酸和正三十一烷醇；筆者所在的課題組前期報(bào)道了10個(gè)環(huán)烯醚萜類化合物［10-11］，其中含3個(gè)新裂環(huán)烯醚萜類化合物：3,4,5,6-tetrahydro-8-hydroxy-6-(hydroxymethyl)pyrano［3,4-c］pyran-1(8H)-one 、3,4,5,6-tetrahydro-8-hydroxy-6-methylpyrano［3,4-c］pyran-1(8H)-one 、5,6-dihydro-4-(1,3-dihydroxybutan-2-yl)-3-(hydroxymethyl)pyran-2-one，首次從該屬植物中分離得到6′-O-葡萄糖基－獐牙菜苷，septemfidoside、馬錢苷酸、6′-O-葡萄糖基－獐牙菜苦苷。

為了研究其化學(xué)成分，筆者繼續(xù)對該植物80%甲醇提取物的水溶部分進(jìn)行分離純化，采用高效液相制備色譜、質(zhì)譜和核磁共振波譜等技術(shù)，進(jìn)一步從水溶性部分中分離、鑒定得到3個(gè)黃酮類化合物，3個(gè)化合物均為首次從該植物中分離得到。

1 實(shí)驗(yàn)部分

1.1 材料與儀器

Agilent 1200型高效液相色譜，XDB-C18(21.2× 250 mm)半制備柱，艾杰爾半制備柱（Venusil XBP-C18(10×250 mm)）；Bruker DRX-400型超導(dǎo)核磁共振儀（TMS為內(nèi)標(biāo)）；質(zhì)譜用API QSTARPulsar液相色譜/四極桿/飛行時(shí)間串聯(lián)質(zhì)譜儀測定；MCI材料（Merck公司）；提取用甲醇為工業(yè)純（重蒸）；娃哈哈純凈水（過濾），二氯甲烷及其他試劑為分析純。

西南獐牙菜植物樣品于2009年10月采自云南玉溪新平縣哀牢山，經(jīng)云南中醫(yī)學(xué)院楊禮攀博士鑒定為西南獐牙菜，植物標(biāo)本（NO. 0601007）存于云南民族大學(xué)民族藥資源化學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室標(biāo)本室。

1.2 提取及分離

花期采集的西南獐牙菜全草在室內(nèi)陰干，稱重（4.5 kg）后粉碎至80目，用80 %的甲醇（料液比1:2）加熱超聲提取，共8次，每次4 h，提取液過濾、濃縮（甲醇回收）合并得棕色浸膏約880g，加水至懸浮狀，用二氯甲烷多次萃取。水溶部分經(jīng)過MCI脫色（甲醇洗脫）后經(jīng)大孔樹脂脫糖（甲醇:水）洗脫，得到水部分156 g、甲醇∶水部分273 g、甲醇部分45 g；取甲醇（70%）部分浸膏56 g用HPLC制備色譜進(jìn)行制備（色譜條件：制備色譜柱：XDB-C18(21.2×250 mm)；進(jìn)樣量：250 μL；洗脫劑：V甲醇∶V水∶V甲酸=35∶65∶0.5；流速：8 mL/min,按出峰情況劃段，旋蒸得到Fr1-5，然后用艾杰爾半制備柱（Venusil XBPC18（10×250 mm））進(jìn)行分離；進(jìn)樣量：80 μL；洗脫劑：V甲醇∶V水=35:65；流速：2 mL/min）進(jìn)行純化制備，分別得到化合物1（28.6 mg）、化合物2（17.2 mg）、化合物3（12.0 mg）。

2 結(jié)構(gòu)鑒定

化合物1 黃色粉末, 分子式:C21H21O101H-NMR (400 MHz, CD3OD) δH:7.84 (2H, d, J=7.2 Hz, H-2’, 6’), 6.93 (2H, d, J=7.7 Hz, H-3’, 5’), 6.60 (1H, s, H-3), 6.51(1H, s, H-8), 4.62 (1H, d, J=8.0 Hz, H-1’’), 4.20 (1H,dd, J=8.4, 9.8 Hz, H-2), 3.90 (1H, d, J=7.2 Hz,H-6’’), 3.75 (1H, dd, J=4.8, 12.0 Hz, H-6’’), 3.47(1H, m, H-3’’), 3.45 (1H, m, H-5’’), 3.38 (1H, m, H-4’’);13C-NMR (100 MHz, CD3OD) δC:184.1 (C-4), 166.2 (C-2), 165.0 (C-7), 162.8 (C-40), 162.1 (C-5), 158.7 (C-9), 129.5 (C-2’,6’), 123.1 (C-10), 117.0 (C-3’, 5’ ), 109.2 (C-6), 105.2 (C-1’ ),103.9 (C-3 ), 95.2 (C-8 ), 82.7 (C-5’’), 80.1 (C-3’’), 75.3 (C-1’’), 72.5 (C-4’’), 71.8 (C-2’’), 62.8 (C-6’’).以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)值［12］對照基本一致，化合物1鑒定為異牡荊素(Isovitexin)。

化合物2 黃色粉末, 分子式:C26H28O141H-NMR (400 MHz, CD3OD) δH: 7.87 (2H, d, J=7.2 Hz, H-2’, 6’), 6.94 (2H, d, J=7.7 Hz, H-3’ , 5’), 6.70 (1H, s, H-3), 6.45(1H, s, H-8), 4.98(1H, s, H-1’’’), 4.61 (1H, d, J=8.0 Hz, H-1’’), 4.23 (1H,dd, J=8.4, 9.8 Hz, H-2), 3.94 (1H, d, J=7.2 Hz,H-6’’), 3.74 (1H, s, H-2’’’), 3.72 (1H, dd, J=4.8, 10.8 Hz, H-6’’), 3.49 (1H, s, H-3’’’), 3.46 (1H, m, H-4’’’), 3.45(1H, m, H-3’’), 3.45 (1H, m, H-5’’), 3.88 (1H, dd, J=4.8, 11.2 Hz, H-5’’’), 3.64 (1H, dd, J=6.0, 12.0 Hz, H-5’’’), 3.32 (1H, s, H-4’’);13C-NMR (100 MHz, CD3OD) δC: 183.9 (C-4), 166.1 (C-2), 165.0(C-7), 162.7 (C-40), 162.1 (C-5), 158.7 (C-9), 129.4 (C-2’,6’), 123.0 (C-10), 117.1 (C-3’, 5’), 108.9 (C-6), 105.2 (C-1’), 105.1 (C-1’’’), 103.3 (C-3), 95.4 (C-8), 81.3 (C-5’’), 79.9 (C-3’’),75.4 (C-1’’), 74.2 (C-2’’’), 72.6 (C-4’’), 72.4 (C-3’’’), 71.9 (C-2’’), 70.2 (C-5’’’）, 69.6 (C-4’’’), 66.3 (C-6’’). 以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)值［12］對照基本一致，僅在6''多了一個(gè)阿拉伯糖基，化合物2鑒定為6’’-阿拉伯糖基-異牡荊素(6''-Arabinosyl-Isovitexin)。

化合物 3 黃色粉末,分子式: C21H21O111H-NMR (400 MHz, C5D5N) δH: 7.44 (1H, dd, J = 2.0 Hz, 8.4 Hz, H-6’), 7.25 (1H, d, J = 8.4 Hz, H-2’), 6.87 (1H, s, H-5’), 6.67 (1H, S, H-3), 4.58(1H, d, J = 10.0 Hz, H-1’’).13C-NMR (400 MHz, C5D5N) δC: 183.3 (C-4)165.2 (C-2), 165.1 (C-7), 162.5 (C-5), 158.0 (C-9), 152.2 (C-4’), 148.3 (C-3’), 123.3 (C-1’), 120.0 (C-6’), 117.3 (C-5’), 115.1 (C-2’), 110.5 (C-6), 105.3 (C-10), 104.4 (C-3), 95.1 (C-8), 83.4 (C-5’’), 81.0 (C-3’’), 76.0 (C-1’’), 73.4 (C-2’’), 72.4 (C-4’’), 63.2 (C-6’’). 以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)值［13］對照基本一致，化合物3鑒定為異紅草素(Isoorientin)。

3 討論

我國獐牙菜屬植物種類較多，分布面積廣，儲(chǔ)量大，但列入藥典作為藥用和保健的品種很少，因此很有必要加大對該屬植物的研究力度。云南省獐牙菜屬植物資源豐富，但化學(xué)成分及藥理研究工作還比較薄弱。試驗(yàn)對采自云南的西南獐牙菜進(jìn)行化學(xué)成分研究，采用高效液相色譜技術(shù)及現(xiàn)代波譜技術(shù)，從該植物水溶部分分離、鑒定了3個(gè)黃酮類化合物，據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道，該類化合物具有一定的抗癌活性。為更好地開發(fā)和利用云南豐富的獐牙菜屬植物藥資源，筆者將繼續(xù)展開研究，進(jìn)一步改進(jìn)提取和分離方法，以期得到更多的同類化合物和新的活性成分。同時(shí)對分離得到的化合物進(jìn)行活性測試，通過高效液相色譜分析，比較不同品種之間的化學(xué)成分差異，有助于辨認(rèn)藥材品質(zhì)和尋找習(xí)用藥材的替代品，對于植物分類學(xué)研究具有一定的參考價(jià)值，也為該屬植物藥理藥效相關(guān)學(xué)科的研究提供參考依據(jù)。

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The Second Study of Chemical Compositions of South-east Swertia Plant

HUANG Fei-yan1, LI Gan-peng2, WU Jian-jun3, ZHANG Ying-hong1, TANG Rong-ping1
(1. Department of Mathematics and Physics, Lincang Teachers College, Lincang 677000, China; 2. Key Lab of Ethnic Medical Resources in School of Chemistry and Biology Technology, Yunnan Nationality University, Kunming 650500, China; 3. Mangbin Middle School in Zhenkang, Lincang 677000, China)

South-east swertia plant belongs to gentianaceae swertia genus with the functions of heat-clearing, detoxicating, cholagogic and anti-inflammatory. From water soluble part of 80% methanol extracts of southwest swertia plant three compounds, isovitexin, Homoorientin, 6''-arabinose isovitexin, are isolated using modern separation and analysis techniques, which are first extracted from the plant.

South-east swertia plant; flavonoids; HPLC

R284.2

A

1674-9200（2014）03-0031-03

（責(zé)任編輯 張 鐵）

2014-03-18

教育部科學(xué)技術(shù)研究重點(diǎn)項(xiàng)目“云南產(chǎn)獐牙菜屬植物藥的活性成分研究”（208132）；臨滄師范高等?？茖W(xué)校資助項(xiàng)目“西南獐牙菜化學(xué)成分研究”（LCSZL201204）。

黃飛燕（1984-），男，湖南郴州人，臨滄師范高等?？茖W(xué)校數(shù)理系講師，碩士，主要從事天然藥物化學(xué)研究。