不同方法提取川芎揮發(fā)油的GC-MS分析

劉曉芬, 連艷，高必興，蘭志瓊，盧先明

·炮制制劑·

不同方法提取川芎揮發(fā)油的GC-MS分析

劉曉芬, 連艷，高必興，蘭志瓊，盧先明

目的：對川芎飲片不同提取方法所得揮發(fā)油的化學成分進行比較分析。方法：采用氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀對提取物進行比較分析。結(jié)果：4種方法提取的揮發(fā)油有9個化合物相同。其中水蒸氣蒸餾法提取的揮發(fā)油樣品中組分種類最多，主要是烯萜類成分。結(jié)論：4種提取方法均能提取出川芎揮發(fā)油中的主要成分，主要成分為內(nèi)酯類，相對含量最高的為反式-藁本內(nèi)酯。

川芎飲片；揮發(fā)油；化學成分；GC-MS

川芎為傘形科植物川芎Ligusticum chuanxiong Hort.的干燥根莖[1]。川芎揮發(fā)油為川芎的主要化學成分之一，具有改善微循環(huán)，降低血壓，增加腦血流量，抗凝血[2]，腦神經(jīng)保護[3]等作用。水蒸氣蒸餾法為揮發(fā)油常用的提取方法，2010版中國藥典（一部）附錄分為甲法，乙法兩種。本實驗考察了水蒸氣蒸餾法（乙法）、石油醚，乙醚，正己烷提取川芎揮發(fā)油，通過氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀對不同提取方法提取的揮發(fā)油化學成分進行比較分析。通過分析，對比不同提取方式的結(jié)果，探討不同提取方式得到的揮發(fā)油化學成分的不同，研究川芎揮發(fā)油的主要成分，為川芎揮發(fā)油的提取工藝提供參考，為

1 儀器與試藥

1.1 儀器

Agilent Technologies 7890A GC System，Agilent Technologies 5975C inert MSD with Triple-Axis Detector；KQ5200E型超聲波清洗器(昆山市超聲儀器有限公司)，BP121S十萬分之一電子天平(賽多利斯科學儀器有限公司)。水為樂百氏純凈水，石油醚（分析純），乙醚（分析純），正己烷(色譜純)。

1.2 材料

川芎飲片產(chǎn)自四川省彭州敖平鎮(zhèn)興泉村12組，經(jīng)成都中醫(yī)藥大學盧先明教授鑒定為傘形科植物川芎Ligusticum chuanxiong Hort.的干燥根莖。樣品貯藏于成都中醫(yī)藥大學中藥標本館。

2 方法與結(jié)果

2.1 供試品制備

2.1.1 水蒸氣蒸餾提取 稱取川芎粉末（過二號篩）50 g，參照2010年版中國藥典（一部）附錄乙法，提取揮發(fā)油，所得的產(chǎn)物為淡黃色油狀物，按每0.1mL揮發(fā)油加入10 mL正己烷，置棕色瓶中，0.22 μm微孔濾膜濾過，作為供試品溶液1。

2.1.2 石油醚提取 精密稱取約5 g川芎粉末（過二號篩），于具塞錐形瓶中，精密加入50 mL石油醚（30～60沸程），稱定重量，超聲提取30 min，放至室溫，以石油醚補足減失的重量，搖勻，靜置，取上清液，0.22 μm微孔濾膜濾過，作為供試品溶液2。2.1.3 乙醚提取 精密稱取約5 g川芎粉末（過二號篩），于具塞錐形瓶中，精密加入50 mL乙醚，稱定重量，超聲提取30 min，放至室溫，以乙醚補足減失的重量，搖勻，靜置，取上清液，0.22 μm微孔濾膜濾過，作為供試品溶液3。

2.1.4 正己烷提取 精密稱取約5 g川芎粉末（過二號篩），于具塞錐形瓶中，精密加入50 mL乙醚，稱定重量，超聲提取30 min，放至室溫，以正己烷補足減失的重量，搖勻，靜置，取上清液，0.22 μm微孔濾膜濾過，作為供試品溶液4。

2.2 GC-MS分析條件

色譜條件：Agilent HP-5MS毛細管柱(30 m×250 μm×0.25 μm)，質(zhì)譜檢測器。進樣口溫度230 ℃，20︰1分流，進樣量：1 μL。程序升溫：初始60℃，每分鐘3℃升至120℃，每分鐘2℃升至180℃，每分鐘20℃升至260℃，保持5 min。載氣：高純氦氣；載氣流速：1.0 mL﹒min-1。

質(zhì)譜條件：EI離子源，掃描范圍50～350 amu。離子源溫度：230℃；GC-MS輔助加熱溫度：260℃；MS四級桿溫度：150℃；溶劑延遲：5 min。質(zhì)譜標準庫：NIST庫。

2.3 結(jié)果

4種方法所得樣品經(jīng)氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀分析，得總離子流圖，見圖1-4。經(jīng)NIST庫自動檢索，得出揮發(fā)油的化學成分，結(jié)果見表1。

圖1 川芎水蒸氣提取揮發(fā)油總離子流圖

圖2 川芎石油醚提取揮發(fā)油總離子流圖

圖3 川芎乙醚提取揮發(fā)油總離子流圖

圖4 川芎正己烷提取揮發(fā)油總離子流圖

表1 川芎揮發(fā)油GC-MS鑒定化合物及相對含量

136.23 C10H16萜品烯 0.22 136.23 C10H16萜品油烯 1.49 0.37 0.36 0.39 136.23 C10H16反式-β-羅勒烯 0.02 136.23 C10H16β-羅勒烯 0.01 136.23 C10H16γ-Pyronene 0.13 0.35 150.17 C9H10O2對乙烯基愈瘡木酚 0.85 0.24 154.25 C10H18O 芳樟醇 0.03 154.25 C10H18O 4-萜烯醇 0.88 154.25 C10H18O L-α-松油醇 0.05 156.31 C11H24正十一烷 0.02 162.23 C11H14O 苯戊酮 0.14 164.20 C10H12O2異丁香酚 0.13 184.36 C13H28正十三烷 0.04 0.04 0.04 0.04 196.29 C12H20O2乙酸龍腦酯 0.03 198.39 C14H30正十四烷 0.03 0.02 0.03 0.02 204.35 C15H24(-)-b-欖香烯 0.36 0.15 0.17 0.15 204.36 C15H24β-姜黃烯 0.46 0.46 204.35 C15H24順式-β-金合歡烯 0.09 204.35 C15H24(E)-β-金合歡烯 0.12 0.05 0.03 204.35 C15H24反式-β-金合歡烯 0.05 204.35 C15H24γ-欖香烯 0.26 0.87 0.88 0.13 204.35 C15H24β-柏木烯 0.12 0.05 204.35 C15H24δ-蛇床烯 0.11 0.05 204.35 C15H24β-古巴烯 0.05 204.35 C15H24(+)-b-蛇床烯 2.81 1.23 1.18 1.22 204.35 C15H24雙環(huán)吉馬烯 0.84 204.35 C15H24γ-衣蘭油烯 0.20 0.09 0.09 212.41 C15H32正十五烷 0.04 204.35 C15H24甘香烯 0.09 0.09 220.35 C15H24O 匙桉醇 0.59 0.23 0.21 0.22 188.22 C12H12O2丁烯基苯酞 2.14 1.21 1.27 1.18 204.35 C15H24雪松烯 0.08 204.35 C15H24吉瑪烯 0.09 204.35 C15H24香葉烯B 1.95 204.35 C15H24(+)-香橙烯 0.05 204.35 C15H24蛇麻烯 0.04 204.35 C15H24α-愈創(chuàng)木烯 0.16 204.35 C15H24d-蓽澄茄烯 0.05 202.34 C15H22l-卡拉烯 0.03 222.37 C15H26O (-)-藍桉醇 0.11

222.37 C15H26O 胡蘿卜醇 0.11 0.02 222.37 C15H26O 雪松醇 0.07 192.25 C12H16O2川芎內(nèi)酯 9.01 21.17 20.81 20.82 190.24 C12H14O2反式-藁本內(nèi)酯 61.58 58.31 55.94 57.79 228.41 C15H32O 1-十五醇 0.02 256.47 CH3(CH2)16OH 十七烷醇 0.32 284.52 C19H40O 十九醇 0.03 294.47 C19H34O2亞油酸甲酯 0.11 308.50 C20H36O2亞油酸乙酯 0.04 0.27 0.32 0.32 340.50 C23H32O2抗氧劑2246 0.14 0.32 0.66 0.60 366.71 C26H54二十六烷 0.09 196.37 C14H28環(huán)十四烷 0.08 0.11 0.10 284.48 C18H36O2棕櫚酸乙酯 0.05 0.05 0.05 312.53 C20H40O2棕櫚酸丁酯 0.13 0.09 294.47 C19H34O2(Z,Z)-9,15-十八碳二烯酸甲酯 0.16 0.07 254.49 C18H38正十八烷 0.08

3 討論

從表1可見，本實驗中水蒸氣蒸餾提取樣品共鑒定出47個化合物，石油醚提取樣品共鑒定出27個化合物，乙醚提取樣品共鑒定出27個化合物，正己烷提取樣品共鑒定出28個化合物，相同的化合物有9個，分別占鑒定化合物的78.76%，84.19%，81.87%，82.88%，主要為內(nèi)酯類成分。其中抗氧劑2246可能為貯藏或運輸過程中包裝材料中的成分。4種方法中水蒸氣蒸餾法提取的揮發(fā)油樣品中所含組分種類最多，主要是烯萜類成分。4種提取方法均能提取出川芎揮發(fā)油中的主要成分，相對含量最高的為反式-藁本內(nèi)酯，可將反式-藁本內(nèi)酯作為川芎揮發(fā)油質(zhì)量評價的指標。

[1] 國家藥典委員會.中華人民共和國藥典一部[S].北京:中國醫(yī)藥科技出版社,2010:38.

[2] 謝秀瓊,詹珂,尹蓉莉,等.川芎揮發(fā)油的研究進展[J].時珍國醫(yī)國藥,2007,18(6):1508.

[3] 盛艷梅,孟憲麗,李春雨,等.川芎揮發(fā)油對大鼠大腦皮層神經(jīng)細胞體外存活及腦缺血再灌注損傷的影響[J].時珍國醫(yī)國藥,2012,23(3):536.

(責任編輯：李蕓霞)

GC-MS detection of essential oil of Chuanxiong Rhizoma extracted using different methods

LIU Xiao-fen, LIAN yan, GAO Bi-xing, LAN Zhi-qiong, LU Xian-ming//( Pharmacy College, Chengdu University of Traditional Chinese Medicine; The Ministry of Education Key Laboratory of Standardization of Chinese Herbal Medicine; State Key Laboratory Breeding Base of Systematic Research, Development and Utilization of Chinese Medicine Resources Co-founded by Sichuan Province and MOST, Chengdu 611137, China)

Objective: To compare and analyze essential oil of Chuanxiong Rhizoma extracted using different methods. Method: Samples were analyzed by gas chromatography-mass spectrometer. Result: There were 9 components in the volatile oil extracted by 4 kinds of methods. The steam distillation extracts contained more components than others. The types of constituents in the steam distillation extracts were alkenes and terpenes. Conclusion: Four kinds of extraction methods can extract the main ingredient in Chuanxiong Rhizoma. The main ingredients are lactone. The highest level of ingredients is trans-ligustilide.

Slices of Chuanxiong Rhizoma; essential oil; chemical composition; GC-MS

R 283

A

1674-926X(2014)03-006-03?

成都中醫(yī)藥大學藥學院 中藥材標準化教育部重點實驗室中藥資源系統(tǒng)研究與開發(fā)利用省部共建國家重點實驗室培育基地，四川 成都 611137

劉曉芬，女，在讀碩士研究生，從事中藥品種、品質(zhì)與資源開發(fā)研究Tel:13980622836 Email:jxjjliuxiaofen@163.com

盧先明，男，教授，從事中藥品種、品質(zhì)與資源開發(fā)研究

2014-01-20建立川芎揮發(fā)油的質(zhì)量標準提供依據(jù)。