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    直腸神經(jīng)內(nèi)分泌腫瘤G1內(nèi)鏡及病理學(xué)特征分析

    2014-03-09 18:02:15吳林林胡艷萍劉鳳閣
    疑難病雜志 2014年11期
    關(guān)鍵詞:內(nèi)分泌直腸內(nèi)鏡

    吳林林,胡艷萍,劉鳳閣

    論著·臨床

    直腸神經(jīng)內(nèi)分泌腫瘤G1內(nèi)鏡及病理學(xué)特征分析

    吳林林,胡艷萍,劉鳳閣

    目的探討直腸神經(jīng)內(nèi)分泌腫瘤(NEN)G1的內(nèi)鏡和病理學(xué)特征。方法回顧性分析2007年1月—2012年12月行內(nèi)鏡活檢并參考2010年WHO消化系統(tǒng)腫瘤分類標(biāo)準(zhǔn)病理診斷為NEN G1 18例患者臨床資料,結(jié)合內(nèi)鏡觀察結(jié)果及顯微鏡下組織學(xué)形態(tài)變化進(jìn)行綜合分析,免疫組化方法檢測(cè)細(xì)胞廣譜角蛋白(AE1/AE3)、細(xì)胞角蛋白(CK8/18)、嗜鉻粒素A(CgA)、突觸素(Syn)、神經(jīng)元特異性烯醇化酶(NSE)、核抗原(Ki-67)表達(dá)情況。結(jié)果NEN G1在內(nèi)鏡下多為黏膜隆起性腫物,活動(dòng)度尚可,質(zhì)地偏硬。顯微鏡下腫瘤細(xì)胞排列成片狀、巢狀、條帶狀等結(jié)構(gòu);細(xì)胞較小,形態(tài)一致,核深染,無或很少有核分裂相。AE1/AE3、CK8/18、CgA、Syn及NSE的陽(yáng)性率分別為100.0%、88.9%、83.3%、77.8%及55.6%,Ki-67陽(yáng)性率均≤2%。結(jié)論NEN G1缺乏特異性臨床表現(xiàn),通常體積較小,內(nèi)鏡觀察不易明確診斷,AE1/AE3、CK8/18、CgA、Syn等的免疫組化檢測(cè)對(duì)于輔助病理診斷尤為重要。

    神經(jīng)內(nèi)分泌腫瘤G1,直腸;內(nèi)鏡檢查;病理學(xué)特征

    直腸神經(jīng)內(nèi)分泌腫瘤(neuroendocrine neoplasm,NEN) G1起源于胺前體攝取及脫羧(APUD)細(xì)胞中的腸嗜鉻細(xì)胞,具有潛在惡性的特點(diǎn),占胃腸道腫瘤的第3位,約占14%[1]。近年來,隨著內(nèi)鏡的廣泛應(yīng)用及病理診斷水平的提高,NEN G1的檢出率逐年提高[2]。本文對(duì)18例直腸NEN G1的內(nèi)鏡和病理學(xué)特征及其治療方式進(jìn)行回顧性分析,以臨床和病理的角度總結(jié)NEN G1的主要特征,報(bào)道如下。

    1 資料與方法

    1.1 臨床資料 收集我院2007年1月—2012年12月經(jīng)內(nèi)鏡檢出并經(jīng)病理證實(shí)的直腸NEN G1 18例,其中男12例(66.7%),女6例(33.3%),年齡21~82歲,中位年齡50.8歲。所有患者均表現(xiàn)為非特異性消化道癥狀,表現(xiàn)為腹痛者 3例(16.7%),便血者2例(11.1%),排便習(xí)慣改變者5例(27.8%),惡心嘔吐者2例(11.1%),腹脹者3例(16.7%),無癥狀者3例(16.7%),均無類癌綜合征。18例中1例(5.6%)廣泛轉(zhuǎn)移,無手術(shù)指征;7例(38.9%)行內(nèi)鏡下高頻電切除術(shù);4例(22.2%)行內(nèi)鏡下黏膜切除術(shù);4例(22.2%)行經(jīng)肛門腫物切除術(shù);2例(11.1%)行根治性手術(shù),其中Miles術(shù)式和Dixon術(shù)式各1例。

    1.2 內(nèi)鏡檢查 所有患者均接受纖維結(jié)腸鏡檢查,記錄病變部位、大小、顏色及形態(tài)。

    1.3 免疫組化方法 標(biāo)本經(jīng)10%中性福爾馬林固定,常規(guī)石蠟包埋,4 μm厚連續(xù)切片。病理切片均經(jīng)免疫組織化學(xué)SP法染色,將已知的陽(yáng)性切片作陽(yáng)性對(duì)照,磷酸鹽緩沖液(PBS)代替一抗作陰性對(duì)照。二氨基聯(lián)苯胺(DAB)顯色后顯微鏡下觀察結(jié)果。

    1.4 免疫組化結(jié)果判定 細(xì)胞廣譜角蛋白(AE1/AE3)、細(xì)胞角蛋白(CK8/18)、嗜鉻粒素(CgA)、突觸素(Syn)、神經(jīng)元特異性烯醇化酶(NSE)抗體的著色部位均定位于胞漿,陽(yáng)性判定標(biāo)準(zhǔn)為背景清晰的情況下細(xì)胞漿染色為棕黃色顆粒,其中CgA、Syn、NSE只要有定位準(zhǔn)確的陽(yáng)性表達(dá)即為陽(yáng)性;Ki-67表達(dá)于腫瘤細(xì)胞核,需要計(jì)數(shù)至少50個(gè)高倍視野,挑選表達(dá)最強(qiáng)的區(qū)域計(jì)數(shù)至少500~2 000個(gè)細(xì)胞的陽(yáng)性率。

    2 結(jié) 果

    2.1 內(nèi)鏡檢查結(jié)果 直腸NEN G1 18例均為單發(fā),直徑<1 cm者11例(61.1%),1~2 cm者4例(22.2%),>2 cm者3例(16.7%);黃色或灰黃色12 例(66.7%),灰褐色 2例(11.1%),灰白色 4例(22.2%);距肛門<5 cm者7例(38.9%),≥5 cm者11例(61.1%)。

    16例(88.9%)表現(xiàn)為黏膜下腫物凸向腸腔,其中8例為廣基隆起,4例為亞蒂狀隆起,4例為結(jié)節(jié)狀隆起,質(zhì)地均較硬、易推動(dòng);14例(77.8%)表面多有正常黏膜覆蓋,1例(5.6%)表面糜爛、潰瘍,1例(5.6%)中央見臍狀凹陷。1例(5.6%)表現(xiàn)為不規(guī)則隆起,環(huán)腸腔2/3周,不易推動(dòng)、質(zhì)硬,表面伴出血及潰瘍;1例(5.6%)為廣基的息肉樣隆起,似與周圍組織粘連,不易推動(dòng)。

    內(nèi)鏡診斷為息肉2例(11.1%),腺瘤3例(16.7%),隆起性病變性質(zhì)待查10例(55.6%),直腸癌1例(5.6%),NEN G1者2例(11.1%)。

    2.2 病理HE染色結(jié)果 腫瘤細(xì)胞排列成小巢狀、結(jié)節(jié)狀、島嶼狀、梁狀、條帶狀結(jié)構(gòu);細(xì)胞較小,圓形、卵圓形、多邊形,細(xì)胞形態(tài)一致;胞漿嗜酸或呈空泡狀,細(xì)胞核大小一致,圓形或橢圓形,核深染,染色質(zhì)分布均勻,無明顯核仁,腫瘤細(xì)胞核分裂相少見或罕見;腫瘤組織無壞死,間質(zhì)毛細(xì)血管豐富(圖1見封3)。

    2.3 免疫組織化學(xué)結(jié)果 AE1/AE3、CK8/18、CgA、Syn、NSE陽(yáng)性率分別為100.0%、88.9%、83.3%、77.8%及55.6%。其中1種神經(jīng)內(nèi)分泌標(biāo)記物陽(yáng)性 2例 (11.1%),同時(shí)2種標(biāo)記物陽(yáng)性 10例(55.6%),同時(shí)3種標(biāo)記物陽(yáng)性 6例(33.3%),18例病例中均至少有1種神經(jīng)內(nèi)分泌標(biāo)記物表達(dá)(圖2、圖3見封3)。Ki-67陽(yáng)性率均≤2%(圖4見封3)。

    3 討 論

    NEN是一組異質(zhì)性腫瘤,具有從惰性、低度惡性到顯著惡性、高侵襲性和轉(zhuǎn)移性等一系列生物學(xué)行為。直腸NEN在胃腸道NEN中占第1位,在較長(zhǎng)的一段時(shí)間內(nèi),NEN的命名、分類混亂不統(tǒng)一,診斷和治療缺乏規(guī)范,使NEN的早期診斷率低,以致延誤治療[3]。臨床和病理醫(yī)師廣泛應(yīng)用“類癌”這一術(shù)語(yǔ),以至于長(zhǎng)期以來一直應(yīng)用于此類腫瘤的診斷。在2010年新版的WHO消化系統(tǒng)腫瘤分類中[4],摒棄了“類癌”這一術(shù)語(yǔ),主要考慮到類癌一詞既不能反映腫瘤的起源和激素分化活性,也不能提示腫瘤的生物學(xué)行為。在新版的WHO分類中NEN泛指所有源自神經(jīng)內(nèi)分泌細(xì)胞的腫瘤,參照歐洲NEN協(xié)會(huì)指南新增加了分級(jí)系統(tǒng)對(duì)所有NEN進(jìn)行組織學(xué)分級(jí),以進(jìn)一步判斷惡性程度。按組織學(xué)和增殖活性分級(jí),核分裂相和Ki-67陽(yáng)性指數(shù)為2項(xiàng)重要的指標(biāo)。分類如下:NEN G1(低級(jí)別)核分裂相為≤1個(gè)/10HPF,Ki-67陽(yáng)性指數(shù)≤2%;NEN G2(中級(jí)別)核分裂相為2~20個(gè)/10HPF,Ki-67陽(yáng)性指數(shù)3~20%;NEN G3(高級(jí)別)核分裂相為>20個(gè)/10HPF,Ki-67陽(yáng)性指數(shù)>20%[5]。核分裂相和Ki-67指數(shù)一般呈正相關(guān)的關(guān)系,少數(shù)情況下兩者表達(dá)不一致,此時(shí)采用分級(jí)較高的結(jié)果。此分級(jí)系統(tǒng)在Ki-67計(jì)數(shù)時(shí)需要計(jì)數(shù)至少50個(gè)高倍視野,應(yīng)該挑選表達(dá)最強(qiáng)的區(qū)域計(jì)數(shù)至少500~2 000個(gè)細(xì)胞的陽(yáng)性率。目前此分類標(biāo)準(zhǔn)已得到大多數(shù)學(xué)者的認(rèn)可,且已得到臨床病理的廣泛應(yīng)用[6]。

    NEN G1是一種潛在惡性的腫瘤,具有生長(zhǎng)緩慢、病程長(zhǎng)的特點(diǎn),其預(yù)后好,早期診斷和早期治療有助于提高患者生存質(zhì)量及生存率[7]。NEN G1起病隱匿,臨床癥狀無特異性,病變的檢出有賴于細(xì)致的內(nèi)鏡檢查。分析本研究中18例病變內(nèi)鏡下特點(diǎn)發(fā)現(xiàn),在普通的內(nèi)鏡下88.9%的病例僅能辨別為黏膜隆起性病變,多數(shù)為廣基隆起,活動(dòng)度尚可,活檢時(shí)可感受到質(zhì)地較硬。在本研究中內(nèi)鏡診斷符合率僅達(dá)到11.1%,較難與息肉、腺瘤及脂肪瘤鑒別,因此早期認(rèn)識(shí)其內(nèi)鏡下特點(diǎn)對(duì)診斷有一定的指導(dǎo)意義。而診斷隆起性病變性質(zhì)待查達(dá)62.1%,說明其內(nèi)鏡下明確診斷是有一定難度的,內(nèi)鏡醫(yī)師應(yīng)仔細(xì)體會(huì)病變的質(zhì)感及活動(dòng)度,仔細(xì)觀察黏膜隆起的形狀及層次。NEN G1病灶多位于黏膜固有層或黏膜下層,表面多被覆正常黏膜,極易漏診,因此取材時(shí)應(yīng)取到黏膜下層才有價(jià)值。韓建勇等[8]認(rèn)為腫瘤的最佳活檢部位是腫物頂部,若病灶頂部有潰瘍或凹陷時(shí),活檢陽(yáng)性率會(huì)更高。Kim等[9]認(rèn)為內(nèi)鏡下腫瘤的大小、形態(tài)、顏色均有助于腫瘤良惡性判斷。內(nèi)鏡醫(yī)師應(yīng)提高對(duì)隆起性病變的警惕,仔細(xì)觀察腫物的顏色、質(zhì)地、形態(tài)、黏膜變化,熟悉NEN G1內(nèi)鏡下的特點(diǎn)能有效提高肉眼的診斷率,有效避免誤診及漏診。當(dāng)腫瘤>2 cm或浸潤(rùn)肌層后較難與一般浸潤(rùn)性癌鑒別,其質(zhì)地均較硬,尤其是腫物呈環(huán)腸腔生長(zhǎng)時(shí)肉眼幾乎無法與一般腺癌鑒別,這時(shí)需要內(nèi)鏡醫(yī)師準(zhǔn)確足夠地取材,由病理醫(yī)生進(jìn)行精確地診斷。

    NEN G1的明確診斷主要依靠組織病理學(xué)檢查[10],特別是免疫組化檢查。典型的NEN G1腫瘤排列成實(shí)性巢狀、帶狀、腺管樣或小梁狀;腫瘤細(xì)胞形態(tài)均勻一致,細(xì)胞漿中等或豐富,核圓形或橢圓形,大小形態(tài)規(guī)則;染色質(zhì)成略粗的細(xì)顆粒狀,核仁一般不明顯;在瘤細(xì)胞周圍有豐富的小血管和不等量的纖維間質(zhì)包繞。NEN G1的組織學(xué)類型一般分為5種,A型:實(shí)心巢狀、結(jié)節(jié)狀;B型:梁狀或條帶狀;C型:管狀、腺泡狀或菊形團(tuán)狀;D型:無上述典型結(jié)構(gòu);E型:混合型;一般以混合型為主[11]。本研究88.9%的病例中細(xì)胞均具有典型的NEN G1特點(diǎn),上述5種組織排列結(jié)構(gòu)均存在。免疫組化染色是NEN G1診斷和鑒別診斷主要輔助手段,尤其當(dāng)組織病理特點(diǎn)不典型時(shí)顯得尤為重要。突觸素(Syn)是由X染色體上SYP基因編碼的一種突觸囊泡糖蛋白,存在于人體的所有神經(jīng)內(nèi)分泌細(xì)胞。嗜鉻粒素A(CgA)位于神經(jīng)元和神經(jīng)內(nèi)分泌細(xì)胞的分泌囊泡中,不同神經(jīng)內(nèi)分泌細(xì)胞所含囊泡數(shù)量也不同[12]。神經(jīng)元特異性烯醇化酶(NSE)由神經(jīng)元和神經(jīng)內(nèi)分泌細(xì)胞合成,但在一些非神經(jīng)內(nèi)分泌組織中也有陽(yáng)性表達(dá),其診斷的特異性有些下降。CgA、Syn、NSE在診斷NEN G1中用來證實(shí)腫瘤細(xì)胞是否具有神經(jīng)內(nèi)分泌性質(zhì),所以只要有定性準(zhǔn)確的陽(yáng)性表達(dá),不需要半定量評(píng)價(jià)陽(yáng)性細(xì)胞數(shù),NEN G1的診斷應(yīng)該至少有1種神經(jīng)內(nèi)分泌標(biāo)記表達(dá)。本研究中CgA、Syn、NSE陽(yáng)性率分別為83.3%、77.8%及55.6%,與以往的研究一致。聯(lián)合檢測(cè)將有助于確定腫瘤是否具有神經(jīng)內(nèi)分泌細(xì)胞性質(zhì)。在2011年中國(guó)胃腸胰NEN病理學(xué)診斷共識(shí)會(huì)議上[13],專家組成員充分肯定了免疫組化在診斷NEN G1中具有不可替代的作用,并推薦CgA、Syn作為必要的檢測(cè)項(xiàng)目。此病理學(xué)診斷共識(shí)建議,病理報(bào)告必須涵蓋標(biāo)本類型、腫瘤部位、腫瘤大小及數(shù)目、浸潤(rùn)深度和范圍、脈管和神經(jīng)的累及情況、核分裂相和Ki-67指數(shù)、神經(jīng)內(nèi)分泌標(biāo)志物檢測(cè)結(jié)果、切緣情況、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移等共11項(xiàng)內(nèi)容,這點(diǎn)已得到病理及臨床醫(yī)師的充分肯定并逐漸應(yīng)用于實(shí)際工作中。

    NEN G1需要與NEN G2、NEN G3鑒別,NEN G1細(xì)胞形態(tài)學(xué)比較溫和,無明顯核分裂相和異型,極少見壞死及出血;核分裂相及Ki-67陽(yáng)性指數(shù)是鑒別的要點(diǎn)。當(dāng)腫物>2 cm呈環(huán)腸腔生長(zhǎng)時(shí)需要與腺癌鑒別,腺癌一般不表達(dá)神經(jīng)內(nèi)分泌標(biāo)記物,但單一的神經(jīng)內(nèi)分泌標(biāo)記陰性不能完全除外NEN G1,需要聯(lián)合檢測(cè)至少3種神經(jīng)內(nèi)分泌標(biāo)記物[14]。NEN G1組織結(jié)構(gòu)不典型時(shí)極易與惡性黑色素瘤及淋巴瘤混淆,AE1/AE3、CK8/18有助于證實(shí) NEN G1的上皮來源性質(zhì)。

    手術(shù)切除原發(fā)灶是最有效的治療方法。Modlin[15]報(bào)道,NEN G1患者病變局限在直腸者5年生存率為90%,區(qū)域轉(zhuǎn)移者為49%。早期無淋巴結(jié)及血道轉(zhuǎn)移,病變發(fā)展緩慢,及時(shí)手術(shù)切除預(yù)后良好。腫瘤細(xì)胞對(duì)放化療不敏感,放化療只適用于疾病晚期的姑息性治療或輔助性治療。目前越來越多的NEN G1能夠通過早期檢查而被發(fā)現(xiàn),手術(shù)切除使得生存質(zhì)量提高,生存時(shí)間延長(zhǎng)。手術(shù)方式的選擇應(yīng)該綜合考慮,以腫瘤大小及是否浸潤(rùn)肌層為最重要的指標(biāo),也是治療方式選擇的主要依據(jù)。內(nèi)鏡切除具有損傷小、費(fèi)用低、痛苦少的特點(diǎn)[16]。直徑<1 cm的NEN G1鮮有肌層侵犯及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移,可以通過內(nèi)鏡或手術(shù)局部切除;直徑>2 cm者需經(jīng)腹按直腸癌行根治性切除術(shù)。直徑1~2 cm者,其治療方式一直備受爭(zhēng)議,對(duì)于這類腫瘤,本研究中均行超聲內(nèi)鏡檢查,未侵及肌層者,行高頻電切除術(shù),或內(nèi)鏡下黏膜切除術(shù);侵及肌層者行根治性手術(shù)。本病治療方式的選擇尚無統(tǒng)一規(guī)范,總結(jié)其特點(diǎn)有助于提高對(duì)本病的認(rèn)識(shí)和診療水平。

    總之,在過去的10年里,NEN G1發(fā)病率逐步上升,這可能與臨床醫(yī)師對(duì)NEN G1認(rèn)識(shí)度提高有關(guān),同時(shí)也與病理診斷標(biāo)準(zhǔn)逐步規(guī)范有關(guān)。然而臨床對(duì)于NEN G1的診斷仍然面臨極大的挑戰(zhàn),其命名和分類上仍存在不少混亂,許多醫(yī)師仍沿用已摒棄的“類癌”一詞。目前臨床及病理醫(yī)師對(duì)NEN的認(rèn)識(shí)及治療尚處于逐步深入和統(tǒng)一階段,有待于進(jìn)一步臨床和實(shí)驗(yàn)的深入研究。

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    EndoscopicandpathologicfeaturesofneuroendocrineneoplasmG1intherectum

    >WULinlin,HUYanping,LIUFengge.

    DepartmentofPathology,LuheTeachingHospitalofTheCapitalMedicalUniversity,Beijing100049,China

    ObjectiveTo investigate the endoscope and pathology characteristics of rectal neuroendocrine neoplasm (NEN) G1.MethodsFrom January 2007 to December 2012, retrospective analyzed the clinical data of 18 cases with NEN in G1 which were underwent endoscopic biopsy and diagnosed according to the 2010 WHO classification of tumors of the digestive system of standard pathology. Combined with endoscopic observation and comprehensive analysis of tissue under a microscope for morphological change, immunohistochemical method were used to detect the cell cytokeratins (AE1/AE3), cytoke-ratin (CK8/18), chromogranin A (CgA), synaptophysin (Syn), neuron specific enolase (NSE), nuclear antigen (Ki-67) expression.ResultsNEN G1 under endoscopic were mostly submucosal tumors, can be moved with hard texture. The tumor cells under the microscope arranged in a sheet, nests, banded structure;small cells,consistent shape,hyperchromatic nuclei, no or few mitotic. The positive rate of AE1/AE3, CK8/18, CgA, Syn and NSE were 100.0%, 88.9%, 83.3%, 77.8% and 55.6%, Ki-67 positive rate is less than or equal to 2%.ConclusionNEN G1 lack of specific clinical manifestations, they are usually smaller, endoscopic observation is not easy to confirm the diagnosis, immunohistochemical detection of AE1/AE3, CK8/18, CgA, Syn is very important for the pathological diagnosis.

    Neuroendocrine neoplasm G1,rectal;Endoscope;Pathologic characteristic

    101149 北京,首都醫(yī)科大學(xué)潞河教學(xué)醫(yī)院病理科

    10.3969 / j.issn.1671-6450.2014.11.013

    2014-07-02)

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