羚羊感冒片質(zhì)量分析

林 林，林永強(qiáng)，汪 冰，林 曉，尹寧寧，徐麗華

（山東省食品藥品檢驗(yàn)研究院，山東濟(jì)南250101）

羚羊感冒片質(zhì)量分析

林 林，林永強(qiáng)，汪 冰，林 曉，尹寧寧，徐麗華

（山東省食品藥品檢驗(yàn)研究院，山東濟(jì)南250101）

目的通過(guò)對(duì)2013年全國(guó)范圍內(nèi)抽取的羚羊感冒片進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)檢驗(yàn)及探索性研究，對(duì)該品種的質(zhì)量及標(biāo)準(zhǔn)狀況作出總體分析與評(píng)價(jià)。方法針對(duì)法定標(biāo)準(zhǔn)檢驗(yàn)項(xiàng)目不完善的問(wèn)題，采用高效液相色譜－蒸發(fā)光散射檢測(cè)法（HPLC－ELSD）進(jìn)行山銀花的篩查；采用高效液相色譜法進(jìn)行金銀花、甘草、連翹、牛蒡子等藥味中多指標(biāo)性成分的含量同時(shí)測(cè)定；采用近紅外光譜掃描法建立近紅外光譜庫(kù)，為快速檢驗(yàn)提供依據(jù)。結(jié)果法定標(biāo)準(zhǔn)檢驗(yàn)與探索性研究結(jié)果之間存在顯著差異。結(jié)論探索性研究結(jié)果表明法定標(biāo)準(zhǔn)存在較多缺陷，應(yīng)進(jìn)一步完善現(xiàn)行質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，全面控制產(chǎn)品的質(zhì)量。

羚羊感冒片；質(zhì)量分析；高效液相色譜法

羚羊感冒片由羚羊角、金銀花、連翹、牛蒡子等十味藥組成，具有清熱解表的作用，用于流行性感冒。為全面分析與評(píng)價(jià)該品種的質(zhì)量狀況及標(biāo)準(zhǔn)可行性，結(jié)合2013年國(guó)家評(píng)價(jià)性抽驗(yàn)工作，對(duì)全國(guó)范圍內(nèi)抽取的17個(gè)生產(chǎn)企業(yè)共計(jì)154批樣品進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)檢驗(yàn)及探索性研究。

1 按法定標(biāo)準(zhǔn)檢驗(yàn)情況

該品種現(xiàn)行質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)為《中國(guó)藥典》2010年版（一部），標(biāo)準(zhǔn)基本可行。按照法定標(biāo)準(zhǔn)檢驗(yàn)，樣品全部合格，合格率為100%。

2 探索性研究

2.1 山銀花的篩查 目前，金銀花藥材市場(chǎng)比較混亂，山銀花摻雜現(xiàn)象時(shí)有發(fā)生。為了考察生產(chǎn)企業(yè)是否以符合標(biāo)準(zhǔn)的金銀花投料進(jìn)行生產(chǎn)，參照《中國(guó)藥典》2010年版山銀花藥材及相關(guān)文獻(xiàn)［2～4］，以灰氈毛忍冬皂苷乙為指標(biāo)，建立了山銀花的HPLC－ELSD檢查方法，并對(duì)收集的91批羚羊感冒片樣品進(jìn)行了篩查。

2.1.1 儀器與試藥 美國(guó)Waters 2695－2998高效液相色譜儀；Sartorius CP225D電子天平?；覛置潭碥找覍?duì)照品由成都普思生物科技有限公司，批號(hào)：PS10020701。乙腈為美國(guó)Merck公司生產(chǎn)的色譜純?cè)噭?，甲醇為天津康科德生產(chǎn)的分析純?cè)噭?，試?yàn)用水為Millipore純化的去離子水。

2.1.2 實(shí)驗(yàn)方法 色譜柱：大連依利特C18（4.6 mm×250 mm，5μm），以水為流動(dòng)相A，以乙腈為流動(dòng)相B，按表1進(jìn)行梯度洗脫，柱溫30℃；蒸發(fā)光散射檢測(cè)器檢測(cè)。

表1 梯度洗脫程序

2.1.3 對(duì)照品溶液的制備 精密稱取灰氈毛忍冬皂苷乙對(duì)照品10.24 mg，加50%甲醇溶解并稀釋至50 mL，搖勻，即得到濃度為0.204 8 mg·mL－1的對(duì)照品溶液。

2.1.4 供試品溶液的制備 取本品10片，除去包衣，精密稱定，研細(xì)，取約0.5 g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入50%甲醇25 mL，密塞，稱定重量，超聲處理（功率500 W，頻率40 kHz）30 min，放冷，再稱定重量，用50%甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過(guò)，取續(xù)濾液，即得。

2.1.5 實(shí)驗(yàn)結(jié)果 91批羚羊感冒片中有8批檢出灰氈毛忍冬皂苷乙，表明部分生產(chǎn)企業(yè)對(duì)藥材控制不嚴(yán)，存在摻雜使用山銀花的現(xiàn)象。

2.2 金銀花、連翹、牛蒡子等藥味中多指標(biāo)性成分的含量同時(shí)測(cè)定 《中國(guó)藥典》2010年版（一部）僅對(duì)牛蒡子進(jìn)行了含量測(cè)定，金銀花、連翹等主要藥味均未進(jìn)行含量控制。為了保證企業(yè)使用合格的藥材以及按處方量投料，建立了HPLC法同時(shí)測(cè)定羚羊感冒片中綠原酸、異綠原酸A、B、C、甘草苷、連翹酯苷A、連翹苷、牛蒡苷、牛蒡苷元等多種指標(biāo)性成分的含量［5～9］，并對(duì)全部154批樣品進(jìn)行了測(cè)定。

2.2.1 儀器與試藥 綠原酸、甘草苷、連翹酯苷A、連翹苷、牛蒡苷對(duì)照品由中國(guó)食品藥品檢定研究院提供，批號(hào)分別為110753－201314、111610－201106、111810－201304、110821－201213、110819－201309。其他同“2.1.1”項(xiàng)下。

2.2.2 實(shí)驗(yàn)方法 色譜柱：Agilent Zorbax SB C18（4.6 mm×250 mm，5μm），以乙腈為流動(dòng)相A，水為流動(dòng)相B，按表2中的規(guī)定進(jìn)行梯度洗脫；流速：1 mL·min－1。采用波長(zhǎng)切換技術(shù)，0～21 min，330 nm；21～28.6 min，360 nm；28.6～55 min，280 nm。理論板數(shù)按牛蒡苷峰計(jì)算應(yīng)不低于4 000。

2.2.3 對(duì)照品溶液的制備 分別精密稱取上述對(duì)照品適量，加50%甲醇溶解并稀釋成每1 mL含綠原酸86.56μg、甘草苷53.20μg、連翹酯苷A 52.40 μg、連翹苷46.88μg、牛蒡苷42.40μg的混合溶液，即得。

表2 梯度洗脫程序

2.2.4 供試品溶液的制備 同”2.1.4”項(xiàng)下。

2.2.5 實(shí)驗(yàn)結(jié)果 參考《中國(guó)藥典》2010年版（一部）金銀花、甘草、連翹、牛蒡飲片的含量限度，結(jié)合實(shí)際測(cè)定結(jié)果以及生產(chǎn)工藝，制訂所測(cè)成分的含量限度。結(jié)果154批樣品中，56批樣品連翹酯苷A的含量低于限度；12批樣品甘草苷的含量低于限度；90批樣品綠原酸的總含量低于限度。表明生產(chǎn)企業(yè)對(duì)生產(chǎn)所用藥材控制不嚴(yán)，藥材質(zhì)量較差或者未按規(guī)定處方量投料。

2.3 近紅外分析 儀器：德國(guó)布魯克公司Bruker Matrix－F型傅里葉變換近紅外光譜儀。測(cè)定方法：對(duì)154批樣品逐一掃描，對(duì)光譜進(jìn)行預(yù)處理，通過(guò)一階導(dǎo)數(shù)化和矢量歸一化，應(yīng)用馬氏距離方法建立一致性檢驗(yàn)?zāi)Ｐ汀＝Y(jié)果各企業(yè)生產(chǎn)的產(chǎn)品存在一定的差異性，與中檢院對(duì)具體的某“一廠一品一規(guī)”的藥品建立的一致性檢驗(yàn)?zāi)Ｐ偷囊笙喾稀?/p>

3 討論

3.1 總體評(píng)價(jià) 通過(guò)對(duì)羚羊感冒片進(jìn)行質(zhì)量分析，發(fā)現(xiàn)以下兩方面的問(wèn)題：①現(xiàn)行標(biāo)準(zhǔn)檢驗(yàn)項(xiàng)目不完善，應(yīng)進(jìn)一步進(jìn)行補(bǔ)充；②部分企業(yè)對(duì)原料控制力度不夠，存在以次充好、偷工減料的可能。

3.2 建議 為提高質(zhì)量意識(shí)和質(zhì)控水平，以保證羚羊感冒片的安全性和有效性。建議：①在現(xiàn)行標(biāo)準(zhǔn)的基礎(chǔ)上增加山銀花的檢查項(xiàng)以及連翹、甘草、金銀花中指標(biāo)性成分的含量測(cè)定項(xiàng)；②加強(qiáng)監(jiān)督管理；組織對(duì)相關(guān)企業(yè)的生產(chǎn)核查。

［1］國(guó)家藥典委員會(huì).中華人民共和國(guó)藥典2010年版（一部）［S］.北京：中國(guó)醫(yī)藥科技出版社，2010：57，160，923.

［2］谷筱玉，陳振鵬，陳乾平，等.HPLC－UV－ELSD測(cè)定山銀花中綠原酸、灰氈毛忍冬皂苷乙和川續(xù)斷皂苷乙的含量［J］.藥物分析雜志，2011，31（5）：884－887.

［3］張璐，曾文雪.HPLC－ELSD同時(shí)測(cè)定山銀花中綠原酸、木犀草苷和川續(xù)斷皂苷乙的含量［J］.江西中醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，2011，23（4）：40－42. ［4］盧鳳來(lái)，蔣海英，陳月圓，等.HPLC－ELSD法測(cè)定山銀花中綠原酸、灰氈毛忍冬皂苷乙和川續(xù)斷皂苷乙［J］.中成藥，2013，35（8）：1821－1823.

［5］段佳葳，胡齊莉，張婷婷.HPLC法測(cè)定羚羊感冒片中牛蒡苷的含量［J］.黑龍江醫(yī)藥，2007，20（4）：299－300.

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［7］郝洪濤，郝鳳霞.RP－HPLC法測(cè)定羚羊感冒片中綠原酸和甘草酸的含量［J］.安徽農(nóng)業(yè)科學(xué)，2008，36（9）：3493－3494.

［8］邱海蘊(yùn)，袁才瓊，康紅英.RP－HPLC法測(cè)定羚羊感冒片中綠原酸的含量［J］.中國(guó)藥師，2008，11（10）：1218－1219.

［9］林永強(qiáng)，王淑華，徐麗華，等.金銀花與山銀花的鑒別方法研究［J］.藥學(xué)研究，2013，22（2）：69－71.

Quality analysis of Lingyang Ganmao Tablets

LIN Lin，LIN Yong-qiang，WANG Bing，LIN Xiao，YIN Ning-ning，XU Li-hua（Shandong Province Institute for Food and Drug Control，Jinan 250101，China）

ObjectiveTo evaluate the quality situation and problems of Lingyang Ganmao Tablets by testing and analyzing samples collected from drug manufacture and market all over China in 2013.MethodsTo combine the legal test with exploratory research.To inspect Lonicera confusa DC.by HPLC－ELSD；To determine contents of honeysuckle，liquorice，forsythia，burdock by HPLC；To establish NIR spectrum database as the foundation for instant test；To comply statistical analysis for the results of legal testand exploratory research.ResultsTherewere obvious differences between the results of legal test and exploratory research.ConclusionThe results of exploratory research demonstrated thatmany defects existed in the legal drug specifications，and a series of exclusive，accurate，and sensitivemethods should be established to fully control the quality of sodium aescinate for injection.

Lingyang Ganmao Tablets；Quality analysis；HPLC

R927.1

A

2095－5375（2014）09－0514－003

山東省自然科學(xué)基金2013（No.R2013HM074）

林林，女，主管藥師，研究方向：藥品檢驗(yàn)，E－mail：linlinsfda＠163.com