生殖相關(guān)腎虛證和補(bǔ)腎中藥作用機(jī)制的研究進(jìn)展

岑妍慧，趙飛蘭，范 蓉(綜述)，何國珍(審校)

(廣西中醫(yī)藥大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院，南寧 530001)

中醫(yī)根據(jù)“腎主生殖”的理論，認(rèn)為不孕癥屬于腎虛證，而現(xiàn)代醫(yī)學(xué)認(rèn)為卵子發(fā)育成熟和排出以及精子成熟障礙是臨床不孕癥的主要原因之一，其發(fā)生均受到下丘腦-垂體-生殖腺軸等功能活動(dòng)的調(diào)節(jié)。近年大量的實(shí)驗(yàn)研究表明,以補(bǔ)腎法為主的方藥對生殖腺軸有多水平、多靶點(diǎn)的調(diào)節(jié)作用。該文就生殖相關(guān)的腎虛證的本質(zhì)和補(bǔ)腎方藥對下丘腦-垂體-生殖腺軸的作用機(jī)制進(jìn)行綜述。

1 生殖相關(guān)腎虛證本質(zhì)的研究進(jìn)展

1.1器官組織形態(tài)學(xué)和功能上的變化 大量的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)顯示,生殖相關(guān)的腎虛證存在著下丘腦-垂體-生殖腺各器官形態(tài)學(xué)和分泌功能上的變化。陳英華等[1]和謝玲玲等[2]的實(shí)驗(yàn)顯示，用“房事不節(jié)”方法12周后建立的腎虛雄性小鼠的睪丸重量、精子活動(dòng)率和密度、精子畸形率、母鼠懷孕胚胎數(shù)明顯下降,精子特異性酶乳酸脫氫酶-X相對活性下降,同時(shí)可見曲細(xì)精管退化變性、生精上皮顯著變薄和出現(xiàn)空泡,生精細(xì)胞層數(shù)減少明顯。包宇等[3]的實(shí)驗(yàn)提示,應(yīng)用氫化可的松建立的腎陽虛雄性小鼠出現(xiàn)體質(zhì)量下降、血清睪酮水平下降、性腺雄激素受體和mRNA表達(dá)下降。杜惠蘭等[4]的實(shí)驗(yàn)表明，雄激素誘導(dǎo)無排卵腎虛模型雌性大鼠中出現(xiàn)卵巢各級卵泡減少，子宮內(nèi)膜變薄和腺體減少，卵巢和子宮的雌激素受體和孕激素受體表達(dá)水平下降。宋春風(fēng)等[5-6]的實(shí)驗(yàn)顯示，醋酸可的松建立的腎陽虛大鼠的下丘腦正中隆起的結(jié)構(gòu)發(fā)生明顯變化，垂體促腎上腺皮質(zhì)激素細(xì)胞和睪丸細(xì)胞出現(xiàn)結(jié)構(gòu)上的改變。李燦東等[7]研究提示腎虛原發(fā)性不孕癥患者的性激素水平低于正常健康人。錢風(fēng)雷等[8]研究觀察長期大運(yùn)動(dòng)量游泳運(yùn)動(dòng)所致腎虛大鼠發(fā)現(xiàn)其出現(xiàn)低血睪酮以及下丘腦-垂體-性腺軸各器官在光鏡和電鏡結(jié)構(gòu)上的變化。用雷公藤多苷片造成雌性生殖功能障礙大鼠腎虛模型[9-10]，結(jié)果顯示雌性小鼠動(dòng)情周期紊亂、生殖激素水平降低、子宮重量減輕及血清T水平高于正常等。

1.2分子形態(tài)學(xué)上的改變 隨著分子生物學(xué)技術(shù)的發(fā)展，對于生殖相關(guān)的腎虛證的本質(zhì)已經(jīng)深入到分子水平的研究。宋潔等[11]應(yīng)用基因芯片的方法對腎陽虛小鼠模型的基因改變，篩選出大量的差異表達(dá)基因。張昕賢等[12]采用雷公藤多苷造成的生殖功能減退腎虛模型，顯示雷公藤多苷對生殖相關(guān)基因的表達(dá)有影響。王劍等[13]的實(shí)驗(yàn)應(yīng)用RNA基因芯片技術(shù)顯示，與正常大鼠相比，去卵巢組大鼠下丘腦基因譜出現(xiàn)多個(gè)基因的上調(diào)和下調(diào),這些基因與更年期綜合征腎陰虛病變密切相關(guān)。

2 補(bǔ)腎中藥治療生殖相關(guān)腎虛證的研究進(jìn)展

2.1補(bǔ)腎中藥對生殖相關(guān)腎虛證動(dòng)物模型的實(shí)驗(yàn)研究 近些年實(shí)驗(yàn)顯示補(bǔ)腎中藥可改善生殖相關(guān)腎虛證動(dòng)物模型的形態(tài)結(jié)構(gòu)、分子結(jié)構(gòu)和調(diào)節(jié)性腺軸的分泌功能。包宇等[3]和李波等[14]的實(shí)驗(yàn)顯示，淫羊藿苷可以緩解腎陽虛小鼠睪酮及性腺雄激素受體基因的表達(dá)下調(diào)以及提高腎陽虛小鼠血清的皮質(zhì)醇和睪酮的水平,并能調(diào)控促腎上腺皮質(zhì)激素釋放激素(corticotropin-releasing hormone，CRH)和阿片黑色素促皮質(zhì)激素原(proopiomelanocortin,POMC)基因表達(dá)。郭瑞新等[15]和金紅蘭等[16]的實(shí)驗(yàn)表明，冬蟲夏草可提高腎陽虛模型小鼠的生殖功能，并改善睪丸形態(tài)等指標(biāo)。許翠萍等[17]實(shí)驗(yàn)顯示，腎陽虛小鼠腎上腺組織形態(tài)學(xué)及超微結(jié)構(gòu)均發(fā)生退行性改變，而腎氣丸治療后可使腎陽虛小鼠異常的腎上腺細(xì)胞形態(tài)得以恢復(fù)。陳蓉等[18]應(yīng)用資沖顆粒直腸給藥能促進(jìn)晚幼大鼠卵泡發(fā)育，提高去勢小鼠雌激素水平，提示補(bǔ)腎中藥促卵泡發(fā)育的作用可能與提高雌激素水平有關(guān)。張昕賢等[19]的實(shí)驗(yàn)顯示，雷公藤生殖減退模型小鼠的精子形態(tài)、睪丸結(jié)構(gòu)發(fā)生改變，同時(shí)睪酮、雌二醇、卵泡刺激素、尿人絨毛膜促性腺激素等性激素水平發(fā)生改變，而補(bǔ)益腎陽藥物可以改善這些改變，起到干預(yù)作用，提示中醫(yī)“腎”蘊(yùn)含著下丘腦-垂體-性腺部分生殖內(nèi)分泌的功能。

2.2補(bǔ)腎中藥對生殖相關(guān)腎虛證的作用機(jī)制的實(shí)驗(yàn)研究 大量實(shí)驗(yàn)表明，補(bǔ)腎中藥可通過改變和調(diào)控下丘腦-腦垂體-性腺軸的形態(tài)結(jié)構(gòu)和基因而發(fā)揮作用。

2.2.1補(bǔ)腎中藥對下丘腦和腦垂體的調(diào)節(jié)作用 崔建梅等[20]實(shí)驗(yàn)提示，用補(bǔ)腎中藥能提高腎陽虛大鼠模型的運(yùn)動(dòng)能力,其機(jī)制可能與補(bǔ)腎中藥提高力竭運(yùn)動(dòng)大鼠血清睪酮水平，同時(shí)降低大鼠血清皮質(zhì)醇水平及下丘腦室旁核c-fos的過度表達(dá)有關(guān)。孫鑫等[21]的實(shí)驗(yàn)顯示，腎陽虛大鼠下丘腦中蛋白激酶C(protein kinase C，PKC)α與PKCβ2的表達(dá)發(fā)生改變,?？战M大鼠與正常組大鼠存在顯著差異，而補(bǔ)腎中藥可調(diào)節(jié)下丘腦中PKCα與PKCβ2的表達(dá)，說明PKC的變化可能是腎虛發(fā)生的生物學(xué)機(jī)制之一。蔣淑君等[22]的實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，腎陽虛動(dòng)物睪丸組織的鈣調(diào)蛋白mRNA的表達(dá)較正常對照高，說明腎陽虛動(dòng)物性腺水平的損傷與鈣調(diào)蛋白mRNA表達(dá)升高也有關(guān)，補(bǔ)腎中藥淫羊藿總黃酮的補(bǔ)腎壯陽調(diào)整腎陽虛作用與抑制下丘腦組織鈣調(diào)蛋白mRNA基因表達(dá)可能有密切關(guān)系。李波等[14]的實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，腎陽虛動(dòng)物血中皮質(zhì)醇和睪酮水平降低的同時(shí),下丘腦CRH基因表達(dá)量增加,同時(shí)垂體POMC基因表達(dá)量降低,而補(bǔ)腎中藥能改變血中激素水平以及下丘腦CRH基因和垂體POMC基因的表達(dá)情況。李嬪等[23]的實(shí)驗(yàn)表明，滋陰瀉火與益腎填精中藥可通過對下丘腦生長抑素基因表達(dá)與蛋白表達(dá)的調(diào)控，調(diào)節(jié)垂體生長激素的合成及釋放。

2.2.2補(bǔ)腎中藥對性腺和激素受體的調(diào)節(jié)作用 補(bǔ)腎中藥可促進(jìn)性腺的內(nèi)調(diào)節(jié)因子的分泌和調(diào)節(jié)性激素及其受體的作用，從而改變性腺的微環(huán)境,調(diào)節(jié)性腺的功能。錢汝紅等[24]的實(shí)驗(yàn)提示，腎虛動(dòng)物的雄激素和雄激素受體的水平下降,補(bǔ)腎中藥能調(diào)節(jié)這一過程,顯示腎虛時(shí)性激素水平影響中樞神經(jīng)系統(tǒng)功能,腦內(nèi)雄激素、雄激素mRNA與5-羥色胺神經(jīng)遞質(zhì)都有相應(yīng)的變化,補(bǔ)腎中藥對中樞神經(jīng)系統(tǒng)功能有調(diào)節(jié)作用。王莉等[25]的實(shí)驗(yàn)提示，補(bǔ)腎中藥可以降低腎虛不孕的動(dòng)物模型的血雄激素和胰島素，使胰腺雄激素mRNA表達(dá)水平下降，是不孕動(dòng)物模型出現(xiàn)了排卵。趙銳等[26]應(yīng)用補(bǔ)腎寧對氫化可的松法復(fù)制腎陽虛模型大鼠灌服，結(jié)果顯示腎陽虛模型大鼠卵巢基質(zhì)金屬蛋白酶9 mRNA表達(dá)減弱，可能與卵泡發(fā)育異常及排卵障礙有關(guān)，補(bǔ)腎寧能夠通過增強(qiáng)腎陽虛模型大鼠卵巢基質(zhì)金屬蛋白酶9 mRNA的表達(dá)，起到促卵泡發(fā)育和促排卵的作用。李沛霖等[27]的實(shí)驗(yàn)表明，補(bǔ)腎調(diào)沖方可通過調(diào)節(jié)卵巢顆粒細(xì)胞的分泌功能，進(jìn)而改善卵巢功能。夏天等[28]的實(shí)驗(yàn)證實(shí)，補(bǔ)腎調(diào)沖方在無卵泡刺激素作用的條件下，可直接促進(jìn)顆粒細(xì)胞內(nèi)胰島素樣生長因子1 mRNA的表達(dá)，使細(xì)胞內(nèi)腺苷環(huán)磷酸的水平增加,從而調(diào)節(jié)顆粒細(xì)胞增殖與分泌功能。補(bǔ)腎中藥可通過調(diào)節(jié)卵巢性激素的分泌及其受體的水平，而影響卵泡的發(fā)育和排卵。陳金秀等[29]的補(bǔ)腎方劑保坤丹丸能顯著增加正常大鼠和腎虛小鼠的卵巢重量,可顯著提高正常大鼠血清卵泡刺激素、黃體生成素的水平，提示保坤丹丸可能具有微量類雌激素樣作用,能促進(jìn)蛋白合成,提高卵巢和子宮重量；同時(shí)保坤丹丸還可以增加腎虛小鼠的自主活動(dòng)次數(shù)、探究次數(shù)，說明保坤丹丸的治療作用不是單純改善生殖內(nèi)分泌的功能,可能還參與全身各系統(tǒng)的調(diào)節(jié),尤其對中樞神經(jīng)系統(tǒng)有一定的調(diào)節(jié)作用。

3 結(jié) 語

生殖相關(guān)的腎虛證存在著多個(gè)器官的組織形態(tài)學(xué)和功能上的改變，尤其以下丘腦-腦垂體-生殖腺軸系列器官系統(tǒng)組織學(xué)形態(tài)上的變化和功能上的改變最為顯著，對生殖相關(guān)的腎虛證的研究目前已經(jīng)深入到基因和分子水平?；诖?，補(bǔ)腎中藥對生殖相關(guān)的腎虛證的治療作用機(jī)制研究也取得了很大的進(jìn)展，但仍存在一些不足，特別是對生殖相關(guān)的腎虛證動(dòng)物模型的造模法的客觀性仍有待于進(jìn)一步探討和商榷。

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