王不留行的化學成分研究

胡金陵，胡 虹，楊 麗

（1.北京大學深圳醫(yī)院，廣東深圳518036；2.青島黃海制藥經(jīng)營有限公司，山東青島266101）

王不留行的化學成分研究

胡金陵1，胡 虹1，楊 麗2

（1.北京大學深圳醫(yī)院，廣東深圳518036；2.青島黃海制藥經(jīng)營有限公司，山東青島266101）

目的對王不留行的化學成分進行研究。方法 采用溶劑提取法，大孔樹脂、反相硅膠C18柱層析以及高效液相色譜法對王不留行乙醇／水提取物進行分離純化，并利用化合物的理化性質(zhì)以及波譜學數(shù)據(jù)確定了化合物的結構。結果從王不留行乙醇／水提取物中分離鑒定了4個化合物的結構，分別為腺苷（1），腺嘌呤（2），（＋）－（S）－N，N，N－三甲基色氨酸內(nèi)銨鹽（3），以及洋芹素－6－C－阿拉伯糖－葡萄糖苷（4）。結論化合物1和2為首次從該植物中分離得到。

王不留行；化學成分；腺苷；腺嘌呤；色氨酸內(nèi)鹽

王不留行為石竹科植物麥藍菜Vaccaria segetalis（Neck.）Garcke的干燥成熟種子，具有行血通經(jīng)，催生下乳，消腫斂瘡等功效，主要用于乳汁不下、經(jīng)閉、痛經(jīng)及乳癰腫痛等，為傳統(tǒng)常用中藥。王不留行資源極其豐富，主產(chǎn)于河北、山東、遼寧和黑龍江等地，以河北產(chǎn)量最大［1］。近些年，國內(nèi)外學者對其化學成分進行了較系統(tǒng)的研究，發(fā)現(xiàn)其中主要含有三萜皂苷、黃酮苷、環(huán)肽以及氨基酸類等化學成分［2～10］。本文為進一步尋找王不留行中的活性成分，采用了多種色譜方法對其醇提取物的正丁醇部位進行了化學成分的研究，從中分離得到了4個化合物，分別為腺苷（1），腺嘌呤（2），（＋）－（S）－N，N，N－三甲基色氨酸內(nèi)銨鹽（3）以及洋芹素－6－C－阿拉伯糖－葡萄糖苷（4），其中化合物1和2為首次從該植物中分離得到。

1 材料

Mercury－500 MHz型以及Mercury－600 MHz核磁共振儀（Varian公司），LTQ XL線性離子阱質(zhì)譜儀（賽默飛世爾科技公司），1200型高效液相色譜儀（Agilent公司），柱色譜用大孔樹脂（日本三菱公司），C18反相填料（YMC gel ODS－A－HG 50μm），C18反相色譜柱（Zorbax SB－C18，9.4 mm×250 mm，Agilent公司），所用試劑為分析純，色譜試劑為色譜純。王不留行于2011年購于北京大學深圳醫(yī)院，由北京大學深圳醫(yī)院中藥房的胡虹教授鑒定為石竹科植物麥藍菜Vaccaria segetalis（Neck.）Garcke的干燥成熟種子。

2 提取分離

王不留行種子2 kg，用70%乙醇回流提取3次，除去乙醇，得到水混懸液，然后依次用石油醚、乙酸乙酯和正丁醇萃取，分別得到石油醚、乙酸乙酯和正丁醇3個部位。其中正丁醇部位25 g，將該部位溶解于水中，并經(jīng)大孔樹脂分離，水－乙醇梯度洗脫，得到3個流份F1、F2和F3。F1部分經(jīng)反相硅膠C18柱，水－甲醇梯度洗脫得到4個亞組分F1A～F1D。F1A再經(jīng)高效液相色譜C18柱色譜（20%甲醇／水）分離，得到化合物1（15 mg）和化合物2（10 mg）。F1B經(jīng)高效液相色譜C18柱色譜（30%甲醇／水）分離，得到化合物3（20 mg）。流份F2經(jīng)反相硅膠C18柱色譜，50%甲醇／水等度洗脫，得到化合物4（8 mg）。

3 化合物結構鑒定

3.1 化合物1 白色無定型粉末，ESI－MSm／z：266［M－H］－，1H－NMR（D2O，600 MHz）δ：8.30（1H，s，H－2），8.17（1H，s，H－8），6.04（1H，d，J＝6 Hz，H－1′），4.72（1H，dd，J＝5.4，6.0 Hz，H－2′），4.44（1H，dd，J＝4.8，4.8 Hz，H－3′），4.30（1H，dd，J＝6.0，6.0 Hz，H－4′），3.93（1H，dd，J＝3.0，12.6 Hz，H－5′a），3.85（1H，dd，J＝3.6，12.6 Hz，H－5′b）；13C－NMR（D2O，150 MHz）δ：158.5（C－6），155.4（C－2），151.3（C－4），143.5（C－8），122.0（C－5），91.2（C－1′），81.7（C－4′），76.5（C－3′），73.5（C－2′），64.4（C－5′）。以上數(shù)據(jù)與文獻［11，12］報道的化合物波譜數(shù)據(jù)基本一致，故確定該化合物結構為腺苷（Adenosine）。

3.2 化合物2 白色無定型粉末，ESI－MSm／z：134［M－H］－，1H－NMR（D2O，500 MHz）δ∶8.15（1H，s，H－2），8.19（1H，s，H－8）。比較化合物2和化合物1的氫譜數(shù)據(jù)，化合物2明顯比化合物1少了一個糖基的信號，并且與文獻［13］報道的化合物波譜數(shù)據(jù)相對照，故確定該化合物結構為腺嘌呤（Adenine）。

3.3 化合物3 白色無定型粉末，比旋度為＋86.5°，ESI－MS m／z：247［M＋H］＋，1H－NMR（DMSO－d6，500 MHz）δ：10.83（1H，s，N－H），7.59（1H，d，J＝7.0 Hz，H－4），7.32（1H，d，J＝8.0 Hz，H－7），7.15（1H，d，J＝2.0 Hz，H－2），7.05（1H，dd，J＝7.0，7.5 Hz，H－6），6.97（1H，dd，J＝7.5，8.0 Hz，H－5），3.66（1H，dd，J＝4.0，7.5 Hz，H－9），3.22（1H，dd，J＝14.0，7.5 Hz，H－8a），3.17（9H，s，3×CH3），3.16（1H，dd，J＝4.0，14.0 Hz，H－8b）；13C－NMR（DMSO－d6，125 MHz）δ：166.9（C－11），136.0（C－7a），127.1（C－3a），123.8（C－2），120.8（C－6），118.4（C－5），118.2（C－4），111.3（C－7），109.3（C－3），78.8（C－9），51.0（3 ×CH3），23.2（C－8）。以上數(shù)據(jù)與文獻［3］報道的波譜數(shù)據(jù)對照，鑒定該化合物為（＋）－（S）－N，N，N－三甲基色氨酸內(nèi)銨鹽［（＋）－（S）－N，N，N－trimethyl tryptophane betabine］。

3.4 化合物4 黃色粉末，ESI－MSm／z：565［M＋H］＋，1H－NMR（C5D5N，500 MHz）δ：7.80（2H，d，J＝9 Hz，H－2′，6′），6.79（2H，d，J＝9 Hz，H－3′，5′），6.42（1H，s，H－3），6.31（1H，s，H－6），4.73（1H，d，J＝7.5 Hz，H－1′′），4.20（1H，d，J＝7.0 Hz，H－1′′′），3.73（1H，dd，J＝1.5，15.5 Hz，H－5a′′′），3.12－3.65（9H，m，H－2′′～H－6′′，H－2′′′～H－5′′′），2.91（1H，dd，J＝1.5，15.5 Hz，H－5b′′′）；13C－NMR（C5D5N，125 MHz）δ：183.0（C－4），165.3（C－7），164.2（C－2），162.5（C－5，4′），157.7（C－9），128.9（C－2′，6′），122.0（C－1′），116.7（C－3′，5′），109.8（C－6），107.0（C－1′′′），104.8（C－10），103.8（C－3），94.4（C－8），83.0（C－5′′），82.1（C－2′′），80.5（C－3′′），74.4（C－4′′），73.4（C－3′′′），73.2（C－2′′′），71.9（C－1′′），68.8（C－4′′′），66.5（C－5′′′），62.9（C－6′′）。以上數(shù)據(jù)與文獻［7］報道的波譜數(shù)據(jù)對照，鑒定該化合物為洋芹素－6－C－阿拉伯糖－葡萄糖苷（apigenin－6－C－arabinosyl glucoside）。

［1］江蘇新醫(yī)學院.中藥大辭典［M］.上海：上海人民出版社，1986：311.

［2］李娜，馬長華，劉冬，等.炒王不留行的化學成分分析［J］.中國實驗方劑學雜志，2013，19（10）：73－75.

［3］孟賀，陳玉平，秦文杰，等.王不留行中王不留行黃酮苷的分離與鑒定［J］.中草藥，2011，42（5）：874－876.

［4］桑圣民，勞愛娜，王洪誠，等.中藥王不留行化學成分的研究（Ⅱ）［J］.中草藥，2000，31（3）：169－171.

［5］桑圣民，毛士龍，勞愛娜，等.中藥王不留行化學成分的研究Ⅲ［J］.天然產(chǎn)物研究與開發(fā)，2000，12（3）：12－15.

［6］魯靜，林一星，馬雙成.中藥王不留行中刺桐堿和異肥皂草苷分離鑒定和測定［J］.藥物分析雜志，1998，18（3）：163－165.

［7］桑圣民，夏增華，毛士龍，等.中藥王不留行中黃酮甙類化學成分的研究［J］.中國中藥雜志，2000，25（4）：221－222.

［8］Sang SM，Lao A，Wang HC，et al.A phenylpropanoid glycoside from Vaccaria segetalis［J］.Phytochemistry，1998，48（3）：569－571.

［9］Morita H，Yun YS，Takeya K，et al.A cyclic heptapeptide from Vaccaria segetalis［J］.Phytochemistry，1996，42（2）：439－441. ［10］Morita H，Yun YS，Takeya K，etal.Thionation of segetalins A and B，cyclic peptides with estrogen－like activity from seeds of Vaccaria segetalis［J］.Bio Med Chem，1997，5（3）：631－636.

［11］陳輝，柏健，方振峰，等.柔毛鴉膽子莖的化學成分及其腫瘤細胞毒活性研究［J］.中國中藥雜志，2013，38（14）：2321－2324.

［12］鄭曉珂，畢躍峰，馮衛(wèi)生，等.卷柏化學成分研究［J］.藥學學報，2004，39（4）：266－268.

［13］孫潔，張蕾，張曉攏，等.蒙古黃芪的化學成分研究［J］.現(xiàn)代藥物與臨床，2013，28（2）：138－143.

Studies on the chem ical constituents from the seeds of Vaccaria segetalis

HU Jin-ling1，HU Hong1，YANG Li2
（1.Peking University Shenzhen Hospital，Shenzhen 518036，China；2.Qingdao Huanghai Pharmaceutical Business Co.，Ltd.，Qingdao 266101，China）

ObjectiveTo study the chemical constituents of the seeds of Vaccaria segetalis.M ethodsChromatography and spectral analysiswere used to isolate the constituents and elucidate their structures.ResultsFour compoundswere isolated from the alcoholextractof the seeds of Vaccaria segetalis，and identified as adenosine（1），adenine（2），（＋）－（S）－N，N，N－trimethyl tryptophane betabine（3），apigenin－6－C－arabinosyl glucoside（4）.ConclusionCompound 1 and 2 were isolated from the seeds of this plant for the first time.

Vaccaria segetalis；Chemical constituents；Adenosine；adenine；Tryptophane betabine

R284

A

2095－5375（2014）02－0071－003

胡金陵，女，研究方向：新藥研發(fā)，E－mail：454744476＠qq.com