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    轉(zhuǎn)Bt基因水稻對東亞飛蝗抗寒性的影響

    2014-03-02 06:26:09*
    作物研究 2014年3期
    關(guān)鍵詞:飛蝗棉蚜抗寒性

    *

    (1湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)植物保護學(xué)院,長沙410128;2全國農(nóng)業(yè)技術(shù)推廣服務(wù)中心,北京100125)

    轉(zhuǎn)Bt基因水稻對東亞飛蝗抗寒性的影響

    許釋文1,肖鐵光1*,朱景全2

    (1湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)植物保護學(xué)院,長沙410128;2全國農(nóng)業(yè)技術(shù)推廣服務(wù)中心,北京100125)

    為了探究轉(zhuǎn)Bt基因水稻對東亞飛蝗抗寒性的影響,在室內(nèi)條件下以轉(zhuǎn)Bt基因水稻和非轉(zhuǎn)基因水稻分別喂養(yǎng)東亞飛蝗3代,用過冷卻點儀測定東亞飛蝗的過冷卻點和冰點。結(jié)果表明,轉(zhuǎn)Bt基因水稻飼養(yǎng)的東亞飛蝗的4齡、5齡幼蟲、成蟲(雌和雄)的過冷卻點分別為-5.89、-7.59、-6.64和-6.79,與對照組無顯著差異。

    轉(zhuǎn)Bt基因水稻;東亞飛蝗;抗寒性

    東亞飛蝗[Locusta migratoria manilensis(Meyen)]屬直翅目,蝗總科,是我國農(nóng)牧業(yè)的主要害蟲之一。在我國境內(nèi)主要分布在北緯42°以南偏東部的季風(fēng)平原地區(qū),東部沿海各省以及臺灣等地,南部海南、云南、廣西、廣東,西部四川、甘肅南部,北部河北、山西、陜西均是常發(fā)地區(qū)[1]。水稻本身沒有抗蟲性的基因,利用現(xiàn)代生物技術(shù)將蘇云金桿菌(Bacillus thuringiensis,Bt)殺蟲蛋白基因?qū)胨局?,Bt殺蟲蛋白與靶標昆蟲中腸上皮細胞的受體特異結(jié)合,使水稻對某些靶標昆蟲具有了抗性。自轉(zhuǎn)基因水稻出現(xiàn)以來,很多研究者對其安全性進行了研究,其對非靶標害蟲的安全性評價也是轉(zhuǎn)基因水稻安全性研究的一部分。過冷卻點的原理是在0℃以下,動物體液忍受不結(jié)冰的臨界溫度,是昆蟲為避免因體液結(jié)冰而造成死亡所做出的適應(yīng)性調(diào)節(jié),用此來衡量昆蟲的抗寒性強弱。筆者通過用轉(zhuǎn)Bt基因水稻和非轉(zhuǎn)基因水稻飼養(yǎng)東亞飛蝗進行對比實驗,旨在研究轉(zhuǎn)Bt基因水稻對東亞飛蝗這種非靶標害蟲抗寒能力的影響。

    1 材料與方法

    1.1 供試蟲源

    東亞飛蝗購自云南紅河,以卵開始在室內(nèi)進行飼養(yǎng)。室內(nèi)溫度為26±1℃,濕度40%~60%,光照LD:14:10。飼養(yǎng)3代后開始試驗。

    1.2 供試水稻

    在湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)內(nèi),種植華恢1號和明恢63水稻來飼養(yǎng)東亞飛蝗。明恢63是華恢1號的非轉(zhuǎn)基因親本品種,在此實驗中用作對照。水稻種子均來自中國農(nóng)科院。

    1.3 抗寒性測定

    讓熱敏電阻測溫探頭與東亞飛蝗腹部充分接觸,用棉花包裹探頭與蟲體腹部相連的部分,并用透明膠布將其固定至蟲體緊貼探頭不會松動。然后置于低溫冰箱中?;认x是變溫動物,隨著冰箱內(nèi)溫度下降,蝗蟲的體溫產(chǎn)生變化,導(dǎo)致探頭電阻值也產(chǎn)生變化,從而得到一個變化的電壓降。過冷卻點測定儀會采集這些數(shù)據(jù)并輸入電腦,電腦進行自動記錄。當(dāng)溫度降至蝗蟲死亡,蟲體凍結(jié)的瞬間會釋放出凝結(jié)熱,蟲體表面溫度升高,同樣會傳輸入電腦,這樣在繪制溫度曲線圖時,會出現(xiàn)一個凹形的峰,此峰有一個最低值,該值即為蝗蟲的過冷卻點。當(dāng)回升到一定溫度后再次呈現(xiàn)出下降趨勢時,回升出現(xiàn)的最高點即為體液結(jié)冰點。每次實驗20只飛蝗,重復(fù)3次。

    1.4 數(shù)據(jù)分析

    統(tǒng)計與分析數(shù)據(jù)在SPSS18.0和Excel2013中進行。

    2 結(jié)果與分析

    東亞飛蝗主要依靠卵越冬,過冷卻點的高低決定著東亞飛蝗的抗寒能力。由表1、表2可知,取食轉(zhuǎn)Bt基因水稻和非轉(zhuǎn)基因水稻東亞飛蝗的過冷卻點、冰點,沒有顯著差異(p>0.05);5齡東亞飛蝗的過冷卻點、冰點比4齡與成蟲的都要低,說明5齡蝗蟲的抗寒能力最強;雌成蟲的過冷卻點、冰點高于雄成蟲,故其抗寒能力比雄成蟲弱。

    表1 取食不同水稻的各齡期東亞飛蝗過冷卻點平均值

    表2 取食不同水稻的各齡期東亞飛蝗冰點平均值

    3 結(jié)論與討論

    研究表明,轉(zhuǎn)Bt基因水稻對東亞飛蝗4齡、5齡幼蟲、成蟲的抗寒性均沒有顯著差異。這與李海強、張炬紅[1,2]等的實驗結(jié)果相似。轉(zhuǎn)Bt水稻的安全性在于取食轉(zhuǎn)Bt基因水稻后,東亞飛蝗的生長發(fā)育、生命參數(shù)表、生殖代謝以及體內(nèi)酶活性的影響。宋玲莉[3]等的實驗證明,絕大多數(shù)的轉(zhuǎn)Bt基因菌株對東亞飛蝗無毒性,Bt對東亞飛蝗的活性較低。究其原因可能與東亞飛蝗體內(nèi)中腸特性有關(guān)系。

    影響昆蟲抗寒性有很多因素:(1)昆蟲體內(nèi)脂肪、蛋白質(zhì)、糖原的含量。王思忠等對西藏飛蝗抗寒性研究后指出,昆蟲抗寒性與其體內(nèi)水分、脂肪含量等生理生化指標有關(guān)。薛麗指出,轉(zhuǎn)Bt基因棉上的棉蚜體內(nèi)這三者的含量與親本對照物有顯著差異[4]。(2)冷傷害也是影響昆蟲抗寒性的因素之一,當(dāng)冷傷害積累到一定程度,脂肪、蛋白質(zhì)與糖原等生理生化指標對昆蟲抗寒性的影響降低,取而代之的是冷傷害對其存活的影響[5]。(3)Bt毒蛋白對昆蟲起作用的部位在中腸。中腸也是昆蟲消化食物的場所,存在很多消化酶,如果膠酶、淀粉酶等等。張炬紅等的實驗證實,從短期或長期來看,轉(zhuǎn)Bt基因棉上的棉蚜消化酶活力與對照相比無顯著差異[2]。

    轉(zhuǎn)基因作物的安全性受到越來越多的關(guān)注,其研究也有不同的結(jié)果。本實驗研究表明,華恢1號對東亞飛蝗的4、5齡幼蟲、成蟲的抗寒性沒有影響。

    本次實驗的轉(zhuǎn)基因水稻品種使用Cry1Ab/Ac為cryΙ群基因編碼,cryΙ對鱗翅目昆蟲有特異性,因此華恢1號的目標昆蟲是鱗翅目昆蟲。Cry基因可劃分為4群,除去cryΙ外,cryⅡ?qū)[翅目和雙翅目昆蟲有特異性,cryⅢ對鞘翅目昆蟲有特異性,cryⅣ對雙翅目昆蟲有特異性。Cry基因的特異性不同,引起作用的靶標昆蟲也不同。本實驗僅研究了CryΙ基因?qū)Ψ前袠死ハx東亞飛蝗抗寒性的影響,研究其他cry基因群對非靶標昆蟲東亞飛蝗抗寒性的影響也十分必要,可以完善轉(zhuǎn)基因水稻對非靶標害蟲的安全性評價。

    個體生長發(fā)育和繁殖能力的影響[J].新疆農(nóng)業(yè)科學(xué),2011,48(2):287-290.

    [2] 張炬紅,郭建英,萬方浩,等.轉(zhuǎn)Bt基因抗蟲棉對棉蚜消化酶的風(fēng)險評價[J].華北農(nóng)學(xué)報,2008,23(增刊):238-242.

    [3] 宋玲莉,高梅影,戴順英.蘇云金芽孢桿菌抗東亞飛蝗的活性[J].應(yīng)用與環(huán)境生物學(xué)報,2005,11(5):592 -594.

    [4] 薛 麗,肖 達,盧 延,等.轉(zhuǎn)基因棉對棉蚜生長發(fā)育及其主要代謝物質(zhì)含量的影響[J].華北農(nóng)學(xué)報,2011,26(4):115-120.

    [5] 趙 靜,崔寧寧,張 帆,等.異色瓢蟲成蟲體型及體內(nèi)脂肪含量對其耐寒能力的影響[J].昆蟲學(xué)報,2010,53(11):1213-1219.

    [1] 李海強,王冬梅,徐 瑤,等.轉(zhuǎn)Bt基因抗蟲棉對棉蚜

    Effects of Bt-transgenic Rice on Cold Resistance of Oriental Migratory Locust

    XU Shi-wen1,XIAO Tie-guang1*,ZHU Jing-quan2

    (1 College of Plant Protection,Hunan Agricultural University,Changsha,Hunan 410128,China;
    2 National Agro-Technical Extension and Service Center,Beijing 100125,China)

    To investigate the effect of Bt-transgenic rice on cold resistance ofOrientalmigratory locust,supercooling point and freezing pointofOrientalmigratory locustwere determined with supercooling pointmeterafter feeding on Bt-transgenic rice and non-transgenic rice respectively for three generations in the laboratory conditions.The results showed that the supercooling point of forth instar larvae,fifth instar larvae,female and male adults were-5.89,-7.59,-6.64 and-6.79,respectively,and there were not significant difference with that of control.

    Bt-transgenic rice;Orientalmigratory locust;Cold resistance

    S435.112+.4

    A

    1001-5280(2014)03-0297-02 DOI:10.3969/j.issn.1001-5280.2014.03.18

    2013 03 07

    許釋文(1989-),女,湖南常德人,碩士研究生。*通信作者:肖鐵光,教授,Email:tieguang@21cn.com。

    國家科技攻關(guān)項目(2011BAD16B01);湖南省科技攻關(guān)項目(62020908011)。

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