川產(chǎn)貝母新資源瓦布貝母研究進(jìn)展

毛艷蘋，趙高瓊，蘇玉萍，龐亞，童婷婷，鄧赟

·綜述進(jìn)展·

川產(chǎn)貝母新資源瓦布貝母研究進(jìn)展

毛艷蘋1，趙高瓊1，蘇玉萍2，龐亞1，童婷婷1，鄧赟1

查閱文獻(xiàn)，對瓦布貝母的分類等級研究、化學(xué)成分研究及藥理研究進(jìn)行綜述，為瓦布貝母的深入系統(tǒng)研究提供參考。

瓦布貝母；分類等級；化學(xué)成分；藥理研究

瓦布貝母習(xí)稱“栽培品”，為百合科植物瓦布貝母Fritillaria unibracteata Hsiao et K.C.Hsia var. wabuensis(S. Y.Tang et S.C. Yue) Z.D. Liu,S. Wang et S.C.chen的干燥鱗莖部分，為2010年版《中國藥典》川貝母項(xiàng)下新收載的資源品種。瓦布貝母主要分布于四川岷江上游山區(qū)[1]的茂縣、北川、松潘、黑水縣境內(nèi)，主要生長在海拔2500-3000m的灌木林、小喬木林下[2]。

瓦布貝母當(dāng)做川貝母使用，最早記載于《本草綱目拾遺》，言之“大如錢，皮細(xì)白而帶黃斑，味甘、出龍安，乃川貝中第一，不可多得”。瓦布貝母一直為當(dāng)?shù)剜l(xiāng)醫(yī)所器重，認(rèn)為其清熱潤肺、化痰止咳的功效比暗紫貝母（F. unibracteata Hsiao et K.C.Hsia）好，但由于開發(fā)早，野生資源不多，野生瓦布貝母處于瀕危狀態(tài)[3]。自唐心曜、岳松健等人首次對瓦布貝母進(jìn)行報(bào)道以來，關(guān)于瓦布貝母的研究就一直見諸報(bào)道，以下就對瓦布貝母的分類等級研究、化學(xué)成分研究及藥理研究等內(nèi)容進(jìn)行綜述，以便充分有效的開發(fā)和利用這一新的川貝資源。

1 分類等級

1983年，唐心曜、岳松健等[2]人經(jīng)過野外調(diào)查，首次對瓦布貝母這一新的野生川貝母品種進(jìn)行報(bào)道，通過對瓦布貝母的植株形態(tài)進(jìn)行描述，認(rèn)為瓦布貝母是一個獨(dú)立的實(shí)體，應(yīng)該作為川貝的一個新種。1996年，羅毅波等按照植物形態(tài)分類學(xué)將瓦布貝母歸類為粗莖貝母，認(rèn)為二者在地理分布上相似，同屬生長于灌木林中的植株高大型，因此將二者歸為同種貝母[4]。但在2009年，劉震東、王曙等對瓦布貝母和粗莖貝母進(jìn)行了比較，認(rèn)為瓦布貝母和暗紫貝母的親緣關(guān)系更近，故將瓦布貝母作為暗紫貝母的一個變種[5]，并將其收載入2010年版《中國藥典》川貝母項(xiàng)下。

由于貝母的植物形態(tài)變化是連續(xù)的，植物形態(tài)變化較大，單純從植株形態(tài)上來對貝母品種進(jìn)行分類，容易造成同一標(biāo)本意見不一或同一標(biāo)本多次易名的情況。隨著現(xiàn)代科學(xué)技術(shù)如細(xì)胞分類學(xué)、DNA分子生物學(xué)的不斷發(fā)展，輔助川產(chǎn)貝母復(fù)合群分類的手段越來越多，使得川產(chǎn)貝母的品種分類等級變得更合理更完善。

關(guān)于瓦布貝母的細(xì)胞學(xué)研究，早在1994年王淑芬[6]就首次對瓦布貝母的染色體參數(shù)（染色體絕對長度、相對長度、臂長、類型和相對長度系數(shù)）、核型及核型公式進(jìn)行了報(bào)道。黎開強(qiáng)[7]對包括瓦布貝母在內(nèi)的20種川產(chǎn)貝母屬的植物進(jìn)行遺傳性研究，采用核糖體DNA轉(zhuǎn)錄間隔區(qū)序列分析法分析，發(fā)現(xiàn)瓦布貝母與暗紫貝母的遺傳分化距離為0.0095，表明瓦布貝母與暗紫貝母的親緣關(guān)系很近，證實(shí)了瓦布貝母為暗紫貝母的變種的可能性。李慶[8]等采用隨機(jī)多樣性DNA擴(kuò)增技術(shù)，對川產(chǎn)貝母復(fù)合群之間的分子生物學(xué)親緣關(guān)系進(jìn)行研究，發(fā)現(xiàn)瓦布貝母與暗紫貝母和川貝母的親緣關(guān)系很近，但瓦布貝母也存在一定的特殊性；同時還發(fā)現(xiàn)，野生瓦布貝母與栽培瓦布貝母親緣關(guān)系非常近，栽培瓦布貝母在人工栽培過程中基本無變異，說明瓦布貝母遺傳特征比較穩(wěn)定，適合人工栽培。

2 化學(xué)成分研究

由于資源或品種鑒定方面的問題，目前對瓦布貝母進(jìn)行化學(xué)成分研究的學(xué)者極少。杜建紅、王艷麗[9]等人對瓦布貝母的野生松貝、家種松貝及家種青貝進(jìn)行薄層層析比較，發(fā)現(xiàn)三者的色譜均可檢出5-7個生物堿斑點(diǎn)，且斑點(diǎn)大小基本相同，但各斑點(diǎn)的清晰度不相同，說明瓦布貝母中含有至少7種以上生物堿，且各生物堿極性差異不大，但含量相差較多。劉震東、程世瓊[10]等用聚酰胺薄膜色譜鑒別栽培的瓦布貝母，能夠鑒別出瓦布貝母中含有非生物堿成分，且還能用該方法來鑒別栽培的瓦布貝母。王聰、王曙[11]等人采用HPLC-ELSD比較不同植物來源的川貝母，發(fā)現(xiàn)野生瓦布貝母與栽培瓦布貝母成分指紋十分相似，并且瓦布貝母與暗紫貝母有共同的指紋特征峰。

瓦布貝母中的化學(xué)成分主要為生物堿類和非生物堿類，根據(jù)現(xiàn)代藥理研究表明具有藥理活性的化學(xué)成分主要為生物堿類化合物。從瓦布貝母總堿TLC結(jié)果初步推測，瓦布貝母中至少含有7種以上的生物堿，但目前從瓦布貝母中分離得到并且化學(xué)結(jié)構(gòu)已知的生物堿成分主要有：西貝堿、貝母辛、鄂貝乙素、異浙貝甲素、西貝素-β-氮氧化物、異浙貝甲素氮氧化物[12～16]等。

為了科學(xué)評價瓦布貝母的生藥品質(zhì)，需要對生物堿含量進(jìn)行測定。杜建紅[9]等人分別采用酸堿滴定法和雙波長薄層掃描法測定瓦布貝母的野生松貝、栽培松貝和栽培青貝中的總生物堿含量和西貝堿含量，結(jié)果發(fā)現(xiàn)總生物堿和西貝堿含量栽培品高于野生品，表明瓦布貝母的栽培品品質(zhì)優(yōu)于野生品。劉震東、王曙[17]等人采用HPLC-ELSD檢測不同生長年限的栽培瓦布貝母中的西貝堿含量，發(fā)現(xiàn)3、4、5年生的瓦布貝母中的西貝堿含量均較高，證實(shí)了傳統(tǒng)對川貝母采收年限為3年及3年以上的合理性。劉晶，王曙[18]等人利用HPLC-ELSD測定栽培的瓦布貝母中貝母辛的含量，發(fā)現(xiàn)瓦布貝母中貝母辛的含量高于曾報(bào)道過的川貝母的其他基源植物的含量。高秀榮[19]采用酸性染料比色法測定栽培瓦布貝母中的總生物堿含量，并對方法進(jìn)行方法學(xué)考察，測得瓦布貝母中的總生物堿平均含量為0.208%。張培培[20]等以貝母甲素為對照品，采用用酸性染料比色法對瓦布貝母野生品、栽培品進(jìn)行對比，結(jié)果發(fā)現(xiàn)瓦布貝母栽培品中的總生物堿含量高于野生品中總生物堿含量。

根據(jù)有關(guān)瓦布貝母的化學(xué)成分的研究報(bào)道，瓦布貝母中含有同暗紫貝母（暗紫貝母被廣泛認(rèn)為是川產(chǎn)貝母的優(yōu)質(zhì)品種）相似的化學(xué)成分，并且栽培瓦布貝母中的總生物堿含量高于野生瓦布貝母和暗紫貝母中的含量，并且栽培瓦布貝母中的總生物堿含量隨著生長年限的增長而增加，因此建議栽培瓦布貝母的采收年限應(yīng)以5年生的為主[21]。

3 藥理研究

瓦布貝母收載入2010年版《中國藥典》，目前對瓦布貝母藥理活性報(bào)道的文獻(xiàn)較少，但根據(jù)現(xiàn)有的文獻(xiàn)報(bào)道，也不難看出瓦布貝母顯著的藥理活性。莫正紀(jì)[22]等人最早對瓦布貝母的藥理作用進(jìn)行研究，發(fā)現(xiàn)瓦布貝母在小鼠鎮(zhèn)咳、大鼠祛痰、小鼠常壓耐缺氧、小鼠離體肺臟支氣管灌流、小鼠口服急毒方面具有同暗紫貝母相同的藥理活性，在升高小鼠肺臟cAMP水平及豚鼠平喘作用方面，瓦布貝母的作用強(qiáng)于暗紫貝母。顏曉燕[23]等人對瓦布貝母提取物對過敏性哮喘豚鼠的呼吸動力學(xué)進(jìn)行研究，發(fā)現(xiàn)瓦布貝母可以緩解由反復(fù)性接觸過敏原導(dǎo)致的過敏性哮喘，可以起到平喘作用。顏曉燕等[24]又研究對比了暗紫貝母、瓦布貝母和浙貝母三者的鎮(zhèn)咳、祛痰、平喘作用，發(fā)現(xiàn)瓦布貝母和暗紫貝母均有較強(qiáng)的祛痰、平喘、鎮(zhèn)咳作用，但二者之間無顯著性差異，表明二者在發(fā)揮鎮(zhèn)咳、祛痰、平喘作用時療效相當(dāng)。

川產(chǎn)貝母產(chǎn)區(qū)寬，植物來源種類多，但隨著各種中藥制品的開發(fā)和使用以及中醫(yī)藥發(fā)展規(guī)范化要求、制藥、配方原料法規(guī)化管理，野生川貝母的需求量逐年增大，而川貝母生境的惡化以及人為的大力采挖，使得川貝母的供求矛盾加劇，川貝母的資源受到嚴(yán)重破壞。因此，瓦布貝母的引種栽培成功，不僅緩解了川貝母供求緊張的矛盾，還對促進(jìn)川貝母野生資源的保護(hù)提供了保證。而對瓦布貝母各方面的研究，不僅對臨床合理用藥提供了保證，也為更科學(xué)的使用這一新的川貝母資源提供了科學(xué)依據(jù)。但是，對瓦布貝母的繼續(xù)研究，還有許多亟待深入的工作需要展開，如瓦布貝母中非生物堿類化合物的研究、單一生物堿的藥理研究、有效成分的提取純化工藝研究等。因此，對瓦布貝母進(jìn)行充分深入的研究，制定規(guī)范化的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，對于瓦布貝母的質(zhì)量控制和合理利用這一新資源有重要意義。

[1] 《四川植物志》編輯委員會.四川植物志[M].四川民族出版社,1991,第七卷,第一版:67.

[2] 唐心曜,岳松健.貝母屬植物三新種[J].四川醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào),1983,14(4):327.

[3] 黎躍成,勞家華,伍丕娥.道地藥和地方標(biāo)準(zhǔn)藥原色圖譜[M].成都:四川科學(xué)技術(shù)出版社,2002:43.

[4] 羅毅波,陳心啟.中國橫斷山區(qū)及其鄰近地區(qū)貝母屬植物研究(二)[J].植物分類學(xué)報(bào),1996,34(5):547.

[5] 劉震東,王曙,陳心啟.關(guān)于瓦布貝母的分類等級研究[J].云南植物研究,2009,31(2):145.

[6] 王淑芬,宋天瑛.貝母屬4種核型的報(bào)道[J].四川師范大學(xué)學(xué)報(bào),1994,17(6):93.

[7] 黎開強(qiáng).川產(chǎn)貝母屬植物遺傳多樣性及溫光對川貝母生長的影響[D].四川農(nóng)業(yè)大學(xué),2009,05.

[8] 李慶,陳新,王曙.川貝母復(fù)合群之間的分子生物學(xué)親緣關(guān)系的探討[J].華西藥學(xué)雜志,2010,25(2):140.

[9] 杜建紅,王艷麗,姜玉,等.瓦布貝母的生物堿成分分析[J].解放軍藥學(xué)學(xué)報(bào),2002,18(1):30.

[10] 劉震東,程世瓊,王曙.用聚酰胺薄膜色譜鑒別栽培的川貝母[J].華西藥學(xué)雜志,2006,21(1):066.

[11] 王聰,王曙,馬靜.川貝母的HPLC指紋圖譜研究[J]. 華西藥學(xué)雜志,2010,25(1): 061.

[12] 張安將,王化遠(yuǎn),唐心濯.瓦布貝母中一生物堿的2DNMR研究[J].華西藥學(xué)雜志,1995,10(2):69.

[13] 王化遠(yuǎn),張安將,唐心曜,等.瓦布貝母生物堿的分離與鑒定[J].華西醫(yī)大學(xué)報(bào),1996,27(1):100.

[14] 蘇甫,王化遠(yuǎn). 瓦布貝母中一瓦布堿的2DNMR研究[J].波譜學(xué)雜志,1999,16(4):353.

[15] 陳茜,祝麗華,徐云峰,等.異浙貝甲素氮氧化物的分離和結(jié)構(gòu)鑒定[J].藥學(xué)學(xué)報(bào),2004,39(5):348.

[16] 陳茜.瓦布貝母生物堿的研究[D].四川大學(xué),2005.

[17] 劉震東,王曙.HPLC-ELSD測定栽培的瓦布貝母中西貝堿[J].華西藥學(xué)雜志,2005,20(3):257.

[18] 劉晶,王曙,辛貴忠,等.HPLC-ELSD測定太白貝母和瓦布貝母中貝母辛的含量[J].中國藥學(xué)雜志,2010,45(13):1032.

[19] 高秀榮,余江平.分光光度法測定川貝母生物堿含量研究[J].山西醫(yī)藥雜志,2009,38(7):644.

[20] 張培培,周勤梅,秦波,等.川貝母栽培品瓦布貝母與松貝母的總生物堿對比研究[J].成都中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào),2011,34(1):70.

[21] 張大永,王曙,李慶,等.栽培川貝母采收年限的研究[J].華西藥學(xué)雜志,2010,25(6):725.

[22] 莫正紀(jì),唐心曜,孫中,等.引種栽培瓦布貝母、濃蜜貝母與野生松貝母的藥理作用比較研究[J].中國中藥雜志,1998,23(1):14.

[23] 顏曉燕,孟現(xiàn)民,陳淑杰,等.三種川貝母對哮喘豚鼠呼吸動力學(xué)影響的研究[C].2008年成渝藥學(xué)學(xué)術(shù)年會:270.

[24] 顏曉燕,童志遠(yuǎn),晏子俊,等.暗紫貝母、瓦布貝母、浙貝母藥效學(xué)比較[J].中國實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志,2012,18(10):244.

（責(zé)任編輯：蔣淼）

Research advances of Wabubeimu the new resource of Beimu produced in Sichuan

MAO Yan-ping1, ZHAO Gao-qiong1, SU Yu-ping2, PANG Ya1,TONG Ting-ting1, DENG Yun1//(1. Pharmacy College, Chengdu University of Traditional Chinese Medicine; The Ministry of Education Key Laboratory of Standardization of Chinese Herbal Medicine; State Key Laboratory Breeding Base of Systematic Research, Development and Utilization of Chinese Medicine Resources Co-founded by Sichuan Province and MOST, Chengdu 611137, China;2.Pharmacy College of Heilongjiang University of Traditional Chinese Medicine, Haerbin 150040, China)

The paper reviews the classifcation level, chemical compounds and pharmacological effects and so on by the accessing literature of Wabubeimu to provide the reference for further study.

Wabubeimu; classifcation level; chemical compounds; pharmacological effects

R 282

A

1674-926X(2014)03-018-03

1.成都中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院 中藥材標(biāo)準(zhǔn)化教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室 中藥資源系統(tǒng)研究與開發(fā)利用省部共建國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室培育基地，四川 成都611137；2.黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院，黑龍江 哈爾濱 150040

毛艷蘋(1988-)，男，在讀碩士，主要從事中藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)化與藥效物質(zhì)基礎(chǔ)研究Tel：13550195294 Email：maoyanpingchengdu@126.com

鄧赟（1975-），男，博士后，研究員，碩士生導(dǎo)師 Email:dengyun2000@sohu.com

2013-03-10