艾納香揮發(fā)油和左旋龍腦在不同葉型及不同部位的分布

夏稷子， 陳 貴， 安 軍， 趙 智

(貴州省黔南州食品藥品檢驗所，貴州 都勻558000)

艾納香為菊科艾納香屬植物艾納香Blumea balsamifera (L.)DC. 的新鮮或干燥地上部分［1］，是貴州省十大苗藥之一［2］，其新鮮葉經(jīng)提取加工制成的結晶艾片是《中國藥典》2010 年版一部收載的品種。艾納香的主要成分為揮發(fā)油，而揮發(fā)油的主要成分則是左旋龍腦［3-5］。目前艾納香資源的利用仍然處于依靠傳統(tǒng)經(jīng)驗的狀態(tài)，對不同葉型不同部位藥材，缺乏更為深入的系統(tǒng)研究［6］。艾納香按其葉型大小可分為大葉艾、小葉艾和馬耳艾，但尚未見有對艾納香3 種葉型及不同部位葉中左旋龍腦和揮發(fā)油量的比較檢測報道［7］，因此本研究結果將為艾納香藥材的質量控制與資源合理利用，提供新的依據(jù)。

1 實驗材料

1.1 儀器與試藥 島津-2014 氣相色譜儀(日本島津公司);島津氣相色譜工作站，AL204 型電子天平(Mettler Toledo);SK5200HP 型超聲波清洗儀(KUDOS);H-1650 型高速離心機(長沙湘儀離心機有限公司)。左旋龍腦對照品(中國食品藥品檢定研究院，批號110881-200706)，水楊酸甲酯(分析純)，乙酸乙酯(分析純)。

1.2 供試樣品 艾納香樣品采集自貴州省羅甸縣，經(jīng)貴陽中醫(yī)學院何順志教授鑒定，為菊科艾納香屬植物艾納香Blumea balsamifera (L)DC 的新鮮或干燥地上部分。樣品采集時間均為2013 年12 月上旬，受試樣品為陰干的葉。

2 方法與結果

2.1 左旋龍腦測定［8-9］

2.1.1 GC 色譜條件 PEG20M (10%)色譜填充柱(2 m×3 mm×2 mm);載氣為氮氣;燃氣為氫氣;FID 檢測器;柱溫150 ℃;檢測器溫度200 ℃。

2.1.2 對照品溶液制備 精密稱取左旋龍腦對照品適量，加內(nèi)標溶液(水楊酸甲酯2.5 mg/mL)制成每1 mL 含0.4 mg 的對照品溶液。

2.1.3 供試品溶液的制備 稱取艾納香樣品2 g置錐形瓶中，加入內(nèi)標溶液 (水楊酸甲酯2.5 mg/mL)10 mL，稱定質量，超聲提取30 min，放冷，用乙酸乙酯補足減失的質量，離心取上清液作為供試品溶液。取對照品溶液與供試品溶液各1 μL，注入氣相色譜儀測定。采用內(nèi)標法，計算樣品中左旋龍腦含有量。艾納香不同葉型和不同部位樣品的測定結果見表1、表2，提示艾納香不同葉型間左旋龍腦的量沒有顯著性差異，而艾納香不同部位間中上部位葉左旋龍腦的量明顯高于下部葉。

表1 艾納香不同葉型中左旋龍腦量Tab.1 Einar centre-left spin borneol contents in different leaf shapes

表2 艾納香不同部位葉左旋龍腦量Tab.2 Einar sinistral borneol contents at different positions of the fragrance

2.2 揮發(fā)油測定［10］取艾納香樣品適量，稱定質量，照《中國藥典》2010 年版一部附錄X D 揮發(fā)油測定法項下測定［11］，艾納香不同葉型和不同部位葉樣品的揮發(fā)油測定結果見表3、表4，提示艾納香不同葉型間揮發(fā)油含有量沒有顯著性差異，而艾納香不同部位間中上部位葉揮發(fā)油含有量明顯高于下部葉。

表3 艾納香不同葉型揮發(fā)油含有量Tab.3 Einar incense volatile oil contents in different leaf shapes

表4 艾納香不同部位葉揮發(fā)油含有量Tab.4 Einar incense volatile oil contents at different positions of the fragrance

3 討論

3.1 本研究結果顯示，艾納香不同葉型中左旋龍腦含有量由高到低依次為馬耳艾、大葉艾、小葉艾。同一產(chǎn)地不同葉型艾納香中左旋龍腦含有量間的差值分別為0.1 ～0.6 mg/g，不同產(chǎn)地同一葉型艾納香，馬耳艾中左旋龍腦含有量最高與最低之間的差值為1.7 ～0.04 mg/g。大葉艾中左旋龍腦含有量最高與最低之間的差值為1.5 ～0.01 mg/g，小葉艾中左旋龍腦含有量最高與最低之間的差值為1.5 ～0.01 mg/g，說明同一葉型艾納香中左旋龍腦含有量差異較大，但3 種葉型間左旋龍腦量在統(tǒng)計學上并無顯著性差異。此外發(fā)現(xiàn)，馬耳艾與小葉艾揮發(fā)油含有量接近，而大葉艾揮發(fā)油含有量與前二者略有差異，但幾者之間在統(tǒng)計學上也無顯著性差異。這些結果是否與本實驗所采集的樣本數(shù)量較少有關，還需進一步實驗加以證明。值得特別指出的是，艾納香不同部位葉左旋龍腦和揮發(fā)油含有量均為中上部位葉高于下部葉。同一樣本莖不同部位葉左旋龍腦含有量最高與最低的差值為1.8 ～0.3 mg/g，揮發(fā)油含有量最高與最低的差值為

2.2 ～0.5 mL/100 g，表明不同產(chǎn)地上下不同部位莖葉艾納香中，揮發(fā)油和左旋龍腦的含有量都具有顯著性差異，即中上部位葉中揮發(fā)油和左旋龍腦的量均高于同一標本莖下部位葉。

3.2 艾納香含有的揮發(fā)油主要成分為左旋龍腦，并含少量桉油精、左旋樟腦、倍半萜及黃酮、香豆精、三萜化合物等［12-13］。本實驗結果印證了艾納香揮發(fā)油量與左旋龍腦量間存在的正相關性，即揮發(fā)油含有量高的樣本其左旋龍腦的含有量相對較高，揮發(fā)油含有量低的樣本其左旋龍腦的含有量也相對較低。實驗結果還顯示，艾納香樣品間左旋龍腦成分在揮發(fā)油中所占比例明顯不同，即不同產(chǎn)地、相同葉型、相同部位或相同產(chǎn)地、不同葉型、不同部位艾納香中，左旋龍腦含有量差異較大，這可能是因為生長環(huán)境如海拔、光照時間、營養(yǎng)、葉片大小、土壤、水分等不同而致?lián)]發(fā)油各成分比例不同［14-15］。因此認為，在對艾納香質量進行評價時，應綜合考慮揮發(fā)油和左旋龍腦的含有量狀況。

3.3 本研究結果表明，莖葉部位不同是造成艾納香揮發(fā)油和左旋龍腦的含有量有顯著性差異的主要原因之一，雖然不同葉型艾納香葉的揮發(fā)油和左旋龍腦的量也具有差異，但差異并不十分顯著。以往研究中也曾發(fā)現(xiàn)，氣候地理環(huán)境的不同是造成艾納香中左旋龍腦含有量差異的原因之一［8］。因此，種植地理環(huán)境的選擇就顯得尤為重要，應首選馬耳艾葉型和中上部位葉等揮發(fā)油量和左旋龍腦量都高表達的產(chǎn)株和產(chǎn)地。由于馬耳艾葉片小產(chǎn)量低，種植和加工部門大多采用大葉艾這一高產(chǎn)量的葉型。但我們認為在選苗研究中，也應考慮對馬耳艾葉型和中上部位葉等高表達產(chǎn)株進行基因改造，以增大增多相應葉型和部位的葉片，提高艾納香藥材有效成分的產(chǎn)量。本實驗對艾納香不同葉型、不同部位葉中揮發(fā)油和左旋龍腦測定，將有利于篩選出揮發(fā)油和左旋龍腦的量都高的藥材葉型及部位，為艾納香GAP 種植基地篩選優(yōu)良種源提供科學指導。

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