秋水仙堿處理粗肋草叢生芽對其生長和誘變效應(yīng)的影響

摘 要：以粗肋草去頂叢生芽為誘導(dǎo)材料，采用秋水仙堿處理方法進行了粗肋草多倍體誘變。結(jié)果發(fā)現(xiàn)：不同處理方式、秋水仙堿濃度和處理時間，粗肋草誘變率不同。采用浸泡法誘變率比混培法誘變率高，在一定范圍內(nèi)隨著秋水仙堿濃度和處理時間的增加，粗肋草誘變率升高。用0.15%秋水仙堿濃度的液體培養(yǎng)基浸泡處理2d，誘變率最高，達到16.2%。變異植株明顯矮化、變粗、葉片變厚、顏色變深，能耐10℃低溫不受凍害。

關(guān)鍵詞：粗肋草；叢生芽；秋水仙堿；誘變

中圖分類號 S68 文獻標識碼 A 文章編號 1007-7731（2013）24-20-02

粗肋草（Aglaonema spp），又名亮絲草、廣東萬年青，為天南星科（Araceae）粗肋草屬（Aglaonema Schott）多年生常綠草本植物[1]。粗肋草在國際上是極負盛名的室內(nèi)觀葉植物，其具有株型豐富、葉型繁多、高度耐陰、長勢強壯、病蟲害少等優(yōu)點，近年來隨著我國人民物質(zhì)文化水平的提高，粗肋草品種受到了國人的青睞，走進了千家萬戶。

粗肋草品種大多不耐寒，溫度低于12℃時容易出現(xiàn)明顯凍害，過冬加溫又存在能耗大、成本高的問題，嚴重影響了粗肋草產(chǎn)業(yè)的發(fā)展。而多倍體一般具有生長健壯、枝粗、葉厚、適應(yīng)性強和抗逆性強等特點，在現(xiàn)代植物育種中得到了廣泛的應(yīng)用。迄今，我國尚無人工獲得粗肋草多倍體的報道。本文旨在研究秋水仙堿處理對粗肋草叢生芽生長和誘變效應(yīng)的影響，為建立粗肋草多倍體育種技術(shù)奠定基礎(chǔ)。

1 材料與方法

1.1 材料 取東莞市生物技術(shù)研究所資源圃中紅霞粗肋草莖段（圖1），誘導(dǎo)叢生芽，繼代5代后，將穩(wěn)定正常生長的叢生芽去頂作為材料進行誘變試驗。

圖1 紅霞粗肋草

1.2 方法 參照蔣洪恩、劉孟軍的方法[2]，通過秋水仙堿混培法和浸泡法2種方法進行處理。混培法是將繼代培養(yǎng)14d的叢生芽去頂，剩余約0.5cm左右，轉(zhuǎn)接到含有0、0.1%、0.15%、0.2%、0.4%這5種不同秋水仙堿濃度的固體培養(yǎng)基上，分別共培養(yǎng)10d、20d、30d。浸泡法是將去頂?shù)膮采哭D(zhuǎn)到含有0.1%、0.15%、0.2%、0.4%這4種不同濃度秋水仙堿的液體培養(yǎng)基中，在轉(zhuǎn)速為90r/min的搖床上振蕩培養(yǎng)1d、2d、3d。每個組合處理100株。處理后的叢生芽接種到不含秋水仙堿的繼代培養(yǎng)基上培養(yǎng)2代（每代30d），接種時已褐變死亡的叢生芽不再轉(zhuǎn)接?；九囵B(yǎng)基成分為：MS+2-IP3.0mg/L+6-BA5.0mg/L+30g/L蔗糖。處理條件為溫度（26±2）℃，光照時間16n/d，光照強度為1 5001x。

1.3 處理材料的觀察與比較 處理后觀察變異植株的形態(tài)特征，叢生芽繼代2代后，統(tǒng)計致死率、變異率。將長有3～4片展葉的芽從基部切斷，轉(zhuǎn)到生根培養(yǎng)基上生根。生根培養(yǎng)基為1/2MS+2-IP 2mg/L+IBA 1mg/L+NAA0.1 mg/L+20g/L蔗糖+7g/L瓊脂，pH5.8。30d后，將生根3～4條，根長3cm左右的生根苗連瓶放在自然散射光的大棚內(nèi)煉苗14d。然后洗凈培養(yǎng)基，晾干苗上水分后種植在泥炭：珍珠巖=3∶1的基質(zhì)上，于溫室大棚中種植60d。將變異植株與對照一起放到最低溫度為10℃，最高溫度為15℃的人工氣候箱中種植30d，觀察變異植物的耐寒情況。

2 結(jié)果與分析

2.1 秋水仙堿處理對粗肋草叢生芽生長和誘變效應(yīng)的影響 經(jīng)過秋水仙堿處理后，粗肋草叢生芽生長明顯受到抑制，部分褐化，甚至死亡?；炫喾ê徒莘ㄌ幚砭苷T導(dǎo)粗肋草變異，變異植株在組培過程中表現(xiàn)出植株矮化、變粗，葉片卷曲、變厚，顏色變深的特征。

2種處理方法以浸泡法處理的變異率較高，結(jié)果如表1所示。隨著秋水仙堿濃度和處理時間的增加，叢生芽致死率越來越高。而變異率并不與秋水仙堿濃度和處理時間呈簡單正相關(guān)。在0.1%～0.15%濃度范圍內(nèi)，秋水仙堿濃度越高，誘變率越高；在相同秋水仙堿濃度下，處理時間越長，誘變率越高。0.15%濃度的秋水仙堿溶液振蕩培養(yǎng)處理2d誘變率最高，達到16.2%。繼續(xù)提高秋水仙堿濃度和處理時間，誘變率并不會提高，反而下降。未經(jīng)秋水仙堿處理的叢生芽，未發(fā)現(xiàn)有明顯變異，說明秋水仙堿能有效誘導(dǎo)粗肋草變異。

3 討論

本實驗通過秋水仙堿浸泡法和混培法2種方法處理粗肋草去頂叢生芽，獲得了變異植株，說明秋水仙堿處理方法在粗肋草多倍體育種中同樣適用。通過比較發(fā)現(xiàn)，浸泡法比混培法誘變效率更高，且浸泡法時間周期較短，所以叢生芽浸泡法最適合用于粗肋草多倍體育種。

本實驗發(fā)現(xiàn)，在一定范圍內(nèi)，隨著秋水仙堿濃度和處理時間的增加，粗肋草變異率增加，這與張志勝、謝利等[3]結(jié)果相似，但與何琳、張潔等[4]結(jié)果相反。這說明不同植物秋水仙堿處理的表現(xiàn)并不盡相同，需要找到不同植物各自最佳處理濃度與時間。

秋水仙堿誘導(dǎo)的粗肋草變異植株耐寒性增強，與多倍體普遍存在的抗逆性增強特性相符，說明可通過秋水仙堿處理的方法誘導(dǎo)耐寒性的粗肋草新品種，但變異植物染色體數(shù)目和加倍頻率還有待細胞學(xué)進一步鑒定。

參考文獻

[1]吳征鎰，李恒.中國植物志[M].北京：科學(xué)出版社，1979（13）：42-43.

[2]蔣洪恩，劉孟軍.秋水仙堿誘導(dǎo)棗多倍體的研究[J].園藝學(xué)報，2004，31（5）：647-650.

[3]張志勝，謝利，蕭愛興，等.秋水仙素處理蘭花原球莖對其生長和誘變效應(yīng)的影響[J].核農(nóng)學(xué)報，2005，19（1）：19-23.

[4]何林，張潔，郭啟高，等.東方百合Tiber多倍體誘導(dǎo)及其快繁研究[J].西南農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報：自然科學(xué)版，2006，28（6）：945-949.

（責編：張宏民）