摘 要:以西昌市巴汝鄉(xiāng)牧民自留燕麥種子為材料,采用溶液培養(yǎng)法,研究銅對燕麥種子萌發(fā)的影響。結(jié)果表明:在銅脅迫下,燕麥種子的發(fā)芽率、發(fā)芽勢隨著銅濃度的增加表現(xiàn)出先升高后降低的變化趨勢,并且在50mg/L時達到最高,促進種子的萌發(fā),同時銅也影響種子萌發(fā)時根芽中CAT的活性及MDA的含量。
關(guān)鍵詞:燕麥;銅;種子萌發(fā);MDA;CAT
中圖分類號 S512.6 文獻標識碼 A 文章編號 1007-7731(2013)21-15-02
銅是植物正常生長所必需的微量元素,是某些氧化酶的組成部分,并且銅又存在于葉綠體的質(zhì)體藍素中,而質(zhì)體藍素是光合作用電子傳遞體系的一員[1],如果缺乏將影響植物生長發(fā)育過程的代謝反應(yīng),但環(huán)境中銅過量亦會對植物的生長發(fā)育產(chǎn)生傷害。有關(guān)銅污染對植物危害的問題已經(jīng)引起人們的廣泛關(guān)注。本文研究了不同濃度的Cu2+對燕麥種子的發(fā)芽率、發(fā)芽勢以及萌發(fā)時根芽CAT活性、MDA含量的影響,以期為研究重金屬銅脅迫對燕麥種子萌發(fā)的影響提供一定的理論依據(jù)。
1 材料與方法
1.1 材料 以西昌市巴汝鄉(xiāng)牧民自留燕麥種子為材料。
1.2 方法
1.2.1 實驗設(shè)計 用CuSO4·5H2O配成濃度分別為20、50、80、110、140、170、200mg/L的銅溶液,以去離子水為對照。選取飽滿程度一致的燕麥種子,用0.1%HgCl2表面消毒5min,用去離子水沖洗種子數(shù)次,用吸水紙吸干種子表面的水,將種子放入鋪有2層濾紙的培養(yǎng)皿中(每皿50粒),每天定量加入相應(yīng)濃度的銅溶液,以保持培養(yǎng)皿處理濃度的穩(wěn)定。
1.2.2 測定指標與方法
發(fā)芽率(%)GR=(N0/N)×100 (1)
式(1)中,N0為發(fā)芽終期全部發(fā)芽的種子數(shù);N為供試種子數(shù)。
發(fā)芽勢(%)GE=(N4/N)×100 (2)
式(2)中,N4為種子發(fā)芽第4d的正常種子發(fā)芽數(shù);N為供試種子數(shù)。
CAT活性的測定采用碘量法測定[2-3]。MDA含量的測定用TBA法測定[2-3]。
2 結(jié)果與分析
2.1 銅脅迫對燕麥種子發(fā)芽率和發(fā)芽勢的影響 由圖1、圖2可知,在銅脅迫下燕麥種子7d的累積發(fā)芽率及發(fā)芽勢均呈波狀變化,不同濃度的銅脅迫對燕麥種子的發(fā)芽率及發(fā)芽勢均有一定的影響。在低濃度下,發(fā)芽率和發(fā)芽勢均呈現(xiàn)上升趨勢,銅處理濃度為50mg/L時,發(fā)芽率和發(fā)芽勢均最高,都為97.8%。隨著銅處理濃度的增大,發(fā)芽率、發(fā)芽勢逐漸下降,且發(fā)芽率、發(fā)芽勢均低于對照。
圖1 銅脅迫對燕麥種子發(fā)芽率的影響
圖2 銅脅迫對燕麥種子發(fā)芽勢的影響
2.2 銅脅迫對燕麥種子萌發(fā)時CAT活性的影響 由圖3可以看出:銅濃度對種子萌發(fā)7d后的根芽中過氧化氫酶(CAT)的活性具有一定的影響,從試驗結(jié)果來看,不同濃度的銅處理,酶的活性表現(xiàn)出不同的變化。所有脅迫都可以誘導(dǎo)CAT、SOD活性的增加,有效清除自由基,使膜的穩(wěn)定性增加[4]。CAT作為一種自由基的清除劑,對銅脅迫產(chǎn)生的膜的傷害有一定的緩解及解除作用,故在高濃度時(170mg/L)表現(xiàn)出活性較高。
圖3 銅脅迫對燕麥種子萌發(fā)時CAT活性的影響
2.3 銅脅迫對燕麥種子萌發(fā)時MDA含量的影響 丙二醛(MDA)含量可以反映植物遭受逆境傷害的程度。植物器官衰老或遭受逆境脅迫時,自由基堆積,導(dǎo)致膜脂過氧化水平增高,膜脂過氧化作用的最終分解產(chǎn)物MDA含量增加,膜脂成分改變,不飽和指數(shù)下降,膜的相對透性增加,膜結(jié)構(gòu)和功能發(fā)生改變,從而引起一系列的生理代謝變化[4]。由圖4可知,在銅脅迫下燕麥種子萌發(fā)時根芽MDA含量隨銅濃度的增加而增加,隨著脅迫程度的加強,膜遭受到的傷害亦越大。
圖4 銅脅迫對燕麥種子萌發(fā)時MDA含量的影響
3 結(jié)論與討論
銅是植物正常生長所必需的微量元素,同時又是一種重金屬,過量的銅會對植物體造成傷害。在銅脅迫下,燕麥種子萌發(fā)時根芽MDA含量隨銅濃度的增加而增加,隨著脅迫程度的加強,膜遭受到的傷害亦越大,而CAT作為一種自由基的清除劑,對銅脅迫產(chǎn)生的膜的傷害有一定的緩解及解除作用,故在高濃度時(170mg/L)表現(xiàn)出活性較高;低濃度的銅對種子萌發(fā)具有一定的促進作用,高濃度的銅降低燕麥種子的發(fā)芽率,在銅處理濃度為50mg/L時,燕麥種子發(fā)芽率和發(fā)芽勢均最高,這一結(jié)果與鄭愛珍、宋唯對黃瓜、玉米的研究一致[5]。有研究表明,重金屬對種子的萌發(fā)具有雙重效應(yīng),即在低濃度時表現(xiàn)出促進效應(yīng),在高濃度時表現(xiàn)出抑制效應(yīng)[6-8]。在本研究中,不同濃度的銅對燕麥種子的發(fā)芽率、發(fā)芽勢的影響不同,總體規(guī)律是隨著銅濃度的增加,發(fā)芽率、發(fā)芽勢呈先升后降的波狀變化趨勢,其中50mg/L的銅對燕麥種子的萌發(fā)具有促進作用。
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