結(jié)合珠蛋白在鱗癌診斷和鑒別診斷中的應(yīng)用初探

【摘 要】 目的：研究鱗癌患者與非鱗癌癌癥患者血清中結(jié)合珠蛋白（Haptoglobin，Hp）含量的差異，探討結(jié)合珠蛋白在鱗癌診斷過程中的應(yīng)用價(jià)值，為篩選鱗癌血清分子學(xué)標(biāo)志物提供依據(jù)。方法：收集30例鱗癌患者、26例非鱗癌癌癥患者血清為樣本，采用酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）定量檢測血清中結(jié)合珠蛋白。使用SPSS V17.0軟件分析鱗癌患者和非鱗癌癌癥患者血清結(jié)合珠蛋白含量的差異。結(jié)果：鱗癌患者血清結(jié)合珠蛋白含量（平均值：18.432mg/dl）明顯高于非鱗癌癌癥患者（平均值：11.361 mg/dl）。結(jié)論：血清結(jié)合珠蛋白檢測對鱗癌的診斷及鑒別診斷具有一定的臨床意義。

【關(guān)鍵詞】 鱗癌；結(jié)合珠蛋白；酶聯(lián)免疫吸附

【中圖分類號】 R730.43 【文獻(xiàn)標(biāo)識碼】 B

Haptoglobin in the diagnosis and differential diagnosis of

squamous cell carcinoma of the Application

Bian qianying

（High Hong Kong People's Hospital of Taizhou City， taizhou，Jiangsu， 225321）

【Abstract】 Objective： to study the serum haptoglobin cotent difference betwwen squamous cell carcinoma （SqCa） patients and non-SqCa subjects，to approach the application value of haptoglobin in SqCa diagnostic procedure，and to provide experimental evidence for fingding serum biomarkers of SqCa.Methods： ELISA（enzyme linked immunosorbent assay）was performed to detect the surum haptoglobin of the samples from 30 SqCa patients and 26 non- SqCa subjects . SPSS V17.0 was used to analysis the difference of haptoglobin cotent.Results： The haptoglobin cotent of squamous cell carcinoma （mean：18.432mg/dl）is significantly higher than the cotent of non-SqCa subjects （mean：11.361mg/dl）.Conclusion： The detection of haptoglobin has clinical significace on the diagnosis and differential diagnosis of SqCa.

【Keywords】 Squamous Cell Carcinoma；Haptoglobin；ELISA

結(jié)合珠蛋白（Hp）是一種存在于血漿中的糖蛋白，能夠通過結(jié)合游離的血紅素達(dá)到防止脈管系統(tǒng)和腎臟受游離血紅素誘發(fā)的氧化損傷的作用，此外結(jié)合珠蛋白還可以促進(jìn)血紅素鐵的循環(huán)[1]。在腫瘤發(fā)生發(fā)展進(jìn)程中結(jié)合珠蛋白在免疫抑制、血管生成和上皮細(xì)胞惡性轉(zhuǎn)化等方面發(fā)揮著作用[2]。有研究表明，結(jié)合珠蛋白在卵巢癌[3]、乳腺癌[4]等患者的血清中表達(dá)水平出現(xiàn)上調(diào)。這些研究結(jié)果提示，結(jié)合珠蛋白是一種潛在的腫瘤血清標(biāo)志物。本研究發(fā)現(xiàn)，在鱗癌患者血清中結(jié)合珠蛋白表達(dá)水平升高，提示結(jié)合珠蛋白在鱗癌診斷方面具有潛在的臨床應(yīng)用價(jià)值。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 血清樣本 本研究共收集30例鱗癌患者、26例非鱗癌癌癥患者血清為樣本。其中Ⅰ期鱗癌患者11例，Ⅱ期鱗癌患者8例，Ⅲ期鱗癌患者5例，Ⅳ期鱗癌患者6例。

1.1.2 檢測試劑盒 Human Hpt/Hp ELISA Kit（Catalogue Number H144-9）購自于Gbdeia公司。試劑盒包括如下試劑：生物素（Biological）、酶標(biāo)記物（Enzyme Conjugate）、標(biāo)準(zhǔn)品不同濃度6個（Standard Ⅰ-Ⅵ）、顯色液A、B（Substrate A、B）、終止液（Stop Solution）、濃縮洗液（Wash Solution）。

1.1.3 儀器 酶標(biāo)儀（Microplate Reader）為BIO-RAD公司產(chǎn)品。

1.2 方法

1.2.1 標(biāo)本采集 采集鱗癌患者及非鱗癌癌癥患者靜脈血2mL，室溫下血液凝固析出血清，3000r/min離心5min，吸取血清并分裝，-20℃保存，等待檢測。

1.2.2 Hp測定 取待測血清，稀釋15倍。采用ELISA，試劑盒為Gbdeia公司，嚴(yán)格按照說明書操作。

2 結(jié)果

實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示鱗癌患者組血清結(jié)合珠蛋白的平均含量為276.482ng/mL；而非鱗癌癌癥患者組血清結(jié)合珠蛋白的平均含量為170.419 ng/mL；統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)得兩組數(shù)據(jù)差異有顯著的統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t=8.516，P<0.01）。結(jié)果表明結(jié)合珠蛋白在鱗癌患者中呈現(xiàn)高表達(dá)趨勢（圖1）。

Ⅰ期、Ⅱ期、Ⅲ期、Ⅳ期鱗癌患者血清結(jié)合珠蛋白含量分別為234.472ng/mL、267.101ng/mL、284.496ng/mL、359.330 ng/mL，顯示血清結(jié)合珠蛋白含量隨著疾病的發(fā)展而呈現(xiàn)遞增趨勢。（圖2）

3 討論

腫瘤細(xì)胞在增殖生長的過程中不斷的向體液中分泌各種物質(zhì)，這些物質(zhì)不僅是腫瘤細(xì)胞自身生長、侵襲和轉(zhuǎn)移所必需，而且可通過檢測體液中這些物質(zhì)的水平來反映腫瘤的增殖生長。其中，以血清作為研究對象來尋找腫瘤標(biāo)志物，越來越受到研究者的關(guān)注和重視。目前，與鱗癌相關(guān)的腫瘤標(biāo)志物有：癌胚抗原（CEA）、神經(jīng)元特異的烯醇酶（NES）、糖類抗原19-9（CA19-9）、鱗狀細(xì)胞癌抗原（SCCAg）等[5]。在鱗癌療效監(jiān)測與病情等方面這些血清腫瘤標(biāo)志物有一定的參考價(jià)值，但由于這些腫瘤標(biāo)志物在特異性和或敏感性方面不夠理想，均不能作為早期診斷的檢測指標(biāo)[6，7]。尋找特異的、敏感的新鱗癌腫瘤標(biāo)志物已成為鱗癌早期診斷的關(guān)鍵。

結(jié)合珠蛋白（Hp）是一種廣泛存在于人的血清及其他液體中的酸性糖蛋白，其主要功能是通過與游離的血紅蛋白（Hb）結(jié)合形成HP-Hb復(fù)合體，將Hb運(yùn)至肝臟代謝，從而避免Hb和鐵從腎臟丟失以及對腎臟造成損傷。結(jié)合珠蛋白還參與損傷組織修復(fù)、維持內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定和抗感染。在腫瘤、創(chuàng)傷、炎癥、感染和心肌梗死等情況下，其在血清中的含量會顯著升高。此外，結(jié)合珠蛋白還有抑制前列腺素的合成、促進(jìn)血管生成、抗氧化、抑制細(xì)菌和重要的免疫作用[8]。近年來，將結(jié)合珠蛋白作為標(biāo)記位點(diǎn)，研究其與疾病的關(guān)系來探討某些疾病病因和發(fā)病機(jī)制已成為一個新的重要課題。

本實(shí)驗(yàn)通過ELISA定量檢測正常人與鱗癌患者血清內(nèi)結(jié)合珠蛋白的含量，研究其存在的差異及其臨床意義。有實(shí)驗(yàn)可以得出鱗癌患者血清中結(jié)合珠蛋白含量增高顯著，并且隨著疾病的發(fā)生發(fā)展而呈現(xiàn)遞增現(xiàn)象。結(jié)合珠蛋白對于鱗癌來說具有相對的特異性，提示結(jié)合珠蛋白對鱗癌的診斷和鑒別具有一定的臨床意義。在下一步研究中，我們將繼續(xù)收集鱗癌患者血清及鱗癌組織、癌旁組織，進(jìn)一步深入研究結(jié)合珠蛋白在鱗癌診斷中的應(yīng)用價(jià)值。

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